細(xi)胞外囊(nang)泡(pao)的(de)檢(jian)測(ce)方(fang)法(fa)

    細胞外囊(nang)泡(pao)（Extracellular Vesicles, EVs）是(shi)指(zhi)從(cong)細胞膜(mo)上脫(tuo)落(luo)或者(zhe)由(you)細(xi)胞分(fen)泌(mi)的(de)雙(shuang)層膜(mo)結(jie)構(gou)的(de)囊泡狀(zhuang)小體(ti)，直(zhi)徑(jing)從(cong)40nm到000nm不(bu)等(deng)。胞外囊(nang)泡(pao)主要(yao)由(you)微(wei)囊(nang)泡（Microvesicles,  MVs）和外泌體(ti)（Exosomes, Exs）組(zu)成(cheng)，微(wei)囊泡是(shi)細胞激活、損傷(shang)或(huo)雕(diao)亡後從(cong)細胞膜(mo)脫落(luo)的(de)小囊泡(pao)，直(zhi)徑(jing)約為00nm – 000nm；

    外泌體(ti)由細(xi)胞內的(de)多(duo)泡(pao)小體(ti)（multivesicular bodies）與細(xi)胞膜(mo)融合(he)後以外分(fen)泌(mi)的(de)形(xing)式釋(shi)放到細胞外，直(zhi)徑(jing)約為40nm - 00nm。細胞外囊(nang)泡(pao)廣(guang)泛(fan)存在於細胞培(pei)養上(shang)清(qing)以(yi)及各種(zhong)體(ti)液(ye)（血(xue)液(ye)、淋(lin)巴(ba)液(ye)、唾(tuo)液(ye)、尿(niao)液(ye)、精(jing)液(ye)、乳(ru)汁）中(zhong)，攜(xie)帶(dai)有細胞來源相(xiang)關(guan)的(de)多(duo)種(zhong)蛋(dan)白質(zhi)、脂(zhi)類(lei)、DNA、mRNA、miRNA等(deng)，參(can)與細(xi)胞間(jian)通(tong)訊、細胞遷(qian)移、血管新(xin)生和免(mian)疫(yi)調(tiao)節(jie)等(deng)過程。在(zai)糖(tang)尿(niao)病、心血管疾(ji)病(bing)、艾(ai)滋病、慢性炎癥(zheng)疾(ji)病(bing)以(yi)及癌癥(zheng)中(zhong)都(dou)發(fa)現細胞外囊(nang)泡(pao)水(shui)平(ping)的(de)升高(gao)，它們(men)很有可能(neng)成(cheng)為(wei)這類(lei)疾(ji)病(bing)的(de)診斷標(biao)誌物(wu)，因(yin)此，對細胞外囊(nang)泡(pao)進行(xing)準確(que)的(de)定性和定(ding)量(liang)研究(jiu)顯得尤為重要(yao)。
 
細(xi)胞外囊(nang)泡(pao)的(de)檢(jian)測(ce)方(fang)法(fa)

    目(mu)前細胞外囊(nang)泡(pao)（EVs）的(de)檢(jian)測(ce)方(fang)法(fa)主要(yao)有掃描電(dian)子顯微鏡、原子(zi)力(li)顯微鏡、動態(tai)光散射(she)技(ji)術(shu)、納米(mi)微(wei)粒(li)追蹤分(fen)析(xi)術(shu)（NTA）、流式細(xi)胞儀和(he)ELISA等(deng)，由於通量(liang)高(gao)、用(yong)時短(duan)、操作簡(jian)單，ELISA和(he)流(liu)式細(xi)胞儀是(shi)比較常(chang)用(yong)的(de)方(fang)法(fa)。ELISA方(fang)法(fa)容(rong)易(yi)受其(qi)他(ta)可溶(rong)性抗原的(de)幹(gan)擾，而且(qie)無法(fa)知道(dao)囊泡(pao)的(de)大小、數(shu)量(liang)等信(xin)息(xi)；流式(shi)細胞儀不(bu)僅(jin)可(ke)以(yi)檢(jian)測(ce)囊泡(pao)的(de)大小、數(shu)量(liang)，而且(qie)通過(guo)細胞特異(yi)的(de)標(biao)記(ji)物(wu)染(ran)色(se)可(ke)以檢(jian)測(ce)囊泡(pao)的(de)來源，將囊(nang)泡進(jin)行(xing)分(fen)類(lei)，因(yin)此，流式細胞儀理(li)論上(shang)是(shi)進行(xing)囊泡(pao)快(kuai)速(su)、高(gao)通量(liang)、多(duo)參(can)數(shu)檢(jian)測(ce)的(de)*選擇。然(ran)而(er)，傳(chuan)統流(liu)式細(xi)胞儀針(zhen)對(dui)的(de)樣本主要(yao)是(shi)細胞，散射(she)光的(de)檢(jian)測(ce)極限通(tong)常(chang)是(shi)300-500nm，而大多(duo)數(shu)細胞外囊(nang)泡(pao)的(de)直(zhi)徑(jing)都(dou)在300nm以(yi)下(xia)，由(you)於無法(fa)與(yu)背(bei)景噪音(yin)區(qu)分(fen)，直(zhi)徑(jing)小(xiao)於300nm的(de)細胞外囊(nang)泡(pao)很難(nan)被檢(jian)測(ce)到，因(yin)此，囊泡數(shu)量(liang)往往(wang)被(bei)低(di)估，檢(jian)測(ce)結(jie)果(guo)自然(ran)也(ye)不(bu)準確(que)。