.即(ji)開(kai)即(ji)用,十分(fen)簡單方便(bian),尤其(qi)在生(sheng)物(wu)制藥(yao)和(he)酶學(xue)研(yan)究(jiu)領(ling)域(yu)顯(xian)示出(chu)了(le)它的*性(xing)。
2.配(pei)方經(jing)過(guo)精心優(you)化,突(tu)變率穩定,突(tu)變沒有趨向性(xing)。
3.比(bi)體(ti)內(nei)基(ji)因(yin)突(tu)變更(geng)快捷(jie)簡單,但如果(guo)在PCR引(yin)物中設計(ji)位(wei)點,則(ze)可使產(chan)物克(ke)隆到(dao)表(biao)達載體(ti),也可以用於體(ti)內(nei)蛋白(bai)活性的篩選。
4.可用於連續易錯(cuo)PCR,只需(xu)把(ba)上壹(yi)次易錯(cuo)PCR的產(chan)物用作(zuo)下壹次易錯(cuo)PCR的模(mo)板(ban)即(ji)可,使每壹次(ci)獲(huo)得的(de)小突(tu)變累積而產(chan)生(sheng)重(zhong)要的(de)有益(yi)突(tu)變。
5.只適(shi)用於擴(kuo)增kb以(yi)下(xia)的產(chan)物,對(dui)於kb以(yi)上的(de)產(chan)物,建議(yi)分(fen)段擴增。
二(er)、註(zhu)意事項(xiang):
、用於cDNA合(he)成(cheng)反(fan)應(ying)的(de)相關試劑(ji)和(he)耗(hao)材盡可能用DEPC進(jin)行(xing)處(chu)理,並(bing)在高(gao)壓(ya)滅(mie)菌(jun)後,首先(xian)用經過(guo)滅菌的(de)器具、水(shui)等(deng)配(pei)制溶液後(hou),再(zai)將(jiang)溶(rong)液(ye)進(jin)行(xing)過(guo)濾(lv)除(chu)菌處理。
2、PCR試劑(ji)盒(he)的(de)各(ge)組分應在-20℃保(bao)存(cun),避免反(fan)復凍融(rong),有(you)效期2個(ge)月。
3、RNA樣(yang)品要避免反(fan)復多(duo)次凍融(rong),應(ying)使(shi)RNA在冰(bing)浴(yu)中處於融(rong)化(hua)狀(zhuang)態(tai)。
4、試劑(ji)盒(he)各(ge)組(zu)份使用前(qian)請充(chong)分(fen)融(rong)化(hua)並(bing)搖(yao)勻(yun),離心管(guan)內(nei)的試劑(ji)需(xu)離心數秒後使用。
5、PCR操(cao)作(zuo)人(ren)員(yuan)應(ying)具有經驗(yan)和(he)受(shou)過(guo)培訓。