人CREB調(tiao)節(jie)轉錄(lu)輔(fu)激活(huo)因子洗(xi)滌(di)方法

人(ren)CREB調節(jie)轉錄(lu)輔(fu)激活(huo)因子洗(xi)滌(di)方法：

. 自(zi)動(dong)洗(xi)板機：每(mei)孔(kong)加(jia)入洗(xi)滌(di)液350μl，註入與吸(xi)出(chu)間(jian)隔(ge)60秒。洗(xi)板5次。

2. 手工洗(xi)板：甩(shuai)盡(jin)孔(kong)內液體，在潔(jie)凈(jing)的吸(xi)水紙上拍(pai)幹，每(mei)孔(kong)加(jia)洗(xi)滌(di)液350μl，浸泡(pao)-2分鐘(zhong)，吸(xi)去(不(bu)可觸(chu)及(ji)板壁)或(huo)甩(shuai)掉酶(mei)標板內的液體，在厚(hou)的吸(xi)水紙上拍(pai)幹。洗(xi)板5次。

實(shi)驗開(kai)始前(qian)，各(ge)試(shi)劑(ji)均(jun)應平(ping)衡(heng)至室(shi)溫；試劑(ji)或(huo)樣品(pin)配(pei)制時(shi)，均(jun)需充(chong)分混勻，並盡量避(bi)免(mian)起(qi)泡(pao)。

.加(jia)樣：分別設(she)空(kong)白孔(kong)、標(biao)準(zhun)孔(kong)、待(dai)測樣(yang)品孔(kong)。空(kong)白孔(kong)加(jia)樣品稀釋液00μl，余(yu)孔(kong)分別加(jia)標準(zhun)品或(huo)待(dai)測樣(yang)品00μl，註意(yi)不(bu)要(yao)有(you)氣(qi)泡，加(jia)樣時(shi)將樣(yang)品(pin)加(jia)於酶(mei)標板底部(bu)，盡量(liang)不(bu)觸及(ji)孔(kong)壁，輕輕晃動(dong)混勻。給(gei)酶(mei)標板覆膜，37℃孵(fu)育(yu)2小(xiao)時(shi)。為保(bao)證(zheng)實(shi)驗結(jie)果(guo)有(you)效性，每次實(shi)驗請使用新(xin)的標(biao)準(zhun)品溶(rong)液。

2.棄去液體，甩(shuai)幹，每(mei)個(ge)孔(kong)中(zhong)加(jia)入Detection Ab工作液 00μl(在使用前(qian)5分鐘(zhong)內配(pei)制)，酶(mei)標板加(jia)上覆膜，37℃溫育(yu)小(xiao)時(shi)。

3.棄(qi)去孔(kong)內液體，甩(shuai)幹，洗(xi)板 3次，每次浸泡-2分鐘(zhong)，大(da)約(yue)350μl /每(mei)孔(kong)，甩(shuai)幹並(bing)在吸(xi)水紙上輕拍(pai)將孔(kong)內液體拍(pai)幹。

4.每(mei)孔(kong)加(jia)HRP Conjugate工作液(臨用前(qian)5分鐘(zhong)內配(pei)制)00μl，加(jia)上覆膜，37℃溫育(yu)小(xiao)時(shi)。

5.棄(qi)去孔(kong)內液體，甩(shuai)幹，洗(xi)板5次，方法同步驟(zhou)3。

6.每孔(kong)加(jia)底物溶(rong)液00μl，酶(mei)標板加(jia)上覆膜37℃避(bi)光(guang)孵(fu)育(yu)5分鐘(zhong)左右(you)(根(gen)據實(shi)際顯色情況酌情縮(suo)短或(huo)延長，但不(bu)可超過(guo)30分鐘(zhong)。當標準(zhun)孔(kong)出(chu)現(xian)明(ming)顯梯度時(shi)，即(ji)可終(zhong)止(zhi))。

