猴巨(ju)細胞(bao)病(bing)毒(du)（CMV）試(shi)劑(ji)盒(he)*

猴巨(ju)細胞(bao)病(bing)毒(du)（CMV）試(shi)劑(ji)盒(he)*

本試(shi)劑盒(he)僅供(gong)研究(jiu)使用。

檢測(ce)範圍：96T
3pg/ml-20pg/ml

使用目(mu)的(de)：本猴(hou)巨(ju)細胞(bao)病(bing)毒(du)CMV試(shi)劑(ji)盒(he)用於測(ce)定猴血(xue)清、血(xue)漿及(ji)相關(guan)液體(ti)樣本中(zhong)巨(ju)細胞(bao)病(bing)毒(du)（CMV）含量(liang)。

實(shi)驗原理
本試劑(ji)盒(he)應用雙抗體(ti)夾(jia)心(xin)法(fa)測(ce)定標本中猴巨(ju)細胞(bao)病(bing)毒(du)（CMV）水(shui)平(ping)。用純化的(de)猴巨(ju)細胞(bao)病(bing)毒(du)（CMV）抗體(ti)包被(bei)微(wei)孔(kong)板，制(zhi)成固相(xiang)抗體(ti)，往(wang)包被(bei)單抗的(de)微孔(kong)中(zhong)依(yi)次加入巨(ju)細胞(bao)病(bing)毒(du)（CMV），再(zai)與HRP標記的(de)巨(ju)細胞(bao)病(bing)毒(du)（CMV）抗體(ti)結合(he)，形(xing)成抗體(ti)-抗原-酶(mei)標抗體(ti)復合(he)物，經(jing)過(guo)*洗滌後(hou)加(jia)底物TMB顯色。TMB在(zai)HRP酶(mei)的(de)催化下(xia)轉化(hua)成藍(lan)色(se)，並(bing)在(zai)酸的(de)作用下(xia)轉化(hua)成zui終的(de)黃色(se)。顏(yan)色(se)的(de)深淺(qian)和(he)樣品(pin)中的(de)巨(ju)細胞(bao)病(bing)毒(du)（CMV）呈(cheng)正(zheng)相(xiang)關(guan)。用酶(mei)標儀在(zai)450nm波長(chang)下(xia)測(ce)定吸光(guang)度(du)（OD值(zhi)），通(tong)過(guo)標準曲線計(ji)算(suan)樣品(pin)中猴巨(ju)細胞(bao)病(bing)毒(du)（CMV）濃(nong)度(du)。

標本要求(qiu)
．標本采(cai)集後(hou)盡早(zao)進行(xing)提取，提取按(an)相(xiang)關(guan)文獻(xian)進行(xing)，提取後應(ying)盡(jin)快進行(xing)實(shi)驗。若不(bu)能馬上進行(xing)試驗，可(ke)將標本放(fang)於-20℃保(bao)存，但應(ying)避(bi)免(mian)反復凍(dong)融(rong)
2．不(bu)能檢測(ce)含NaN3的(de)樣品(pin)，因(yin)NaN3抑(yi)制(zhi)辣(la)根(gen)過(guo)氧(yang)化(hua)物酶(mei)的(de)（HRP）活(huo)性(xing)。

操(cao)作步驟(zhou)
.標準品(pin)的(de)稀釋：本猴(hou)巨(ju)細胞(bao)病(bing)毒(du)CMV試(shi)劑(ji)盒(he)提供原倍標準品(pin)壹(yi)支，用戶可(ke)按(an)照下(xia)列(lie)圖(tu)表(biao)在(zai)小(xiao)試管中進行(xing)稀釋。

20pg/ml5號標準品(pin)50μl的(de)原倍標準品(pin)加入50μl標準品(pin)稀釋液
60pg/ml4號標準品(pin)50μl的(de)5號標準品(pin)加入50μl標準品(pin)稀釋液
30pg/ml3號標準品(pin)50μl的(de)4號標準品(pin)加入50μl標準品(pin)稀釋液
5pg/ml2號標準品(pin)50μl的(de)3號標準品(pin)加入50μl標準品(pin)稀釋液
7.5pg/ml號標準品(pin)50μl的(de)2號標準品(pin)加入50μl標準品(pin)稀釋液

