當前位(wei)置(zhi):首頁(ye) > 技(ji)術文(wen)章 > 大鼠促甲狀(zhuang)腺素ELISA試(shi)劑(ji)盒樣本處理及(ji)要求(qiu)
大(da)鼠促甲狀(zhuang)腺素ELISA試(shi)劑(ji)盒樣本處理及(ji)要求(qiu):
1. 血(xue)清:室(shi)溫血(xue)液(ye)自(zi)然(ran)凝固10-20分(fen)鐘(zhong),離(li)心20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔細(xi)收(shou)集上清,保(bao)存(cun)過(guo)程中(zhong)如(ru)出(chu)現(xian)沈澱,應(ying)再次(ci)離(li)心。
2. 血(xue)漿(jiang):應根(gen)據標本(ben)的要求(qiu)選(xuan)擇EDTA或檸檬(meng)酸鈉作為(wei)抗凝(ning)劑(ji),混合(he)10-20分(fen)鐘(zhong)後(hou),離(li)心20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔細(xi)收(shou)集上清,保(bao)存(cun)過(guo)程中(zhong)如(ru)有(you)沈澱形(xing)成(cheng),應(ying)該(gai)再次(ci)離(li)心。
3. 尿(niao)液(ye):用無菌管(guan)收集,離(li)心20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔細(xi)收(shou)集上清,保(bao)存(cun)過(guo)程中(zhong)如(ru)有(you)沈澱形(xing)成(cheng),應(ying)再次(ci)離(li)心。胸腹(fu)水(shui)、腦脊(ji)液(ye)參照實(shi)行。
4. 細(xi)胞(bao)培養(yang)上清:檢(jian)測分(fen)泌性的成(cheng)份(fen)時(shi),用無菌管(guan)收集。離(li)心20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔細(xi)收(shou)集上清。檢(jian)測細(xi)胞(bao)內的成(cheng)份(fen)時(shi),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye),細(xi)胞(bao)濃(nong)度(du)達到(dao)
100萬(wan)/ml左(zuo)右。通(tong)過(guo)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong),以(yi)使細(xi)胞(bao)破(po)壞(huai)並放(fang)出(chu)細(xi)胞(bao)內成(cheng)份(fen)。離(li)心20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔細(xi)收(shou)集上清。保(bao)存(cun)過(guo)程中(zhong)如(ru)有(you)沈澱形(xing)成(cheng),應(ying)再次(ci)離(li)心。
5. 組(zu)織(zhi)標本(ben):切割(ge)標(biao)本後(hou),稱(cheng)取(qu)重量。加入壹(yi)定(ding)量(liang)的PBS,PH7.4。用液(ye)氮迅(xun)速(su)冷(leng)凍保存(cun)備(bei)用。標(biao)本融(rong)化(hua)後(hou)仍(reng)然(ran)保持(chi)2-8℃的溫度(du)。加入壹(yi)定(ding)量(liang)的PBS(PH7.4),用手工(gong)或勻(yun)漿(jiang)器將標本勻(yun)漿(jiang)充分(fen)。離心20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔細(xi)收(shou)集上清。分(fen)裝後(hou)壹(yi)份(fen)待檢(jian)測,其余(yu)冷(leng)凍備用(yong)。
6. 標(biao)本采集後(hou)盡(jin)早(zao)進(jin)行提(ti)取,提(ti)取按相關文(wen)獻進(jin)行,提(ti)取後(hou)應(ying)盡(jin)快進(jin)行實(shi)驗(yan)。若不(bu)能馬上進行試(shi)驗(yan),可(ke)將(jiang)標本放於(yu)-20℃保(bao)存(cun),但(dan)應(ying)避免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong).
7. 不(bu)能檢(jian)測含(han)NaN3的樣品,因NaN3抑(yi)制辣根過(guo)氧化(hua)物(wu)酶的(HRP)活性。
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