【概要描述(shu)】大(da)鼠(shu)卵泡(pao)膜(mo)細(xi)胞公司正(zheng)在出(chu)售(shou)的產(chan)品(pin)：B16-F0黑瘤小鼠(shu)胚胎(tai)成(cheng)纖維細胞小鼠(shu)臍帶(dai)間充質(zhi)幹細(xi)胞小鼠(shu)臍靜(jing)脈內皮(pi)細胞小鼠(shu)胎盤(pan)絨毛(mao)膜(mo)滋(zi)養(yang)層細胞小鼠(shu)羊膜(mo)間(jian)充(chong)質(zhi)幹細(xi)胞小鼠(shu)臍帶(dai)血間充(chong)質幹細(xi)胞兔肺(fei)微(wei)血管(guan)內皮(pi)細胞兔肺(fei)動脈內皮(pi)細胞兔肺(fei)動脈平(ping)滑肌(ji)細胞

大鼠(shu)卵泡(pao)膜(mo)分離(li)自卵(luan)巢(chao)組織；卵巢(chao)是雌(ci)性(xing)動物的生(sheng)殖(zhi)器官，卵巢(chao)的功(gong)能是(shi)產生卵以及類(lei)固(gu)醇(chun)激(ji)素。卵(luan)巢(chao)的位置(zhi)與(yu)睪(gao)丸(wan)相(xiang)同，僅(jin)左(zuo)側(ce)發育(yu)（右側(ce)已(yi)退(tui)化），呈(cheng)葡萄狀，均為(wei)處於不(bu)同(tong)發育(yu)時期(qi)的卵(luan)泡(pao)，卵泡(pao)呈(cheng)黃色，卵(luan)巢表(biao)面(mian)密布血(xue)管(guan)。卵(luan)巢(chao)的大(da)小與(yu)年(nian)齡和(he)產(chan)卵期(qi)有(you)關(guan)。大(da)多(duo)數脊(ji)椎動物有(you)兩個卵巢(chao)，但(dan)是(shi)部(bu)分魚(yu)類(lei)的兩(liang)個卵巢(chao)融合為(wei)單個結(jie)構，而所(suo)有鳥(niao)類(lei)只(zhi)有(you)左(zuo)側(ce)卵(luan)巢(chao)有(you)機能。卵(luan)巢是位於(yu)子(zi)宮兩側(ce)的壹(yi)對卵(luan)圓形的生(sheng)殖(zhi)器官，它(ta)的外(wai)表有(you)壹層上皮(pi)組織，其(qi)下方有(you)薄層的結(jie)締組織。卵巢(chao)的內部(bu)結(jie)構可分為(wei)皮(pi)質和(he)髓(sui)質。皮(pi)質位於(yu)卵(luan)巢的周圍(wei)部(bu)分，主(zhu)要(yao)由(you)卵(luan)泡和(he)結(jie)締組織構成；髓(sui)質位於(yu)中(zhong)央，由(you)疏(shu)松結(jie)締組織構成，其(qi)中有(you)許多血(xue)管(guan)、淋(lin)巴(ba)管(guan)和(he)神經。哺(bu)乳(ru)動物的卵(luan)巢(chao)內卵(luan)泡(pao)的發育(yu)需要(yao)相(xiang)關(guan)激(ji)素的調節才能完成，垂(chui)體(ti)促(cu)性(xing)腺(xian)激（卵(luan)泡(pao)刺激素和(he)黃體(ti)生成(cheng)素）使(shi)原(yuan)始卵(luan)泡開(kai)始發育(yu)，其(qi)過(guo)程(cheng)中還產生(sheng)大量(liang)的雌(ci)激(ji)素。雌(ci)激(ji)素是(shi)卵(luan)巢的顆(ke)粒(li)細胞和(he)卵(luan)泡膜(mo)細(xi)胞在垂(chui)體(ti)促(cu)性(xing)腺(xian)激的作用下協同(tong)合(he)成的，卵(luan)泡(pao)膜(mo)細(xi)胞合成的雄(xiong)激(ji)素透(tou)過(guo)基(ji)膜(mo)進(jin)入(ru)顆(ke)粒細胞，並轉變為(wei)雌激素。因此(ci)，卵泡(pao)膜(mo)細(xi)胞在生殖(zhi)內分泌(mi)調節中占有關(guan)鍵(jian)的位置(zhi)，了(le)解(jie)其(qi)在病理及生(sheng)理中(zhong)的作用，對於(yu)與(yu)性激素有(you)關(guan)的婦(fu)產(chan)科(ke)疾(ji)病（如多(duo)囊(nang)卵巢(chao)綜合(he)癥(zheng)、卵巢癌等）的研(yan)究(jiu)有著重(zhong)要(yao)意(yi)義(yi)。在哺(bu)乳(ru)動物卵(luan)泡生(sheng)長(chang)發育(yu)的過(guo)程(cheng)中，卵母細(xi)胞由(you)不(bu)斷(duan)增加(jia)的顆(ke)粒(li)細胞層包裹。卵巢組織中的膜(mo)細(xi)胞作為(wei)卵泡的外(wai)層細胞可以維持卵泡(pao)結(jie)構的完整性，參(can)與構成卵(luan)母細(xi)胞和(he)顆(ke)粒細(xi)胞發育(yu)的微(wei)環境(jing)且為(wei)類(lei)固(gu)醇(chun)激(ji)素的生(sheng)成(cheng)提(ti)供底(di)物(wu)。在哺(bu)乳(ru)動物中(zhong)調節膜(mo)細(xi)胞類(lei)固(gu)醇(chun)激(ji)素生(sheng)成(cheng)的機(ji)制(zhi)已(yi)見(jian)相(xiang)關(guan)報(bao)道(dao)，但(dan)是(shi)有(you)關(guan)卵(luan)泡(pao)膜(mo)細(xi)胞的聚(ju)集、生(sheng)長(chang)和(he)分化的研(yan)究(jiu)尚不(bu)深入。
方法(fa)簡(jian)介：

