細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基的形(xing)態(tai)分(fen)類(lei)及(ji)汙(wu)染消除(chu)

　　細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基的形(xing)態(tai)分(fen)類(lei)及(ji)汙(wu)染消除(chu)
　　
　　體外培(pei)養(yang)基細(xi)胞(bao)根(gen)據它們(men)在(zai)培(pei)養(yang)器(qi)皿(min)是否能貼(tie)附於(yu)支(zhi)持物(wu)上(shang)生(sheng)長(chang)特征(zheng)，可(ke)分為(wei)貼(tie)附型(xing)生(sheng)長(chang)和(he)懸浮(fu)型(xing)生(sheng)長(chang)兩(liang)大(da)類。貼(tie)附型(xing)細(xi)胞(bao)在(zai)培(pei)養(yang)時(shi)能貼(tie)附在(zai)支技(ji)物(wu)表面生(sheng)長(chang)。如(ru)羊(yang)水(shui)細(xi)胞(bao)為貼(tie)附型(xing)細(xi)胞(bao)，常(chang)表(biao)現(xian)為成(cheng)纖維(wei)型(xing)細(xi)胞(bao)和(he)上皮(pi)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)。懸(xuan)浮(fu)型(xing)細(xi)胞(bao)在(zai)培(pei)養(yang)中懸(xuan)浮生(sheng)長(chang)。
　　
　　、成(cheng)纖維(wei)型(xing)細(xi)胞(bao)
　　
　　在(zai)培(pei)養(yang)中的(de)細(xi)胞(bao)凡形(xing)態(tai)與(yu)成纖維(wei)細(xi)胞(bao)類似(si)時(shi)，皆(jie)可(ke)稱(cheng)之為(wei)成纖維(wei)細(xi)胞(bao)。本型(xing)細(xi)胞(bao)由形(xing)態(tai)與(yu)體內成纖維(wei)細(xi)胞(bao)的形(xing)態(tai)相(xiang)似(si)而(er)得名，細(xi)胞(bao)在(zai)支持物(wu)表(biao)面呈梭(suo)形(xing)或(huo)不(bu)規(gui)則(ze)三角形(xing)生(sheng)長(chang)，細(xi)胞(bao)有卵(luan)園(yuan)形(xing)核(he)，胞(bao)質向(xiang)外伸出(chu)2-3厘(li)米個(ge)長短(duan)不同的突起，除真正的成纖維(wei)細(xi)胞(bao)外，凡由中胚(pei)層(ceng)間質(zhi)起源(yuan)的組織細(xi)胞(bao)常(chang)呈(cheng)本類形(xing)態(tai)生(sheng)長(chang)。
　　
　　2、上(shang)皮(pi)型(xing)細(xi)胞(bao)
　　
　　此類(lei)型(xing)細(xi)胞(bao)在(zai)培(pei)養(yang)基器(qi)皿(min)支持物(wu)上(shang)生(sheng)長(chang)具(ju)有扁(bian)平不規(gui)則(ze)多(duo)角形(xing)特征(zheng)，細(xi)胞(bao)有園(yuan)形(xing)核(he)，細(xi)胞(bao)緊(jin)密相(xiang)連單(dan)層(ceng)膜(mo)樣生(sheng)長(chang)。起源(yuan)於內(nei)、外(wai)胚(pei)層(ceng)細(xi)胞(bao)如皮(pi)膚、表皮衍(yan)生(sheng)物(wu)、消(xiao)化管(guan)上(shang)皮等(deng)組織細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)時(shi)，皆(jie)呈(cheng)上(shang)皮型(xing)形(xing)態(tai)生(sheng)長(chang)。
　　
　　3、遊(you)走(zou)型(xing)細(xi)胞(bao)
　　
