【概(gai)要(yao)描(miao)述】大鼠(shu)棕(zong)色前(qian)脂(zhi)肪細(xi)胞(bao)公(gong)司正在出售(shou)的(de)產(chan)品：IGR-1黑(hei)瘤(liu)豬輸(shu)尿(niao)管(guan)成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)豬甲(jia)狀腺(xian)上(shang)皮(pi)細胞(bao)豬垂體細(xi)胞(bao)豬基(ji)質細胞(bao)豬腎(shen)上(shang)腺(xian)髓質細(xi)胞(bao)豬胰(yi)腺(xian)導(dao)管(guan)上(shang)皮(pi)細胞(bao)豬胰(yi)腺(xian)腺(xian)泡上(shang)皮(pi)細胞(bao)豬成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)豬睪(gao)丸(wan)支(zhi)持細胞(bao)

大鼠(shu)棕(zong)色前(qian)脂(zhi)肪分(fen)離自(zi)棕(zong)色脂(zhi)肪組(zu)織；動(dong)物體內(nei)存在棕(zong)色和(he)白色兩(liang)種(zhong)脂肪，白色脂(zhi)肪堆(dui)積在皮(pi)下(xia)，負責儲存多余熱量；棕(zong)色脂(zhi)肪負責分(fen)解(jie)引(yin)發肥胖的(de)白色脂(zhi)肪，將(jiang)後(hou)者轉(zhuan)化成(cheng)二(er)氧(yang)化碳(tan)、水和(he)熱(re)量，本身(shen)不(bu)儲存熱量。棕(zong)色脂(zhi)肪組(zu)織呈棕(zong)色，其特(te)點是(shi)組(zu)織中(zhong)有(you)豐(feng)富的(de)毛(mao)細血(xue)管(guan)，脂肪細(xi)胞(bao)內散著(zhe)許多小脂(zhi)滴(di)，線粒體(ti)大而豐(feng)富，核(he)圓形，位於(yu)細(xi)胞(bao)中(zhong)央，這(zhe)種脂(zhi)肪細(xi)胞(bao)也稱(cheng)為多(duo)泡(pao)脂(zhi)肪細(xi)胞(bao)。棕(zong)色脂(zhi)肪組(zu)織在成(cheng)年(nian)動(dong)物極少，新(xin)生(sheng)兒(er)及(ji)冬(dong)眠(mian)動(dong)物較(jiao)多，在(zai)新(xin)生(sheng)兒(er)主要(yao)分(fen)布在(zai)肩胛間區、腋(ye)窩及頸後部(bu)等處。棕(zong)色脂(zhi)肪組(zu)織僅在嬰兒(er)時(shi)期發(fa)揮作(zuo)用，它們堆積在新(xin)生(sheng)兒(er)肩胛處，幫助(zhu)維(wei)持體溫(wen)。隨著(zhe)年(nian)齡(ling)增(zeng)長(chang)，棕(zong)色脂(zhi)肪會(hui)逐漸消(xiao)失。最終，動(dong)物體內(nei)只(zhi)殘(can)存少量棕(zong)色脂(zhi)肪細(xi)胞(bao)，分(fen)布於(yu)頸部和(he)鎖(suo)骨(gu)。脂(zhi)肪組(zu)織在體內含有(you)兩種主要(yao)的(de)細(xi)胞(bao)：壹種是(shi)在(zai)胞(bao)漿(jiang)內(nei)積聚(ju)脂滴(di)的(de)成(cheng)熟(shu)脂(zhi)肪細(xi)胞(bao)；另壹種是(shi)雖(sui)未在(zai)胞(bao)漿(jiang)內(nei)積聚(ju)脂滴(di)但(dan)有(you)這(zhe)種潛能的(de)前(qian)脂(zhi)肪細(xi)胞(bao)。前(qian)脂(zhi)肪細(xi)胞(bao)呈梭形，有(you)分(fen)裂和(he)增(zeng)殖(zhi)的(de)能力；成(cheng)熟(shu)的(de)脂(zhi)肪細(xi)胞(bao)呈圓形，已經失(shi)去(qu)了(le)分(fen)裂及(ji)增(zeng)殖(zhi)的(de)能力。由(you)於(yu)前(qian)脂(zhi)肪細(xi)胞(bao)是(shi)壹類具有(you)增(zeng)殖(zhi)和(he)向(xiang)脂(zhi)肪細(xi)胞(bao)分(fen)化能力的(de)特(te)異(yi)化前(qian)體(ti)細胞(bao)，與肥胖有(you)著(zhe)非(fei)常密(mi)切(qie)的(de)關(guan)系(xi)。前(qian)脂(zhi)肪細(xi)胞(bao)是(shi)壹種類成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)，在演(yan)變(bian)的(de)過(guo)程中(zhong)不(bu)斷(duan)吸(xi)收脂(zhi)質(zhi)，最終成(cheng)為(wei)成(cheng)熟(shu)的(de)脂(zhi)肪細(xi)胞(bao)。前(qian)脂(zhi)肪細(xi)胞(bao)對外(wai)界機械損(sun)傷(shang)的(de)抵(di)抗力較(jiao)強，可望成(cheng)為(wei)軟(ruan)組(zu)織缺損(sun)的(de)有(you)益填(tian)充(chong)物。
方(fang)法簡介：

