當(dang)前位置(zhi):首頁(ye) > 技術(shu)文(wen)章 > 人(ren)Ⅱ型膠原代細胞(bao)C2CELISA檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒樣(yang)本處(chu)理及(ji)要(yao)求
人Ⅱ型膠原代細胞(bao)C2CELISA檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒樣本處(chu)理及(ji)要(yao)求:
1. 血清(qing):室(shi)溫(wen)血(xue)液自然(ran)凝(ning)固10-20分(fen)鐘(zhong),離心(xin)20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉/分(fen))。仔(zai)細(xi)收集上(shang)清(qing),保存過(guo)程(cheng)中(zhong)如(ru)出(chu)現沈澱(dian),應再(zai)次離心(xin)。
2. 血漿:應根(gen)據標(biao)本的要求選(xuan)擇(ze)EDTA或(huo)檸(ning)檬(meng)酸(suan)鈉作為(wei)抗凝劑(ji),混(hun)合(he)10-20分(fen)鐘(zhong)後(hou),離心(xin)20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉/分(fen))。仔(zai)細(xi)收集上(shang)清(qing),保存過(guo)程(cheng)中(zhong)如(ru)有沈澱(dian)形成,應該(gai)再(zai)次(ci)離心(xin)。
3. 尿(niao)液:用無(wu)菌管(guan)收集,離心(xin)20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉/分(fen))。仔(zai)細(xi)收集上(shang)清(qing),保存過(guo)程(cheng)中(zhong)如(ru)有沈澱(dian)形成,應再(zai)次離心(xin)。胸腹(fu)水、腦(nao)脊液參照(zhao)實(shi)行(xing)。
4. 細胞(bao)培(pei)養上清(qing):檢測(ce)分(fen)泌(mi)性(xing)的成份(fen)時,用無(wu)菌管(guan)收集。離心(xin)20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉/分(fen))。仔(zai)細(xi)收集上(shang)清(qing)。檢測(ce)細胞(bao)內(nei)的成份(fen)時,用PBS(PH7.2-7.4)稀(xi)釋細(xi)胞(bao)懸(xuan)液,細胞(bao)濃(nong)度達到100萬(wan)/ml左(zuo)右(you)。通過(guo)反復凍(dong)融(rong),以(yi)使(shi)細(xi)胞(bao)破(po)壞並放(fang)出(chu)細胞(bao)內(nei)成份(fen)。離心(xin)20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉/分(fen))。仔(zai)細(xi)收集上(shang)清(qing)。保存過(guo)程(cheng)中(zhong)如(ru)有沈澱(dian)形成,應再(zai)次離心(xin)。
5. 組織(zhi)標(biao)本:切(qie)割(ge)標(biao)本後(hou),稱(cheng)取(qu)重(zhong)量。加入壹(yi)定(ding)量的PBS,PH7.4。用液氮迅(xun)速冷凍(dong)保存備用。標(biao)本融(rong)化(hua)後仍然(ran)保持2-8℃的溫(wen)度。加入壹(yi)定(ding)量的PBS(PH7.4),用手工(gong)或勻(yun)漿(jiang)器將標(biao)本勻(yun)漿(jiang)充分(fen)。離心(xin)20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉/分(fen))。仔(zai)細(xi)收集上(shang)清(qing)。分(fen)裝(zhuang)後(hou)壹(yi)份(fen)待檢測(ce),其余冷凍備用。
6. 標本采集後(hou)盡早(zao)進(jin)行(xing)提取(qu),提取(qu)按相(xiang)關文(wen)獻(xian)進(jin)行(xing),提取(qu)後應盡(jin)快進(jin)行(xing)實(shi)驗(yan)。若(ruo)不能馬(ma)上(shang)進(jin)行(xing)試(shi)驗(yan),可(ke)將標(biao)本放(fang)於-20℃保存,但應避免反復凍(dong)融(rong).
7. 不能檢測(ce)含NaN3的樣品(pin),因NaN3抑制辣根(gen)過(guo)氧(yang)化(hua)物(wu)酶的(HRP)活性(xing)。
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