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山羊(yang)催乳(ru)素(su)(PRL)elisa檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒操作(zuo)流(liu)程描敘(xu):
、將要進(jin)行(xing)實(shi)驗的(de)版(ban)孔(kong)進(jin)行(xing)設(she)定好(hao),標(biao)準(zhun)品(pin) 5 個(ge)點,每(mei)個(ge)點設(she)定平行(xing),需要用(yong)到 0 個(ge)孔,空白只(zhi)需 個(ge)孔。剩下孔(kong)可(ke)以做(zuo)為(wei)樣(yang)本(ben)孔(kong)
2、 稀(xi)釋(shi)標準,準(zhun)備(bei)好(hao) 5 個(ge) EP 管(guan),然後(hou)在(zai)每(mei)個(ge) EP 管(guan)中加入(ru) 50 微(wei)升(sheng)標(biao)準(zhun)稀(xi)釋(shi)液,編(bian)上編(bian)碼,分別為(wei) ,2,3,4,5,在(zai) 號(hao)管(guan)中加入(ru) 50 標準品(pin),用(yong)槍(qiang)頭反(fan)復(fu)吹(chui)打 0 次左(zuo)右(註(zhu)意(yi)控制(zhi)幅(fu)度(du)不(bu)要過大容易產(chan)生氣(qi)泡(pao))如果(guo)有(you)渦旋儀(yi)可(ke)以(yi)在(zai)渦旋儀(yi)上(shang)渦旋 5 秒(miao)左(zuo)右,然後(hou)換槍(qiang)頭,在(zai) 號(hao)管(guan)中取(qu) 50 微(wei)升(sheng)加入(ru)到 2 號(hao)管(guan),後面過程壹(yi)次類推。最後(hou)稀(xi)釋(shi)完,前(qian)面 4 個(ge)管(guan)中每(mei)管(guan)液體在 50 微(wei)升(sheng),5 號(hao)管(guan)為 300 微(wei)升(sheng)。濃(nong)度(du)是從(cong)大到小。
3、 標準(zhun)、樣(yang)本(ben)、空白加樣(yang):標(biao)準是每(mei)個(ge)濃度(du)點 2 個(ge)孔(做平行),每(mei)孔加入(ru) 50 微(wei)升(sheng),加樣(yang)過(guo)程中註(zhu)意(yi)換槍(qiang)頭,樣(yang)本(ben)孔(kong)中(zhong)每(mei)孔加入(ru) 50 微(wei)升(sheng),加樣(yang)過(guo)程中註(zhu)意(yi)換槍(qiang)頭,空白孔加入(ru) 50 微(wei)升(sheng)標(biao)準(zhun)稀(xi)釋(shi)液或者樣(yang)本(ben)稀(xi)釋(shi)液。特(te)別要說(shuo)明的(de)是(shi),標(biao)準加樣(yang)和(he)樣(yang)本(ben)加樣(yang)盡(jin)量(liang)控制(zhi)在(zai) 5 分鐘(zhong)內(nei)加完,如果(guo)時間拖的(de)太(tai)長,會導(dao)致(zhi)前(qian)面孔先(xian)反(fan)應(ying)後面孔才(cai)開(kai)始(shi)反(fan)應(ying),這(zhe)樣(yang)數(shu)值偏差過大。加完樣(yang)後(hou)蓋(gai)上(shang)封(feng)板(ban)膜(mo),至 37 攝(she)氏(shi)度(du)孵(fu)育(yu) 30 分鐘(zhong).
4、洗版(ban),在(zai)孵(fu)育(yu)過程中可以將(jiang)洗(xi)滌(di)液配好(hao),20 ml30 倍(bei)濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌(di)液用(yong)蒸餾(liu)水或者去離(li)子(zi)水(shui)定容到 600 ml 即可。每(mei)孔加入(ru) 250-300 微(wei)升(sheng)的(de)洗(xi)滌(di)液(不(bu)要漫過版(ban)孔(kong)),(如果(guo)有(you)震蕩(dang)儀(yi)的(de)話(hua),可(ke)以講板(ban)子(zi)放入(ru)震蕩(dang)儀(yi)上(shang) 5 秒(miao)左(zuo)右,然後(hou)靜(jing)止(zhi)三十秒(miao),沒(mei)有請(qing)忽略次過(guo)程)將板子(zi)在(zai)桌(zhuo)子(zi)上(shang)晃動 5 秒(miao)左(zuo)右,然後(hou)靜(jing)置(zhi) 30 秒(miao),甩幹,拍板(ban)。說(shuo)明:甩幹過程盡(jin)量(liang)要快, 秒(miao)內(nei)就(jiu)可以完成(cheng),不(bu)要慢慢傾斜(xie)倒掉液體,直接(jie)翻板(ban)甩掉液體即可(ke)。拍(pai)板過程需要在桌(zhuo)子(zi)上(shang)墊(dian)壹(yi)層吸水(shui)紙或者濾紙(zhi),版(ban)孔(kong)朝(chao)下拍(pai)幾(ji)下,拍(pai)幹區(qu)別主要看吸水紙(zhi)和(he)濾(lv)紙上沒(mei)有明(ming)顯(xian)的(de)水(shui)漬為完成(cheng)。
5、每(mei)孔加入(ru) 50 微(wei)升(sheng)的(de)酶(mei)標(biao)試(shi)劑(ji),此(ci)處在(zai)空白孔中(zhong)不(bu)需要加(空白孔為(wei)空),孵(fu)育(yu) 30 分鐘(zhong)。
6、 洗版(ban)同(tong)步(bu)驟(zhou) 4
7、顯(xian)色,先每(mei)孔中(zhong)加入(ru) 50 微(wei)升(sheng)的(de)顯(xian)色 A 液,然後(hou)每(mei)孔中(zhong)加入(ru) 50 微(wei)升(sheng)顯(xian)色 B 液。避光(guang) 37 攝(she)氏(shi)度(du)顯(xian)色 5 分鐘(zhong)
8、終止,每(mei)孔加入(ru) 50 微(wei)升(sheng)的(de)終(zhong)止(zhi)液,註(zhu)意(yi),加完終(zhong)止(zhi)液必(bi)須在 5 分鐘(zhong)內(nei)讀(du)數,超(chao)過(guo)時間讀(du)數無效。在(zai)規(gui)定時間內(nei)讀(du)數都(dou)是(shi)有(you)效的(de)。
9、至此(ci),整個(ge)實(shi)驗結束(shu)。
需要額(e)外提醒(xing)的(de)是(shi):
在(zai)做完整個(ge)實(shi)驗過儀(yi)器之(zhi)前(qian),儀(yi)器最(zui)好(hao)預(yu)熱(re)半(ban)小(xiao)時,這(zhe)個(ge)計算好(hao)時間,也可以直接(jie)將儀(yi)器壹(yi)直開(kai)著(zhe),直到整個(ge)實(shi)驗結束(shu)。
在加液過程中不(bu)要使槍頭觸(chu)及(ji)到板子(zi)底(di)部(bu),壹(yi)般(ban)槍頭都(dou)懸(xuan)空,可以將槍(qiang)頭靠(kao)在(zai)孔(kong)邊緣(yuan),但(dan)槍(qiang)頭尖(jian)懸(xuan)空,如果(guo)槍(qiang)頭上(shang)殘(can)留液體看整體多少(shao)量(liang),不(bu)要吹(chui)打下去。特(te)別忌(ji)諱在版(ban)孔(kong)內(nei)壁(bi)流(liu)向版(ban)孔(kong)。整個(ge)加液過程不(bu)要產生氣泡(pao)。(洗(xi)滌(di)液除外)
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