公(gong)司實驗室(shi)分(fen)離的(de)大鼠(shu)棕(zong)色前(qian)脂(zhi)肪采(cai)用(yong)膠原酶消(xiao)化法(fa)制(zhi)備而(er)來(lai)，細胞(bao)總量約為5×10?cells/瓶(ping)。
質(zhi)量檢測：

公(gong)司實驗室(shi)分(fen)離的(de)大鼠(shu)棕(zong)色前(qian)脂(zhi)肪經(jing)油(you)紅O染(ran)色檢(jian)測(ce)，純度(du)可達90%以上(shang)，且不(bu)含有(you)HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xi)菌(jun)、酵(jiao)母(mu)和(he)真(zhen)菌(jun)等(deng)。

本公(gong)司所有(you)產(chan)品僅供科學實驗(yan)，不(bu)做(zuo)其他(ta)科學實驗(yan)外的(de)使用！

培養(yang)基 含(han)FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換(huan)液頻率(lv) 每(mei)2-3天(tian)換(huan)液壹次

生(sheng)長特(te)性(xing) 貼(tie)壁

細(xi)胞(bao)形態(tai) 成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)樣

傳代(dai)特(te)性(xing) 可傳5代(dai)左右；3代(dai)以內狀態(tai)

消化液 0.25%yi蛋(dan)白酶

培養(yang)條(tiao)件(jian) 氣相(xiang)：空氣，95%；CO2，5%

準備工(gong)作(zuo)

1. 實驗器材準(zhun)備：準(zhun)備無菌(jun)的(de)培養(yang)皿、培養(yang)瓶、移(yi)液管(guan)、離心(xin)管(guan)、手術(shu)器械等，並進(jin)行高壓滅菌(jun)或其他(ta)合適的(de)消(xiao)毒處理(li)。

2. 試(shi)劑準備：配制(zhi)或購(gou)買(mai)合適的(de)培養(yang)基、消(xiao)化酶(mei)（如、膠原酶等(deng)）、胎(tai)牛血(xue)清、雙(shuang)抗等(deng)試(shi)劑，確保其無菌(jun)且在有(you)效期內。

3. 實驗動(dong)物或組(zu)織來源準(zhun)備：根(gen)據(ju)實驗需求，選(xuan)擇合(he)適的(de)動(dong)物並進(jin)行相應(ying)的(de)麻(ma)醉或處死(si)，獲(huo)取(qu)所需組(zu)織；或從已有(you)的(de)組(zu)織樣本庫(ku)中(zhong)獲(huo)取(qu)組(zu)織。

取材與處理(li)

1. 取(qu)材：在(zai)無菌(jun)條(tiao)件(jian)下(xia)，迅(xun)速(su)取出目(mu)標(biao)組(zu)織，盡量減少對(dui)組(zu)織的(de)損(sun)傷(shang)，並(bing)去(qu)除(chu)多(duo)余的(de)脂(zhi)肪、結(jie)締(di)組(zu)織等非(fei)目(mu)的(de)組(zu)織。

2. 清洗(xi)：將(jiang)取(qu)出的(de)組(zu)織用預(yu)冷的(de)無菌(jun)PBS沖(chong)洗(xi)數次，以去(qu)除(chu)血(xue)液和(he)雜(za)質。

3. 剪(jian)切(qie)：將(jiang)組(zu)織剪(jian)成(cheng)約(yue)1 - 2mm³的(de)小塊(kuai)，以便後(hou)續(xu)消化。

細胞(bao)分(fen)離

1. 消化：將(jiang)剪(jian)碎(sui)的(de)組(zu)織塊放(fang)入含(han)有(you)適量消化酶(mei)的(de)離心(xin)管(guan)中(zhong)，在37℃恒(heng)溫(wen)搖(yao)床(chuang)或培養(yang)箱(xiang)中(zhong)消化壹段(duan)時(shi)間。期(qi)間可輕(qing)輕(qing)搖(yao)晃離心(xin)管(guan)，使消化更(geng)均勻(yun)。

2. 終止(zhi)消化：當(dang)組(zu)織塊大部分(fen)被(bei)消化成(cheng)單(dan)細(xi)胞(bao)懸液或小細(xi)胞(bao)團(tuan)時(shi)，加入含(han)血(xue)清的(de)培養(yang)基終止(zhi)消化。

3. 過(guo)濾與離心(xin)：用(yong)細胞(bao)篩過(guo)濾細胞(bao)懸液，去(qu)除(chu)未消(xiao)化的(de)組(zu)織碎(sui)片(pian)，然後(hou)將(jiang)濾(lv)液以適當的(de)轉(zhuan)速(su)離心(xin)，收(shou)集細胞(bao)沈(chen)澱。