公司(si)實(shi)驗(yan)室(shi)分離(li)的大(da)鼠(shu)卵泡(pao)膜(mo)采(cai)用膠(jiao)原(yuan)酶(mei)消化法制(zhi)備(bei)而來，細胞總量約為(wei)5×10?cells/瓶(ping)。
質量(liang)檢(jian)測(ce)：

公司(si)實(shi)驗(yan)室(shi)分離(li)的大(da)鼠(shu)卵泡(pao)膜(mo)經(jing)3β-HSD免疫(yi)熒(ying)光(guang)鑒定，純度(du)可達90%以上，且不(bu)含有HIV-1、HBV、HCV、支(zhi)原(yuan)體(ti)、細菌(jun)、酵(jiao)母(mu)和(he)真(zhen)菌(jun)等。

本公(gong)司(si)所(suo)有(you)產品僅(jin)供科(ke)學實(shi)驗，不(bu)做其(qi)他科(ke)學實(shi)驗外(wai)的使(shi)用！

培養(yang)基(ji) 含FBS、生長(chang)添加(jia)劑、Penicillin、Streptomycin等

換液(ye)頻率(lv) 每(mei)2-3天換液(ye)壹次

生長(chang)特(te)性(xing) 貼壁

細胞形態 成纖(xian)維細胞樣

傳(chuan)代(dai)特性 可傳(chuan)5代左(zuo)右(you)；3代(dai)以(yi)內狀態(tai)

消化液 0.25%yi蛋白(bai)酶(mei)

培養(yang)條(tiao)件(jian) 氣相(xiang)：空氣(qi)，95%；CO2，5%

準(zhun)備工作

1. 實驗(yan)器(qi)材準(zhun)備：準(zhun)備無菌的培養(yang)皿(min)、培養(yang)瓶(ping)、移液管(guan)、離(li)心管(guan)、手術(shu)器(qi)械等，並進行高(gao)壓滅菌(jun)或其(qi)他合(he)適的消(xiao)毒(du)處理(li)。

2. 試(shi)劑(ji)準(zhun)備：配制(zhi)或(huo)購買合適的培養(yang)基(ji)、消化酶(mei)（如、膠(jiao)原(yuan)酶(mei)等）、胎(tai)牛(niu)血(xue)清、雙(shuang)抗等試(shi)劑(ji)，確(que)保(bao)其(qi)無菌且在(zai)有效(xiao)期內。

3. 實驗(yan)動物或(huo)組織來源準(zhun)備：根(gen)據實(shi)驗(yan)需(xu)求(qiu)，選擇(ze)合適(shi)的動物並進行相(xiang)應(ying)的麻(ma)醉或處(chu)死(si)，獲(huo)取(qu)所需組織；或從(cong)已(yi)有(you)的組織樣本(ben)庫中(zhong)獲(huo)取(qu)組織。

取材與處(chu)理(li)

1. 取材：在無菌條件(jian)下，迅(xun)速取(qu)出(chu)目(mu)標組織，盡量(liang)減(jian)少對組織的損傷，並去(qu)除(chu)多余(yu)的脂肪(fang)、結(jie)締組織等非目(mu)的組織。

2. 清洗：將(jiang)取出(chu)的組織用預(yu)冷的無菌PBS沖洗數次，以(yi)去(qu)除(chu)血液(ye)和(he)雜(za)質。

3. 剪切(qie)：將(jiang)組織剪成約1 - 2mm³的小塊，以便後續消(xiao)化。

細胞分離(li)

1. 消化：將(jiang)剪碎的組織塊放入(ru)含有適(shi)量(liang)消(xiao)化酶(mei)的離(li)心管(guan)中(zhong)，在(zai)37℃恒(heng)溫搖(yao)床或(huo)培養(yang)箱中消化壹段(duan)時間(jian)。期(qi)間(jian)可(ke)輕輕(qing)搖(yao)晃離(li)心管(guan)，使(shi)消(xiao)化更均勻。

