大鼠肺(fei)成纖(xian)維(wei)樣(yang)細胞；RL生(sheng)長特性(xing)​復(fu)蘇(su)操作(zuo)要(yao)點

大鼠肺(fei)成纖(xian)維(wei)樣(yang)細胞；RL生(sheng)長特性(xing)復(fu)蘇(su)操作(zuo)要(yao)點：

）將(jiang)培養(yang)基(ji)在(zai)37℃水浴鍋預熱；準備(bei)壹個(ge)5mL無(wu)菌的離心管(guan)，加(jia)入(ru)8mL預熱(re)培(pei)養(yang)基(ji)。

2）將(jiang)凍存(cun)細胞從液氮(dan)罐(guan)中(zhong)取出(chu)，快(kuai)速放入(ru)37℃水浴鍋中(zhong)復(fu)溫（可(ke)準備(bei)壹潔(jie)凈(jing)的燒(shao)杯(bei)，裝(zhuang)滿37℃的水，細胞凍存(cun)管(guan)取出(chu)後(hou)迅(xun)速放入(ru)燒(shao)杯(bei)內，再(zai)逐步轉移(yi)到水浴鍋中(zhong)）。輕(qing)輕晃(huang)動凍存(cun)管(guan)，使(shi)細胞能(neng)在~2min內(nei)*解凍，使(shi)細胞能(neng)盡(jin)快(kuai)通(tong)過(guo)zui易(yi)受(shou)損(sun)的(de)溫度段（-5~0℃）。註(zhu)意凍存(cun)管(guan)管(guan)口(kou)不能(neng)沒入(ru)水中(zhong)，BRL(大鼠肝(gan)細胞)避免引(yin)起(qi)汙染。

3）用(yong)75%酒精(jing)擦(ca)拭(shi)凍存(cun)管(guan)後(hou)再(zai)置於(yu)超(chao)凈(jing)臺內(nei)，將(jiang)管內(nei)細胞轉移(yi)至(zhi)準備(bei)好的(de)離心(xin)管(guan)內(nei)，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)液體(ti)，使(shi)細胞均(jun)勻分散(san)，降(jiang)低(di)DMSO濃度，吹(chui)打(da)時避免產生(sheng)氣(qi)泡(pao)。用(yong)新鮮培養基(ji)洗(xi)管(guan)壁2次(ci)，均轉移(yi)至(zhi)離(li)心管內(nei)。

4）800rpm離(li)心5min，棄(qi)上(shang)清(qing)，加(jia)入(ru)新鮮(xian)的(de)培(pei)養基(ji)，吹(chui)打(da)制成細胞懸(xuan)液(ye)。

5）將細胞懸(xuan)液(ye)轉移(yi)至(zhi)T25細胞瓶內，補加適量的(de)培養基(ji)，輕(qing)輕(qing)晃(huang)動細胞瓶使(shi)細胞分布(bu)均(jun)勻，放入(ru)溫箱內(nei)培(pei)養。

6）第二(er)天(tian)觀(guan)察(cha)細胞貼壁生(sheng)長情況，換(huan)新(xin)鮮培養基(ji)以(yi)去除死細胞。繼續(xu)培養(yang)，待(dai)細胞長至(zhi)80~90%匯(hui)合(he)時正(zheng)常(chang)傳代。壹(yi)般(ban)剛(gang)復(fu)蘇(su)的細胞需(xu)經過(guo)2~3次(ci)傳代，細胞活(huo)力(li)恢復(fu)後(hou)才能(neng)進行後(hou)續(xu)的實驗。

相關產品(pin)信(xin)息：

DH5α感受態(tai)細胞(化(hua)學轉化(hua)法或(huo)熱(re)激法）20×00ul

DH5α感受態(tai)細胞(化(hua)學轉化(hua)法或(huo)熱(re)激法）00×00ul

DH5α-λpir感受態(tai)細胞(化(hua)學轉化(hua)法或(huo)熱(re)激法）0×00ul

TOP0感受態(tai)細胞(化(hua)學轉化(hua)法或(huo)熱(re)激法）20×00ul

TOP0F´感受態(tai)細胞(化(hua)學轉化(hua)法或(huo)熱(re)激法）0×00ul

JM09感受態(tai)細胞(化(hua)學轉化(hua)法或(huo)熱(re)激法）20×00ul

JM0感受態(tai)細胞(化(hua)學轉化(hua)法或(huo)熱(re)激法）20×00ul

XL-Blue感受態(tai)細胞(化(hua)學轉化(hua)法或(huo)熱(re)激法）20×00ul

XL2-Blue感受態(tai)細胞(化(hua)學轉化(hua)法或(huo)熱(re)激法）20×00ul

DB3.感受態(tai)細胞(化(hua)學轉化(hua)法或(huo)熱(re)激法）20×00ul

Stbl2感受態(tai)細胞(化(hua)學轉化(hua)法或(huo)熱(re)激法）0×00ul

Stbl3感受態(tai)細胞(化(hua)學轉化(hua)法或(huo)熱(re)激法）20×00ul

XL0-Gold感受態(tai)細胞(化(hua)學轉化(hua)法或(huo)熱(re)激法）20×00ul

TG感受態(tai)細胞(化(hua)學轉化(hua)法或(huo)熱(re)激法）0×00ul

HB0感受態(tai)細胞(化(hua)學轉化(hua)法或(huo)熱(re)激法）0×00ul

SURE感受態(tai)細胞(化(hua)學轉化(hua)法或(huo)熱(re)激法）0×00ul

DH0B感受態(tai)細胞(化(hua)學轉化(hua)法或(huo)熱(re)激法）20×00ul