HCG在(zai)放(fang)射免(mian)疫(yi)法中的測(ce)定(ding)

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壹、原(yuan)理(li)

HCG是(shi)放(fang)射性(xing)同(tong)位(wei)素(su)標記(ji)技術與抗(kang)原(yuan)抗(kang)體免(mian)疫(yi)反(fan)應相(xiang)結(jie)合的(de)超微量分析法，是(shi)用放(fang)射性(xing)核(he)素(su)（如(ru)25I/3H）標記(ji)的(de)極微量的示(shi)蹤(zong)抗(kang)原(yuan)*（Ag*）/抗(kang)體*（Ab*）與待測(ce)抗(kang)原(yuan)Ag/抗(kang)體Ag）壹起來競(jing)爭結(jie)合有限的(de)特異(yi)性(xing)抗(kang)體（Ab）/抗(kang)原(yuan)（Ag），故稱飽和分析或競(jing)爭抑制法，其反(fan)應過(guo)程(cheng)為：Ag*•Ab量固定(ding)，Ag*+Ag>Ab可(ke)結(jie)合的(de)數(shu)目（抗(kang)原(yuan)過(guo)量），Ag*與Ag競(jing)爭結(jie)合Ab，直到(dao)反(fan)應達到平衡，形成的(de)AD*•Ab量隨著(zhe)Ag量改變(bian)：Ag量大(da)，與Ab結(jie)合的(de)機(ji)會(hui)多(duo)，Ag*•．Ab少(shao)，反(fan)之，則(ze)形成的(de)Ag*•．Ab多(duo)。Ag量與Ag*．Ab量之間(jian)可(ke)以競(jing)爭抑制曲(qu)線(xian)表(biao)示(shi)。

二(er)、方(fang)法

放(fang)射免(mian)疫(yi)測(ce)定(ding)必(bi)須(xu)有3種(zhong)基本(ben)試(shi)劑：

（）能(neng)與待測(ce)物（配(pei)體）專壹結(jie)合的(de)結(jie)合試(shi)劑，通(tong)常(chang)是(shi)專壹抗(kang)體受(shou)體；

（2）具有放(fang)射活性(xing)的(de)配(pei)體(ti)標記(ji)物，常(chang)用的(de)核(he)素有25I及(ji)3He；

（3）能(neng)將(jiang)與試(shi)劑結(jie)合的(de)配體與未結(jie)合的(de)配體分離(li)的(de)分離(li)試(shi)劑。

在競(jing)爭性(xing)測(ce)定(ding)中(zhong)，加(jia)入定(ding)量的抗(kang)體和(he)標記(ji)配(pei)體，反(fan)應中未標記(ji)配(pei)體（待測(ce)物）與標記(ji)配(pei)體競(jing)爭結(jie)合試(shi)劑，未標記(ji)配(pei)體的量愈多(duo)，標記(ji)配(pei)體與抗(kang)體相(xiang)結(jie)合的(de)概率就(jiu)愈低(di)，從(cong)而標記(ji)配(pei)體的結(jie)合部分（B）低(di)，經(jing)過(guo)壹定(ding)時(shi)間抗(kang)體與配體的結(jie)合達(da)到平衡狀態後，可用分離(li)試(shi)劑結(jie)合的(de)配體（B）與未結(jie)合的(de)配體（F）分離(li)，用計(ji)數(shu)器計(ji)數(shu)結(jie)合部分（B）標本(ben)中的(de)HcG量可通(tong)過(guo)比較標本(ben)B的計(ji)數(shu)與標準品的(de)計(ji)數(shu)（標準曲線(xian)）求(qiu)得。

（）25碘(dian)壹尿(niao)HCG（PEG）藥盒(he)組(zu)分包(bao)括(kuo)：HCG標準管6瓶(ping)，凍幹(gan)；HCG抗(kang)體（藍(lan)色(se)）瓶(ping)，凍幹(gan)；25碘(dian)壹HCG（紅(hong)色(se)）瓶(ping)，凍幹(gan)；正(zheng)常(chang)兔血(xue)清5瓶(ping)，凍幹(gan)；磷酸(suan)鹽(yan)緩沖(chong)液(ye)瓶(ping)，溶(rong)液(ye)；PEG 瓶(ping)，溶(rong)液(ye)。曲(qu)線(xian)範圍(wei)50～200Iu/L。

標準曲線(xian)：以(yi)標準濃度(du)為橫(heng)坐標，以(yi)結(jie)合率(lv)為縱(zong)坐標，繪(hui)制標準曲線(xian)，依(yi)此求(qiu)得標本(ben)的HCG壹β濃度。

正(zheng)常(chang)參考(kao)值：<250U/L。

保(bao)存(cun)：2～8℃。

有效(xiao)期(qi)：35天。

（2）25碘(dian)壹HCG（PR=免疫(yi)分離(li)試(shi)劑）藥盒組(zu)分包(bao)括(kuo)：HCG標準6瓶(ping)，凍幹(gan)；HCG抗(kang)體（藍(lan)色(se)）瓶(ping)，凍幹(gan)；25碘(dian)壹HCG（紅(hong)色(se)）瓶(ping)，凍幹(gan)；NSB 瓶(ping)，溶(rong)液(ye)；溫(wen)育(yu)液(ye)l瓶(ping)，溶(rong)液(ye)；PR 瓶(ping)，溶(rong)液(ye)。

曲(qu)線(xian)範圍(wei)：25～2000Iu/L。

靈(ling)敏(min)度(du)：<25IU/L。

標準曲線(xian)：以(yi)標準濃度(du)為橫(heng)坐標，以(yi)結(jie)合率(lv)為縱(zong)坐標繪(hui)制標準曲線(xian)，以(yi)此求(qiu)得標本(ben)的HCG壹β濃度。

正(zheng)常(chang)參考(kao)值：<00Iu/L。

保(bao)存(cun)：2～8℃。

有效(xiao)期(qi)：35天。

（3）25碘(dian)壹HCG—B（DAP=雙抗(kang)+PEG）藥盒(he)組(zu)份包括(kuo)：

HCG標準6瓶(ping)，凍幹(gan)；HCG—B抗(kang)體（藍(lan)色(se)）瓶(ping)，凍幹(gan)；25碘(dian)壹HCG（紅(hong)色(se)）瓶(ping)，凍幹(gan)；DA 2瓶(ping)，凍幹(gan)；溫育(yu)液(ye)瓶(ping)，溶(rong)液(ye)；PEG 瓶(ping)，溶(rong)液(ye)。

曲(qu)線(xian)範圍(wei)：5～320Iu/L。

靈(ling)敏(min)度(du)：5IU/L。

特異(yi)性(xing)：抗(kang)HCG—B血清(qing)與LH的交叉反(fan)應率<5%。

標準曲線(xian)：以(yi)標準濃度(du)為橫(heng)坐標，以(yi)結(jie)合率(lv)為縱(zong)坐標繪(hui)制標準曲線(xian)，以(yi)此求(qiu)得HCG—β濃(nong)度(du)。

正(zheng)常(chang)參考(kao)值：<20Iu/L。

保(bao)存(cun)：2～8℃。

有效(xiao)期(qi)：35天。