2. 終止(zhi)消化：當組織塊大部(bu)分被消(xiao)化成單細(xi)胞懸液或小細(xi)胞團時，加(jia)入含血清(qing)的培養(yang)基(ji)終止(zhi)消化。

3. 過(guo)濾(lv)與(yu)離(li)心：用細(xi)胞篩過(guo)濾(lv)細(xi)胞懸液，去(qu)除(chu)未消(xiao)化的組織碎片，然(ran)後將(jiang)濾(lv)液(ye)以適當的轉速離(li)心，收(shou)集(ji)細(xi)胞沈(chen)澱。

細胞觀察與檢(jian)測(ce)

1. 日常(chang)觀察：每(mei)天用倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡觀察細胞的形態、生(sheng)長狀態(tai)、密(mi)度(du)等，記(ji)錄細胞的變化情況(kuang)，如發現細(xi)胞汙(wu)染(ran)或異(yi)常，及時(shi)采(cai)取(qu)相(xiang)應(ying)措(cuo)施。
2. 細(xi)胞計數與活力(li)檢(jian)測(ce)：在需(xu)要時，可采(cai)用臺(tai)盼(pan)藍染(ran)色等方法(fa)對細(xi)胞進行計數和(he)活力(li)檢(jian)測(ce)，以了(le)解(jie)細胞的生(sheng)長(chang)情況(kuang)和(he)健康(kang)狀態(tai)。

壹、取(qu)材與分離(li)

1. 快(kuai)速操作

- 組織取材後需(xu)立(li)即(ji)處(chu)理，避免長(chang)時(shi)間(jian)暴露(lu)於室(shi)溫或非營養(yang)環(huan)境(jing)。

- 使用無菌 PBS 或生(sheng)理鹽(yan)水(shui)沖(chong)洗組織，去(qu)除(chu)血液(ye)、雜(za)質。

2. 消化酶(mei)選擇(ze)

- 根(gen)據組織類(lei)型(xing)選(xuan)擇(ze)消化酶(mei)，避免(mian)過(guo)度(du)消化導致(zhi)細胞損傷。

- 消化時間(jian)需嚴(yan)格控(kong)制(zhi)（通(tong)常(chang) 10-30 分鐘(zhong)），可通(tong)過(guo)顯(xian)微(wei)鏡觀察細胞解離(li)狀態(tai)。

二、培養(yang)條(tiao)件(jian)優化

1. 培養(yang)基(ji)選擇(ze)

- 使用含血清(qing)或(huo)特(te)定(ding)生長(chang)因子(zi)的培養(yang)基(ji)（如 DMEM、RPMI 1640 等），部(bu)分細(xi)胞需添加(jia)胰島(dao)素、EGF 等。

- 避免(mian)頻繁更換培養(yang)基(ji)品牌或批次，減(jian)少細胞適應(ying)壓力(li)。

2. 貼壁與(yu)傳(chuan)代(dai)

- 原(yuan)代細(xi)胞貼壁能力(li)較弱(ruo)，可能需(xu)要包被培養(yang)皿(min)（如(ru)膠(jiao)原(yuan)蛋白(bai)、多聚(ju)賴(lai)氨酸(suan)）。

- 傳(chuan)代(dai)時密度(du)建(jian)議(yi)控制(zhi)在(zai) 70%-80%，過(guo)度(du)匯合(he)會導致(zhi)接觸(chu)抑制(zhi)和(he)分化。

三、汙(wu)染(ran)控制(zhi)

1. 無菌操作

- 全程(cheng)在超凈(jing)臺操作，使(shi)用壹(yi)次性(xing)耗(hao)材，避免(mian)交叉汙(wu)染(ran)。

- 培養(yang)基(ji)中可(ke)添加(jia)雙(shuang)抗，但(dan)長期使用可(ke)能影(ying)響細胞活性(xing)。

2. 支原(yuan)體(ti)檢(jian)測(ce)

- 定期(qi)檢(jian)測(ce)支原(yuan)體(ti)汙(wu)染(ran)（如 PCR 法），汙(wu)染(ran)後需(xu)及時(shi)丟棄細胞。

四、狀態(tai)監(jian)控(kong)

1. 日常(chang)觀察

- 每(mei)天檢(jian)查細(xi)胞形態、密(mi)度(du)及培養(yang)基(ji)顏色，及時(shi)更換培養(yang)基(ji)（通(tong)常(chang)每(mei) 2-3 天換液(ye)壹次）。

- 異(yi)常形態（如(ru)細胞變圓、碎片增多(duo)）可(ke)能提(ti)示(shi)汙(wu)染(ran)或營養(yang)不(bu)足(zu)。

2. 傳(chuan)代(dai)與凍存

- 原(yuan)代細(xi)胞分裂次數有限(xian)（壹般 5-10 代(dai)），需(xu)及時(shi)凍存(cun)早(zao)期代(dai)次細(xi)胞。

- 凍存(cun)液(ye)建(jian)議(yi)使用 DMSO+血(xue)清(qing)（或專用凍(dong)存(cun)培養(yang)基(ji)），梯度(du)降(jiang)溫後液(ye)氮保(bao)存(cun)。