細胞(bao)觀察與檢測

1. 日(ri)常觀察：每(mei)天(tian)用(yong)倒置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡(jing)觀察細(xi)胞(bao)的(de)形態(tai)、生長(chang)狀態(tai)、密度(du)等，記(ji)錄細胞(bao)的(de)變(bian)化情(qing)況(kuang)，如發(fa)現細(xi)胞(bao)汙染(ran)或異(yi)常，及(ji)時(shi)采取(qu)相應(ying)措(cuo)施。
2. 細胞(bao)計(ji)數與活(huo)力檢(jian)測(ce)：在(zai)需(xu)要(yao)時(shi)，可采用臺(tai)盼藍(lan)染(ran)色等(deng)方(fang)法對(dui)細胞(bao)進行計(ji)數和(he)活(huo)力檢(jian)測(ce)，以了解(jie)細(xi)胞(bao)的(de)生(sheng)長情(qing)況(kuang)和(he)健(jian)康狀態(tai)。

壹、取材與分(fen)離

1. 快速(su)操(cao)作(zuo)

- 組(zu)織取材後(hou)需(xu)立(li)即處理(li)，避(bi)免長(chang)時(shi)間暴露於(yu)室(shi)溫(wen)或非(fei)營養(yang)環境(jing)。

- 使用無菌(jun) PBS 或生(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui)沖(chong)洗(xi)組(zu)織，去(qu)除(chu)血(xue)液、雜(za)質。

2. 消化酶(mei)選(xuan)擇

- 根據(ju)組(zu)織類型(xing)選(xuan)擇(ze)消(xiao)化酶(mei)，避(bi)免過(guo)度消化導(dao)致(zhi)細(xi)胞(bao)損(sun)傷(shang)。

- 消化時(shi)間需(xu)嚴格(ge)控(kong)制(zhi)（通常 10-30 分(fen)鐘(zhong)），可通過(guo)顯微鏡(jing)觀察細(xi)胞(bao)解(jie)離狀態(tai)。

二(er)、培養(yang)條(tiao)件(jian)優(you)化

1. 培養(yang)基選(xuan)擇(ze)

- 使用含(han)血(xue)清或特(te)定(ding)生長因子的(de)培養(yang)基（如 DMEM、RPMI 1640 等(deng)），部(bu)分(fen)細(xi)胞(bao)需添加胰(yi)島(dao)素(su)、EGF 等。

- 避(bi)免頻繁更(geng)換(huan)培養(yang)基品(pin)牌(pai)或批(pi)次(ci)，減少細(xi)胞(bao)適應(ying)壓(ya)力。

2. 貼(tie)壁與傳代(dai)

- 原代(dai)細胞(bao)貼(tie)壁能力較(jiao)弱(ruo)，可能需(xu)要(yao)包(bao)被(bei)培養(yang)皿（如膠原蛋(dan)白、多聚(ju)賴氨(an)酸(suan)）。

- 傳代(dai)時(shi)密度(du)建議(yi)控(kong)制(zhi)在(zai) 70%-80%，過(guo)度匯合會(hui)導(dao)致(zhi)接(jie)觸抑制和(he)分(fen)化。

三、汙(wu)染(ran)控(kong)制(zhi)

1. 無菌(jun)操(cao)作(zuo)

- 全程在超凈(jing)臺(tai)操(cao)作(zuo)，使用壹次性(xing)耗(hao)材，避(bi)免交(jiao)叉汙染(ran)。

- 培養(yang)基中(zhong)可添加雙(shuang)抗，但(dan)長(chang)期使用可能影(ying)響細(xi)胞(bao)活(huo)性(xing)。

2. 支原體檢(jian)測(ce)

- 定(ding)期(qi)檢測(ce)支原體汙(wu)染(ran)（如 PCR 法(fa)），汙(wu)染(ran)後(hou)需及(ji)時(shi)丟(diu)棄細(xi)胞(bao)。

四(si)、狀態(tai)監控(kong)

1. 日(ri)常觀察

- 每(mei)天(tian)檢(jian)查細胞(bao)形態(tai)、密度(du)及培養(yang)基顏(yan)色，及(ji)時(shi)更(geng)換(huan)培養(yang)基（通常每(mei) 2-3 天(tian)換(huan)液壹次）。

- 異(yi)常形態(tai)（如細(xi)胞(bao)變(bian)圓、碎(sui)片(pian)增(zeng)多(duo)）可能提示(shi)汙(wu)染(ran)或營養(yang)不(bu)足。

2. 傳代(dai)與凍存

- 原代(dai)細胞(bao)分(fen)裂次(ci)數有(you)限（壹般(ban) 5-10 代(dai)），需及(ji)時(shi)凍存早期代(dai)次細(xi)胞(bao)。

- 凍存液建議(yi)使用 DMSO+血(xue)清（或專(zhuan)用(yong)凍存培養(yang)基），梯度降溫(wen)後(hou)液氮保存。