動物的(de)選擇(ze)與(yu)免疫

壹、動物的(de)選擇(ze) 

    目(mu)前應用(yong)zui廣(guang)的(de)是小白鼠(shu)和(he)大(da)白鼠，尤(you)以(yi)小白鼠(shu)為好(hao)。就品系而(er)言(yan)以(yi)Balb/c小白鼠(shu)應用(yong)zui廣(guang)，因為所(suo)有(you)的(de)小白鼠(shu)骨髓瘤(liu)系均從Balb/c小白鼠(shu)系誘導(dao)出來(lai)。Balb/c系小白鼠(shu)必須(xu)用(yong)純(chun)系的(de)，雌(ci)雄均可，以(yi)8~2周(zhou)齡(ling)為宜。大白(bai)鼠也(ye)可，能(neng)產(chan)生較(jiao)多(duo)量(liang)的(de)單(dan)抗(kang)體(ti)。現(xian)在(zai)已經(jing)在(zai)小鼠雜(za)交瘤(liu)的(de)基(ji)礎上(shang)，發(fa)展(zhan)了(le)小鼠－大(da)鼠，小鼠－人(ren)以(yi)及人(ren)－人(ren)雜交瘤(liu)技(ji)術。

二、免疫

    壹(yi)般而(er)言(yan)，抗(kang)原的(de)純(chun)度不(bu)很(hen)重(zhong)要(yao)，特(te)別(bie)是免疫原性(xing)較強(qiang)的(de)抗(kang)原。免疫程序、劑(ji)量和(he)方(fang)法是關(guan)系(xi)到(dao)是否(fou)能(neng)得(de)到(dao)所需要的(de)單(dan)抗(kang)體(ti)的(de)關(guan)鍵之(zhi)壹。正常(chang)小鼠脾臟(zang)含(han)有(you)能(neng)產(chan)生各(ge)種不(bu)同抗(kang)體(ti)的(de)B淋巴細(xi)胞，壹(yi)只(zhi)純(chun)種小白鼠(shu)估(gu)計能(neng)產(chan)生.0×07~5.0×07種(zhong)不(bu)同的(de)抗(kang)體(ti)。因此壹(yi)只(zhi)正(zheng)常的(de)小白鼠(shu)的(de)脾細(xi)胞與(yu)小鼠骨(gu)髓瘤(liu)融(rong)合，只(zhi)能(neng)有千(qian)萬分之(zhi)壹的(de)機會(hui)獲得(de)某壹種(zhong)特定抗(kang)體(ti)。所以(yi)為了(le)提(ti)高得(de)到(dao)某種雜(za)交瘤(liu)的(de)機會(hui)，必須(xu)加(jia)強(qiang)免疫，使(shi)產(chan)生特(te)異(yi)性(xing)抗(kang)體(ti)的(de)B淋巴細(xi)胞大(da)量(liang)增加(jia)。B淋巴細(xi)胞的(de)不(bu)同發(fa)育階段對(dui)獲得(de)陽性雜(za)交瘤(liu)也有很(hen)大(da)影(ying)響。有(you)人(ren)認(ren)為處(chu)在(zai)轉(zhuan)化(hua)時(shi)期的(de)B淋巴細(xi)胞可能(neng)更易(yi)於融(rong)合，而(er)免疫以(yi)後(hou)7~8天，雖然(ran)是(shi)抗(kang)體(ti)產(chan)生的(de)高峰時(shi)期，但(dan)形(xing)成有(you)活(huo)力的(de)雜交瘤(liu)細(xi)胞的(de)可能(neng)反(fan)而(er)減(jian)少。故壹般認(ren)為加(jia)強(qiang)免疫後(hou)的(de)第(di)三天應殺(sha)鼠取脾做(zuo)細(xi)胞融(rong)合。 

. 可溶性抗(kang)原（蛋白質(zhi)） 以(yi)mg/ml～5mg/ml的(de)溶液(ye)加等(deng)量(liang)的(de)弗氏(shi)*佐劑(ji)乳化，分(fen)多(duo)點(dian)小鼠皮(pi)下(xia)註射(she)，總(zong)量為0.3ml～0.6ml，間(jian)隔(ge)3-5周再(zai)同樣(yang)註(zhu)射(she)壹(yi)次，0天後，斷(duan)尾(wei)取血(xue)壹滴(di)，測抗(kang)體(ti)效價，選滴(di)度高的(de)小鼠做(zuo)融(rong)合試(shi)驗。壹個月後可以(yi)經(jing)靜(jing)脈（尾(wei)靜(jing)脈）給予(yu)無(wu)佐(zuo)劑(ji)抗(kang)原0.2ml～0.4ml，3～4天後，殺(sha)死(si)小鼠取脾做(zuo)融(rong)合用(yong)。

2. 顆(ke)粒(li)性抗(kang)原 如(ru)抗(kang)原來(lai)源方便(bian)，可以(yi)不(bu)加(jia)佐(zuo)劑(ji)而(er)增(zeng)加(jia)免疫次數，縮短間隔時(shi)間。例(li)如用(yong)羊紅(hong)血(xue)球免疫小白鼠(shu)，以(yi)%濃(nong)度每(mei)只(zhi)皮(pi)下(xia)註射(she)0.2ml，每(mei)周2次，共免疫5-8次，取脾前3天，再免疫壹(yi)次即可。有人(ren)認(ren)為zui後(hou)壹(yi)次免疫劑(ji)量要(yao)大，大到(dao)近(jin)於免疫耐(nai)受(shou)的(de)程度更好(hao)。