臨(lin)床(chuang)檢驗ABS試劑(ji)盒應(ying)用

臨(lin)床(chuang)檢驗ABS試劑(ji)盒應(ying)用

    IgM抗體的檢測(ce)用於傳染(ran)病的早(zao)期診(zhen)斷(duan)中。間接(jie)法(fa)ELISA試劑(ji)盒壹(yi)般(ban)僅(jin)適用於檢測(ce)總(zong)抗體(ti)或(huo)IgG抗體(ti)。如用抗原包(bao)被(bei)的(de)間(jian)接(jie)法(fa)直接(jie)測定(ding)IgM抗體(ti)，因(yin)標(biao)本(ben)中壹(yi)般(ban)同(tong)時(shi)存(cun)在(zai)較(jiao)高濃(nong)度的(de)IgG抗體(ti)，後者將競(jing)爭(zheng)結(jie)合(he)固相(xiang)抗原而(er)使(shi)壹(yi)部份IgM抗(kang)體不(bu)能結(jie)合(he)到固相(xiang)上。因(yin)此(ci)如(ru)用抗人IgM作為(wei)二抗(kang)，間(jian)接(jie)測定(ding)IgM抗體(ti)，必須(xu)先(xian)將(jiang)標(biao)本(ben)用A蛋白或(huo)抗IgG抗(kang)體處(chu)理，以(yi)除(chu)去(qu)IgG的幹擾。在(zai)臨(lin)床(chuang)檢驗中測(ce)定抗(kang)體IgM時(shi)多(duo)采(cai)用捕(bu)獲包(bao)被(bei)法(fa)。先(xian)用抗人IgM抗體(ti)包(bao)被(bei)固相(xiang)，以(yi)捕(bu)獲血(xue)清標(biao)本中的IgM（其中包(bao)括(kuo)針(zhen)對(dui)抗(kang)原的(de)特(te)異性IgM抗(kang)體(ti)和(he)非特異性的(de)IgM）。然後加入(ru)抗原，此(ci)抗(kang)原僅(jin)與(yu)特異性IgM相(xiang)結(jie)合(he)。繼(ji)而(er)加酶(mei)標記(ji)針(zhen)對(dui)抗(kang)原的(de)特(te)異性抗(kang)體(ti)。再(zai)與(yu)底物作用，呈(cheng)色即(ji)與(yu)標本(ben)中的(de)IgM成(cheng)正相(xiang)關(guan)。此(ci)法(fa)常用於病毒性感(gan)染(ran)的早(zao)期診(zhen)斷(duan)。甲(jia)型肝(gan)炎病毒（HAV）抗(kang)體的(de)檢測(ce)模式見(jian)圖(tu)2-7。

    類(lei)風濕(shi)因(yin)子(zi)（RF）同(tong)樣能幹擾捕(bu)獲包(bao)被(bei)法(fa)測定(ding)IgM抗體(ti)，導致假陽(yang)性反(fan)應(ying)。因(yin)此(ci)中(zhong)和IgG的(de)間接(jie)法(fa)近來(lai)頗(po)受(shou)青睞，用這(zhe)類試(shi)劑(ji)檢測(ce)抗(kang)CMV IgGM和抗(kang)弓(gong)形(xing)蟲(chong)IgM抗(kang)體已獲(huo)成(cheng)功。

2.2.7 ABS-ELISA試劑(ji)盒法(fa)

    ABS為親(qin)和素(su)（avidin）（biotin）系統(tong)（system）的(de)略語。親和素(su)是(shi)壹(yi)種糖蛋白，分(fen)子(zi)量(liang)60000，每個分子(zi)由4個(ge)能和結(jie)合(he)的亞(ya)基組成(cheng)。為(wei)小分(fen)子(zi)化合(he)物，分子量(liang)244。用化學(xue)方(fang)法(fa)制成(cheng)的衍-羥基琥(hu)珀(po)酰(xian)亞(ya)胺酯(zhi)可與(yu)蛋白(bai)質和(he)糖等多種類(lei)型的(de)大小分(fen)子(zi)形(xing)成標(biao)記(ji)產物，標記(ji)方法(fa)頗(po)為簡便(bian)。與(yu)親和(he)素(su)的(de)結(jie)合(he)具有很(hen)強(qiang)的(de)特(te)異性，其親和(he)力較(jiao)抗原抗(kang)體(ti)反應(ying)大(da)得(de)多(duo)，兩(liang)者(zhe)壹(yi)經(jing)結(jie)合(he)就(jiu)極(ji)為穩(wen)定。由於壹(yi)個(ge)親(qin)和(he)素(su)可與(yu)4個分(fen)子結(jie)合(he)，因(yin)此(ci)如(ru)把ABS與(yu)ELISA試劑(ji)盒法(fa)可分(fen)為酶(mei)標記(ji)親和(he)素(su)-（LAB）法(fa)和橋(qiao)聯親(qin)和(he)素(su)-（ABC）法(fa)兩種類(lei)型。兩(liang)者均(jun)以(yi)標記(ji)的抗(kang)體（或(huo)抗原）代(dai)替(ti)原人(ren)ELISA試(shi)劑盒系統(tong)中(zhong)的(de)酶標(biao)抗體（抗原）。在(zai)LAB中，固相(xiang)先(xian)與(yu)不標(biao)記(ji)的親(qin)和素(su)反(fan)應(ying)，然後再(zai)加酶(mei)標記(ji)的以(yi)進壹(yi)步(bu)提(ti)高敏感度(du)。在(zai)早(zao)期，親(qin)和(he)素(su)從(cong)蛋清中提(ti)取，這(zhe)種卵(luan)親和(he)素(su)為(wei)堿(jian)性糖蛋白，與(yu)聚苯(ben)乙烯(xi)載(zai)體的吸(xi)附(fu)性很(hen)強(qiang)，用於ELISA中可使(shi)本(ben)底(di)增(zeng)高。從(cong)鏈黴(mei)菌中提(ti)取的(de)鏈(lian)黴(mei)親和素(su)則(ze)無(wu)此(ci)缺點，在(zai)ELISA試劑(ji)盒應(ying)用中有替代前(qian)者(zhe)的(de)趨勢(shi)。由於ABS-ELISA試劑盒較(jiao)普通(tong)ELISA試劑(ji)盒多用了兩(liang)種試(shi)劑(ji)，增(zeng)加了操(cao)作(zuo)步驟。