2.加(jia)樣：分別(bie)設(she)空(kong)白(bai)孔(kong)（空(kong)白(bai)對照孔不(bu)加樣品(pin)及(ji)酶(mei)標試劑，其余(yu)各(ge)步操(cao)作相同(tong)）、標準孔、待測(ce)樣品(pin)孔。在(zai)酶(mei)標包被板上(shang)標準品(pin)準確加樣50μl，待測(ce)樣品(pin)孔中先(xian)加樣品(pin)稀釋液40μl，然(ran)後(hou)再(zai)加待(dai)測(ce)樣品(pin)0μl（樣品(pin)zui終稀釋度(du)為5倍(bei)）。加(jia)樣將樣品(pin)加於酶(mei)標板孔底部，盡量(liang)不(bu)觸(chu)及(ji)孔壁(bi)，輕(qing)輕(qing)晃動(dong)混(hun)勻。
3.溫(wen)育(yu)：用封板(ban)膜封板(ban)後(hou)置37℃溫(wen)育(yu)30分(fen)鐘。  
4.配液：將(jiang)30倍(bei)濃(nong)縮洗滌液(ye)用蒸餾水30倍(bei)稀釋後備(bei)用
5.洗滌：小(xiao)心揭掉封板膜，棄(qi)去(qu)液體(ti)，甩(shuai)幹(gan)，每孔加滿洗滌液(ye)，靜(jing)置30秒(miao)後(hou)棄(qi)去(qu)，如此(ci)重(zhong)復5次(ci)，拍(pai)幹(gan)。
6.加酶(mei)：每(mei)孔加入酶(mei)標試劑50μl，空(kong)白(bai)孔(kong)除外(wai)。
7.溫(wen)育(yu)：操(cao)作同3。
8.洗滌：操(cao)作同5。
9.顯色：每(mei)孔先(xian)加入顯色劑(ji)A50μl，再(zai)加入顯色劑(ji)B50μl，輕(qing)輕(qing)震(zhen)蕩(dang)混(hun)勻，37℃避(bi)光(guang)顯色5分(fen)鐘.
0.終(zhong)止：每孔加終止液50μl，終止反應(ying)（此(ci)時藍(lan)色(se)立轉黃(huang)色）。
.測(ce)定：以空(kong)白(bai)空(kong)調零(ling)，450nm波(bo)長(chang)依序(xu)測(ce)量(liang)各(ge)孔的(de)吸光(guang)度(du)（OD值(zhi)）。 測(ce)定應在(zai)加終(zhong)止液後5分鐘以(yi)內(nei)進行(xing)。

註意事(shi)項(xiang)
．試劑盒(he)從(cong)冷(leng)藏(zang)環(huan)境(jing)中(zhong)取出應(ying)在(zai)室溫(wen)平(ping)衡(heng)5-30分鐘後(hou)方(fang)可(ke)使用，酶(mei)標包被板開封後(hou)如未(wei)用完，板(ban)條(tiao)應裝(zhuang)入密封袋(dai)中保(bao)存。
2．濃洗滌液(ye)可(ke)能會有結晶(jing)析出，稀(xi)釋時可(ke)在(zai)水浴中加(jia)溫助溶(rong)，洗滌時不(bu)影響結果。
3．各(ge)步加(jia)樣均應(ying)使用加樣器，並(bing)經(jing)常(chang)校(xiao)對其準確性，以(yi)避(bi)免試驗(yan)誤(wu)差(cha)。壹(yi)次加(jia)樣時間(jian)控(kong)制(zhi)在(zai)5分鐘內(nei)，如標本數量(liang)多，使用排槍加(jia)樣。
4．請每(mei)次測(ce)定的(de)同時做(zuo)標準曲線，做(zuo)復孔(kong)。如標本中待測(ce)物質(zhi)含量(liang)過(guo)高(gao)（樣本OD值(zhi)大(da)於標準品(pin)孔*孔的(de)OD值(zhi)），請(qing)先(xian)用樣品(pin)稀釋液稀(xi)釋壹(yi)定倍(bei)數（n倍）後再(zai)測(ce)定，計(ji)算(suan)時請(qing)zui後(hou)乘(cheng)以總(zong)稀(xi)釋倍數（×n×5）。
5．封板膜只限(xian)壹(yi)次性(xing)使用，以避(bi)免(mian)交叉(cha)汙(wu)染(ran)。
6．底物請(qing)避(bi)光(guang)保(bao)存。
7．嚴(yan)格按(an)照說明(ming)書(shu)的(de)操作進行(xing)，試驗結果判(pan)定必(bi)須以(yi)酶(mei)標儀讀數為準.
8．猴(hou)巨(ju)細胞(bao)病(bing)毒(du)CMV所(suo)有樣品(pin)，洗滌液(ye)和(he)各(ge)種廢棄(qi)物都應按(an)傳染(ran)物處(chu)理(li)。
9．本試劑不(bu)同批(pi)號組(zu)分不(bu)得混(hun)用。
0.如與(yu)英(ying)文說(shuo)明(ming)書(shu)有異(yi)，以(yi)英(ying)文說(shuo)明(ming)書(shu)為(wei)準(zhun)。

保(bao)存條件(jian)及(ji)有效期
．試劑(ji)盒(he)保(bao)存：；2-8℃。
2．有效期：6個月(yue)