豬(zhu)附紅細胞(bao)體(ti)（SEP）核(he)酸檢測(ce)試劑(ji)盒(he)準備(bei)試劑(ji)與(yu)收集(ji)血樣(yang)

豬(zhu)附紅細胞(bao)體(ti)（SEP）核(he)酸檢測(ce)試劑(ji)盒(he)準備(bei)試劑(ji)與(yu)收集(ji)血樣(yang)：

雙重(zhong)核(he)酸試劑(ji)盒(he)（熒光PCR法(fa)）　1.  收集(ji)標本(ben)：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素(su)抗(kang)凝）、細(xi)胞(bao)培養(yang)上(shang)清液(ye)、組(zu)織(zhi)勻漿等盡早(zao)檢測， 2-8 ℃ 保存(cun)48 小時；更長(chang)時(shi)間(jian)須(xu)冷凍(dong)（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保(bao)存，避(bi)免反復凍(dong)融(rong)。

2.  標準(zhun)品(pin)液配制：使用(yong)前(qian)加入0.5ml 蒸餾水(shui) 混(hun)勻(yun)，配成(cheng) 120 0ng/ml 的(de)溶液(ye) 。 設標準(zhun) 管 8 管，管加標本稀(xi)釋液 900ul ，第二至第八(ba)管加入標本稀(xi)釋液 500ul 。在管中(zhong)加入 120 0ng/ml 的標準(zhun)品(pin)溶液(ye) 100ul 混(hun)勻(yun)後(hou)用加樣(yang)器吸出(chu) 500ul ，移(yi)至第二管 。如(ru)此反復作(zuo)對倍(bei)稀(xi)釋，從(cong)第七 管 中(zhong)吸出(chu) 500ul 棄去。第八(ba) 管 為(wei)空(kong)白對照。

3.  10× 標(biao)本(ben)稀(xi)釋液用(yong)蒸(zheng)餾水(shui)作(zuo) 1: 1 0 倍稀(xi)釋（ 示(shi)例(li)： 1ml濃(nong)稀(xi)釋液 +9ml 蒸(zheng)餾水(shui)）。

4.  洗(xi)滌液：用重蒸水(shui) 1:20 稀(xi)釋（示(shi)例(li)：1ml 濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌液加入 19ml 的重蒸(zheng)水(shui)）

檢(jian)測程(cheng)序：

1.  加樣(yang)：每(mei)孔各加入標準品(pin)或待測(ce)樣(yang)品(pin) 100ul ，將反應板(ban)充分(fen)混(hun)勻(yun)後(hou)置 37 ℃ 120 分(fen)鐘。

2.  洗(xi)板(ban)：用洗(xi)滌液將反應板(ban)充分(fen)洗(xi)滌 4-6 次，向濾紙(zhi)上(shang)印幹。

3.  每(mei)孔中(zhong)加入抗體(ti)工作(zuo)液10 0ul 。將反應板(ban)充分(fen)混(hun)勻(yun)後(hou)置 37 ℃ 6 0 分(fen)鐘。

4.  洗(xi)板(ban)：同前(qian)。

5.  每(mei)孔加酶標抗體(ti)工作(zuo)液100ul 。將反應板(ban)置 37 ℃ 3 0 分(fen)鐘。

6.  洗(xi)板(ban)：同前(qian)。

7.  每(mei)孔加入底物工作液(ye)100ul ，置 37   ℃ 暗(an)處反應15 分(fen)鐘(zhong)。

8.  每(mei)孔加入100ul 終止(zhi)液(ye)混(hun)勻(yun)。

9.  30分鐘內用酶(mei)標儀在 45 0 nm 處測 吸光值(zhi)。

性能(neng)：

1. 準確性：標(biao)準品(pin)線(xian)性回(hui)歸與(yu)預期濃度相關系(xi)數(shu)R值(zhi)，大於等於0.9900。

2. 靈敏度：檢測(ce)濃(nong)度小於0.1 U/mL。

3. 特異性：不與(yu)其(qi)它可溶性結構類(lei)似物交(jiao)叉反應。

4. 重(zhong)復(fu)性：板(ban)內、板(ban)間(jian)變異(yi)系數(shu)均小於15%。

5. 貯(zhu)藏(zang)：2-8℃，避(bi)光防(fang)潮(chao)保存(cun)。

6. 有(you)效期(qi)：6個(ge)月(yue)