7.每(mei)孔(kong)加(jia)終(zhong)止(zhi)液50μl，終(zhong)止(zhi)反(fan)應(ying)，此(ci)時(shi)藍色立(li)轉黃(huang)色。終(zhong)止(zhi)液的加(jia)入順序(xu)應盡量(liang)與(yu)底物液的加(jia)入順序(xu)相同。

8.立(li)即用酶(mei)標儀(yi)在450nm波(bo)長測量各(ge)孔(kong)的光(guang)密(mi)度(OD值)。應(ying)提(ti)前(qian)打開(kai)酶(mei)標儀(yi)電(dian)源(yuan)，預熱儀(yi)器，設(she)置好(hao)檢測程序(xu)。

9.實(shi)驗完(wan)畢(bi)後(hou)將未(wei)用完(wan)的試(shi)劑(ji)按(an)規定的保(bao)存溫度放(fang)回(hui)冰箱保(bao)存至有(you)效期(qi)結(jie)束(shu)。

小鼠甲狀腺(xian)素(su)抗(kang)體(TAb)ELISA試劑(ji)盒

小鼠甲(jia)狀腺素(su)(T4)ELISA試劑(ji)盒

小鼠甲(jia)狀腺球(qiu)蛋白(TG)ELISA試劑(ji)盒

小鼠甲(jia)狀腺過(guo)氧(yang)化物酶(mei)(TPO)ELISA試劑(ji)盒

小鼠甲(jia)狀旁(pang)腺激素(su)相關(guan)蛋(dan)白(PTHrP)ELISA試劑(ji)盒

小鼠甲(jia)狀旁(pang)腺激素(su)(PTH)ELISA試劑(ji)盒

小鼠甲(jia)種胎兒(er)球(qiu)蛋白/甲胎蛋(dan)白(AFP)ELISA試劑(ji)盒

小鼠甲(jia)基化酶(mei)(Methylase)ELISA試劑(ji)盒

小鼠己糖激酶(mei)(HK)ELISA試劑(ji)盒

小鼠極低密度脂蛋白受體(VLDLR)ELISA試劑(ji)盒

小鼠極低密度脂蛋白(VLDL)ELISA試劑(ji)盒

小鼠基質細胞衍生因子(zi)β(SDF-β/CXCL2)ELISA試劑(ji)盒

小鼠基質細胞衍生因子(zi)α(SDF-α/SDFA)ELISA試劑(ji)盒

小鼠基質細胞衍生因子(zi)a(SDF-a/CXCL2)ELISA試劑(ji)盒

小鼠基質金(jin)屬蛋白酶(mei)抑制因子(zi)4(TIMP-4)ELISA試劑(ji)盒

小鼠基質金(jin)屬蛋白酶(mei)抑制因子(zi)3(TIMP-3)ELISA試劑(ji)盒

小鼠基質金(jin)屬蛋白酶(mei)抑制因子(zi)2(TIMP-2)ELISA試劑(ji)盒

小鼠基質金(jin)屬蛋白酶(mei)抑制因子(zi)(TIMP-)ELISA試劑(ji)盒

小鼠基質金(jin)屬蛋白酶(mei)9/明膠(jiao)酶(mei)B(MMP-9/Gelatinase B)ELISA試劑(ji)盒

小鼠基質金(jin)屬蛋白酶(mei)9(MMP-9)ELISA試劑(ji)盒

小鼠基質金(jin)屬蛋白酶(mei)8/中性粒細胞膠原酶(mei)(MMP-8)ELISA試劑(ji)盒

小鼠基質金(jin)屬蛋白酶(mei)7(MMP-7)ELISA試劑(ji)盒

小鼠基質金(jin)屬蛋白酶(mei)5(MMP-5)ELISA試劑(ji)盒

小鼠基質金(jin)屬蛋白酶(mei)4(MMP-4)ELISA試劑(ji)盒

小鼠基質金(jin)屬蛋白酶(mei)3(MMP-3)ELISA試劑(ji)盒

小鼠基質金(jin)屬蛋白酶(mei)2/明膠(jiao)酶(mei)A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑(ji)盒

小鼠基質金(jin)屬蛋白酶(mei)3(MMP-3)ELISA試劑(ji)盒