alpha-1腎(shen)上腺(xian)素能受(shou)體(ti)ELISA試劑盒準備(bei)試劑與收集(ji)血樣(yang)

alpha-1腎(shen)上腺(xian)素能受(shou)體(ti)ELISA試劑盒準備(bei)試劑與收集(ji)血樣(yang)：

1.  收集(ji)標(biao)本：血清、血(xue)漿（EDTA 、檸(ning)檬(meng)酸(suan)鹽、肝(gan)素抗(kang)凝(ning)）、細胞培養上清液(ye)、組織勻漿等盡早檢(jian)測， 2-8 ℃ 保存(cun)48 小時；更(geng)長(chang)時間須冷凍（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存(cun)，避免反(fan)復凍融(rong)。

2.  標(biao)準品(pin)液(ye)配(pei)制(zhi)：使用(yong)前加入(ru)0.5ml 蒸(zheng)餾(liu)水 混(hun)勻，配(pei)成 120 0ng/ml 的(de)溶(rong)液(ye) 。 設(she)標(biao)準 管(guan) 8 管(guan)，管(guan)加(jia)標(biao)本稀釋液(ye) 900ul ，第二(er)至第八管加(jia)入(ru)標(biao)本稀釋液(ye) 500ul 。在管(guan)中加入(ru) 120 0ng/ml 的(de)標(biao)準品(pin)溶(rong)液(ye) 100ul 混勻後用(yong)加(jia)樣(yang)器吸(xi)出 500ul ，移至第二(er)管(guan) 。如(ru)此反復作對倍稀釋，從(cong)第七(qi) 管(guan) 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為(wei)空白(bai)對照。產品僅(jin)用(yong)於科(ke)研

3.  10× 標(biao)本稀釋液(ye)用(yong)蒸(zheng)餾(liu)水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例(li)： 1ml濃(nong)稀釋液(ye) +9ml 蒸(zheng)餾(liu)水）。

4.  洗(xi)滌(di)液：用(yong)重蒸(zheng)水(shui) 1:20 稀釋（示例(li)：1ml 濃(nong)縮洗(xi)滌(di)液加(jia)入(ru) 19ml 的(de)重蒸(zheng)水(shui)）

檢(jian)測程(cheng)序：

1.  加(jia)樣(yang)：每(mei)孔各加入(ru)標(biao)準品(pin)或(huo)待(dai)測樣(yang)品 100ul ，將反應板充分(fen)混(hun)勻後置 37 ℃ 120 分(fen)鐘。

2.  洗(xi)板(ban)：用(yong)洗(xi)滌(di)液將反應板充分(fen)洗(xi)滌(di) 4-6 次，向(xiang)濾(lv)紙(zhi)上印幹。

3.  每(mei)孔中加入(ru)抗(kang)體(ti)工(gong)作液10 0ul 。將反應板充分(fen)混(hun)勻後置 37 ℃ 6 0 分(fen)鐘。

4.  洗(xi)板(ban)：同前。

5.  每(mei)孔加酶(mei)標(biao)抗(kang)體(ti)工(gong)作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分(fen)鐘。

6.  洗(xi)板(ban)：同前。

7.  每(mei)孔加入(ru)底(di)物工(gong)作液100ul ，置 37   ℃ 暗處(chu)反(fan)應(ying)15 分(fen)鐘。

8.  每(mei)孔加入(ru)100ul 終止液(ye)混(hun)勻。

9.  30分(fen)鐘內(nei)用(yong)酶(mei)標(biao)儀(yi)在 45 0 nm 處(chu)測 吸光值。