2. 血漿(jiang):應(ying)根(gen)據標(biao)本的(de)要求選擇(ze)EDTA或(huo)檸(ning)檬(meng)酸(suan)鈉作為抗(kang)凝劑(ji),混(hun)合(he)10-20分(fen)鐘(zhong)後(hou),離心20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔細收(shou)集(ji)上清,保(bao)存(cun)過程中如有沈澱形(xing)成,應(ying)該再次離心。
3. 尿(niao)液(ye):用無菌管收(shou)集(ji),離心20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔細收(shou)集(ji)上清,保(bao)存(cun)過程中如有沈澱形(xing)成,應(ying)再(zai)次離心。胸(xiong)腹(fu)水(shui)、腦脊液(ye)參(can)照實行(xing)。
4. 細胞培養(yang)上清:檢測分(fen)泌(mi)性(xing)的成份(fen)時(shi),用無菌管收(shou)集(ji)。離心20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔細收(shou)集(ji)上清。檢測細胞內的成份(fen)時(shi),用PBS(PH7.2-7.4)稀(xi)釋細胞懸液(ye),細胞濃度(du)達到
100萬(wan)/ml左(zuo)右。通(tong)過反復(fu)凍融(rong),以使(shi)細胞破壞(huai)並放出細胞內成份(fen)。離心20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔細收(shou)集(ji)上清。保(bao)存(cun)過程中如有沈澱形(xing)成,應(ying)再(zai)次離心。
5. 組織(zhi)標(biao)本:切割標(biao)本後(hou),稱(cheng)取(qu)重量。加入(ru)壹(yi)定(ding)量的PBS,PH7.4。用(yong)液氮迅(xun)速(su)冷凍保(bao)存(cun)備(bei)用。標(biao)本融(rong)化後仍然(ran)保(bao)持2-8℃的(de)溫度。加入(ru)壹(yi)定(ding)量的PBS(PH7.4),用(yong)手工或(huo)勻漿(jiang)器(qi)將標(biao)本勻(yun)漿(jiang)充(chong)分(fen)。離心20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔細收(shou)集(ji)上清。分(fen)裝(zhuang)後(hou)壹(yi)份(fen)待檢測,其余(yu)冷凍備(bei)用。
6. 標(biao)本采集(ji)後(hou)盡早(zao)進(jin)行(xing)提取(qu),提(ti)取(qu)按(an)相關文(wen)獻(xian)進行,提(ti)取(qu)後(hou)應盡(jin)快進行(xing)實驗。若不(bu)能馬(ma)上進行(xing)試(shi)驗,可(ke)將標(biao)本放於(yu)-20℃保存(cun),但應(ying)避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍融(rong).
7. 不(bu)能檢測含NaN3的(de)樣(yang)品,因(yin)NaN3抑(yi)制辣(la)根(gen)過(guo)氧化物酶的(HRP)活性(xing)。