　　本型(xing)細(xi)胞(bao)在(zai)支持物(wu)上(shang)散在(zai)生(sheng)長(chang)，壹般不(bu)連成(cheng)片(pian)。細(xi)胞(bao)質經(jing)常(chang)伸(shen)出(chu)偽足或突起，呈活躍(yue)的遊(you)走或(huo)變形(xing)運(yun)動，速(su)度(du)快(kuai)且(qie)不(bu)規(gui)則(ze)。此(ci)型(xing)細(xi)胞(bao)不很(hen)穩(wen)定，有時(shi)亦難(nan)和(he)其(qi)它(ta)型(xing)細(xi)胞(bao)區別(bie)。在(zai)壹定的(de)條(tiao)件下，由於細(xi)胞(bao)密度(du)增大(da)聯(lian)成片(pian)後(hou)，可呈(cheng)類(lei)似(si)多(duo)角(jiao)型(xing)或成纖維(wei)細(xi)膩(ni)包(bao)形(xing)態(tai)。常(chang)見(jian)於羊水(shui)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)的早(zao)期(qi)。
　　
　　當(dang)重(zhong)要的(de)培(pei)養(yang)基汙(wu)染時(shi)，研(yan)究者(zhe)可能試圖消(xiao)除或(huo)控制(zhi)汙(wu)染。首先(xian)，確(que)定汙(wu)染物是細(xi)菌(jun)、真菌(jun)、支原(yuan)體或酵母，把(ba)汙(wu)染細(xi)胞(bao)與(yu)其(qi)它(ta)細(xi)胞(bao)系隔(ge)離開(kai)，用實(shi)驗室消毒(du)劑(ji)消毒(du)培(pei)養(yang)器(qi)皿(min)和(he)超凈(jing)臺(tai)，檢(jian)查HEPA過(guo)濾器(qi)。
　　
　　高濃度(du)的(de)抗生(sheng)素(su)和(he)抗黴(mei)菌(jun)素可(ke)能對(dui)壹些(xie)細(xi)胞(bao)系有毒(du)性(xing)，因(yin)而(er)，做劑量(liang)反應(ying)實(shi)驗確定抗(kang)生(sheng)素(su)和(he)抗黴(mei)菌(jun)素產生(sheng)毒(du)性(xing)的劑量水(shui)平。這(zhe)點(dian)在(zai)使用(yong)抗(kang)生(sheng)素(su)如(ru)和(he)抗黴(mei)菌(jun)素如(ru)泰樂菌(jun)素時(shi)尤其(qi)重(zhong)要。下面是的確定(ding)毒(du)性(xing)水(shui)平和(he)消除(chu)培(pei)養(yang)汙(wu)染的實(shi)驗步(bu)驟。
　　
　　)在(zai)無(wu)抗生(sheng)素(su)的(de)培(pei)養(yang)基中消化、計(ji)數(shu)和(he)稀釋(shi)細(xi)胞(bao)，稀釋(shi)到(dao)常(chang)規(gui)細(xi)胞(bao)傳代的(de)濃(nong)度(du)。
　　
　　2)分(fen)散細(xi)胞(bao)懸液(ye)到多孔培(pei)養(yang)板中(zhong)，或幾(ji)個(ge)小培(pei)養(yang)基瓶中。在(zai)壹個(ge)濃度(du)梯(ti)度(du)範(fan)圍內，把(ba)選擇(ze)抗(kang)生(sheng)素(su)加入到每壹個(ge)孔中(zhong)。例如(ru)，下列濃度(du)，0.25，0.50，.0，2.0，4.0,8.0mg/ml。
　　
　　3)每天(tian)觀(guan)測細(xi)胞(bao)毒(du)性(xing)指(zhi)標，如(ru)脫落，出(chu)現(xian)空泡，匯合(he)度(du)下降和(he)變圓(yuan)。
　　
　　4)確(que)定(ding)抗(kang)生(sheng)素(su)毒(du)性(xing)水(shui)平後(hou)，使用(yong)低於毒(du)性(xing)濃度(du)2-3倍濃度(du)的(de)抗生(sheng)素(su)的(de)培(pei)養(yang)液培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)2-3代。
　　
　　5)在(zai)無(wu)抗生(sheng)素(su)的(de)培(pei)養(yang)基中培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)壹代。
　　
　　6)重(zhong)復步(bu)驟4。
　　
　　7)在(zai)無(wu)抗生(sheng)素(su)的(de)培(pei)養(yang)基中培(pei)養(yang)4-6代，確(que)定(ding)汙(wu)染是否以已被消(xiao)除。