培(pei)養(yang)基生物(wu)材料(liao)的(de)選擇和大分(fen)子的提取(qu)
更新(xin)時間(jian):2014-07-25
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培(pei)養(yang)基生物(wu)材料(liao)的(de)選擇和大分(fen)子的提取(qu)
制備生物大(da)分(fen)子(zi),首(shou)先要選擇適當(dang)的培(pei)養(yang)基生物(wu)材料(liao)。材料(liao)的(de)來源(yuan)無(wu)非是動(dong)物、植(zhi)物和微生(sheng)物及(ji)其(qi)代謝產(chan)物(wu)。從(cong)工業(ye)角度(du)選擇材料(liao),應(ying)選擇含(han)量(liang)高(gao)、來源(yuan)豐富(fu)、制備工藝(yi)簡(jian)單、成(cheng)本(ben)低(di)的(de)原(yuan)料(liao),但往(wang)往(wang)這(zhe)幾方面的(de)要求(qiu)不(bu)能(neng)同(tong)時具備,含(han)量豐(feng)富(fu)但(dan)來源(yuan)困難(nan),或(huo)含(han)量(liang)來源(yuan)較理想(xiang),但材料(liao)的(de)分離(li)純化方法繁(fan)瑣(suo),流(liu)程很(hen)長,反(fan)倒不如(ru)含量(liang)低(di)些(xie)但(dan)易(yi)於獲(huo)得(de)純(chun)品(pin)的(de)材料(liao),由(you)此可見(jian),必須(xu)根(gen)據具體情況,抓(zhua)住主要(yao)矛盾決(jue)定(ding)取舍(she)。從科研工作的角(jiao)度(du)選材,則只須(xu)考慮(lv)材料(liao)的(de)選擇符合(he)實(shi)驗(yan)預定(ding)的目標要求即(ji)可(ke)。除此之外,選材還(hai)應註(zhu)意(yi)植(zhi)物的(de)季(ji)節性(xing)、地理位(wei)置(zhi)和生長(chang)環境(jing)等(deng)。選動物(wu)材料(liao)時要(yao)註(zhu)意(yi)其年(nian)齡、性別、營養(yang)狀(zhuang)況、遺(yi)傳(chuan)素質和生理狀(zhuang)態等(deng)。動(dong)物在饑(ji)餓時,脂(zhi)類(lei)和糖(tang)類(lei)含量(liang)相(xiang)對減(jian)少,有(you)利於生(sheng)物(wu)大(da)分(fen)子(zi)的(de)提取分離(li)。選微生(sheng)物(wu)材料(liao)時要(yao)註(zhu)意(yi)菌(jun)種的代數(shu)和培(pei)養(yang)基成(cheng)分(fen)等(deng)之(zhi)間(jian)的差(cha)異,例(li)如(ru)在微(wei)生物(wu)的(de)對數(shu)期(qi),酶(mei)和核(he)酸(suan)的(de)含(han)量(liang)較(jiao)高(gao),可(ke)獲(huo)得(de)較(jiao)高(gao)的(de)產(chan)量(liang)。
培(pei)養(yang)基生物(wu)材料(liao)選定後要(yao)盡可(ke)能(neng)保(bao)持新(xin)鮮(xian),盡快(kuai)加(jia)工處(chu)理,動(dong)物組織要先(xian)除去結(jie)締組織、脂(zhi)肪(fang)等(deng)非(fei)活(huo)性(xing)部(bu)分,絞(jiao)碎(sui)後在適當(dang)的溶(rong)劑(ji)中(zhong)提(ti)取(qu),如(ru)果所要(yao)求(qiu)的(de)成(cheng)分(fen)在細(xi)胞內(nei),則要先(xian)破碎(sui)細胞(bao)。植(zhi)物要(yao)先(xian)去殼(ke)、除脂(zhi)。微(wei)生物材料(liao)要(yao)及(ji)時將(jiang)菌(jun)體(ti)與發(fa)酵液分(fen)開。生物(wu)材料(liao)如(ru)暫不(bu)提取,應冰凍保(bao)存。動物材料(liao)則需深(shen)度(du)冷(leng)凍保(bao)存。
"提取"是在分(fen)離(li)純化之(zhi)前(qian)將(jiang)經(jing)過(guo)預處(chu)理或(huo)破碎(sui)的細(xi)胞培(pei)養(yang)基置(zhi)於(yu)溶(rong)劑(ji)中(zhong),使被分(fen)離(li)的生物(wu)大分(fen)子(zi)充分地(di)釋(shi)放(fang)到溶(rong)劑(ji)中(zhong),並(bing)盡可(ke)能(neng)保(bao)持原(yuan)來的(de)天然狀(zhuang)態不(bu)丟失(shi)生物(wu)活(huo)性(xing)的(de)過(guo)程。這(zhe)壹過(guo)程是將(jiang)目的產(chan)物(wu)與(yu)細胞(bao)中(zhong)其(qi)他化合(he)物和生物(wu)大分子分(fen)離(li),即由固(gu)相轉(zhuan)入液(ye)相,或(huo)從(cong)細(xi)胞(bao)內的(de)生理狀(zhuang)況轉(zhuan)入外界(jie)特(te)定(ding)的(de)溶(rong)液(ye)中(zhong)。
影(ying)響提(ti)取(qu)的(de)因(yin)素主要有(you):目的(de)產(chan)物(wu)在提(ti)取的(de)溶(rong)劑(ji)中(zhong)溶(rong)解度(du)的(de)大(da)小;由固相擴散到液(ye)相(xiang)的難(nan)易(yi);溶(rong)劑(ji)的pH值(zhi)和提取(qu)時間(jian)等(deng)。壹種物質在某壹溶(rong)劑(ji)中(zhong)溶(rong)解度(du)的(de)大(da)小與該物質的(de)分(fen)子(zi)結(jie)構(gou)及(ji)使用的(de)溶(rong)劑(ji)的理化性(xing)質有(you)關。壹般(ban)地(di)說,極(ji)性(xing)物(wu)質易(yi)溶(rong)於(yu)極性溶(rong)劑(ji),非極性物(wu)質易(yi)溶(rong)於(yu)非極性溶(rong)劑(ji);堿(jian)性(xing)物質易(yi)溶(rong)於(yu)酸(suan)性(xing)溶(rong)劑(ji),酸(suan)性(xing)物(wu)質易(yi)溶(rong)於(yu)堿(jian)性(xing)溶(rong)劑(ji);溫(wen)度(du)升高(gao),溶(rong)解度(du)加(jia)大(da),遠離(li)等(deng)電點的(de)pH值(zhi),溶(rong)解度(du)增加(jia)。細(xi)胞培(pei)養(yang)基提取(qu)時所選擇的(de)條(tiao)件應(ying)有(you)利於目(mu)的(de)產(chan)物(wu)溶(rong)解度(du)的(de)增加(jia)和保(bao)持其(qi)生物活(huo)性(xing)。