ELISA試(shi)劑(ji)盒測定技(ji)術的發(fa)展

ELISA試(shi)劑(ji)盒測定技(ji)術的發(fa)展
壹(yi)、Elisa試(shi)劑(ji)盒測定技(ji)術的發(fa)展

臨(lin)床測(ce)定技(ji)術的發(fa)展主(zhu)要(yao)在於方(fang)法(fa)學(xue)的發(fa)展，而(er)方法(fa)學(xue)的發(fa)展於(yu)試(shi)劑(ji)技術不斷(duan)進(jin)步(bu)更新(xin)和型標(biao)記物的應(ying)用。目(mu)前(qian)，分(fen)子生(sheng)物學(xue)正(zheng)在並zui終(zhong)肯(ken)定會(hui)讓我們(men)對(dui)整個(ge)生(sheng)命(ming)科(ke)學(xue)有(you)壹(yi)個(ge)全面(mian)而(er)*的認(ren)識，其對(dui)免(mian)疫測定技(ji)術發(fa)展的影(ying)響也是(shi)直(zhi)接而(er)又有(you)效(xiao)的，它使我們(men)對(dui)以(yi)前(qian)壹(yi)些(xie)難(nan)以(yi)檢(jian)測(ce)的生(sheng)物活性(xing)物質(zhi)的測(ce)定變(bian)得(de)輕(qing)而易舉(ju)，並且(qie)大(da)大(da)提(ti)高(gao)了(le)檢測(ce)的靈(ling)敏度(du)和特異性(xing)。
、基因工程試(shi)劑(ji)對(dui)免(mian)疫測定技(ji)術 發(fa)展的影(ying)響
免(mian)疫測定技(ji)術的基礎(chu)在於抗(kang)原抗(kang)體之間的特異結(jie)合(he)反(fan)應(ying)，所(suo)以(yi)任(ren)何(he)的診(zhen)斷試(shi)劑(ji)離不開(kai)的原(yuan)料，如抗(kang)原抗體(ti)，酶(mei)等。以(yi)前(qian)用於(yu)免(mian)疫測定的抗(kang)原通常(chang)為(wei)各種純(chun)化抗(kang)原，而(er)抗體則(ze)為(wei)純(chun)化抗(kang)原免(mian)疫動物後獲(huo)得的多(duo)克隆抗(kang)體(ti)和使用雜(za)交(jiao)瘤(liu)技術得(de)到(dao)的單克隆抗(kang)體(ti)，而抗原(yuan)或抗體(ti)的標(biao)記物如酶(mei)標(biao)結(jie)合(he)物則通過(guo)各總化(hua)學(xue)合(he)成(cheng)方法(fa)制(zhi)備(bei)。近年(nian)來(lai)，隨著(zhe)分(fen)子生(sheng)物學(xue)的發(fa)展，使用基因工程方(fang)法(fa)制(zhi)備(bei)各種特殊(shu)的抗(kang)原或抗體(ti)及其酶(mei)結(jie)合(he)物等免(mian)疫測定試(shi)劑(ji)幾成(cheng)為(wei)現(xian)實的新(xin)壹代試(shi)劑(ji)，各種新(xin)型使用的測(ce)定方(fang)法(fa)也(ye)不斷(duan)出(chu)現(xian)。
HBsAg試(shi)劑(ji)特點（檢(jian)測模(mo)式(shi)：臨 床(chuang)抗體(ti)夾心法(fa)）：
包被(bei)抗(kang)體為(wei)山(shan)羊多(duo)抗(kang)，多(duo)抗(kang)具(ju)有高(gao)親(qin)和性(xing)和對(dui)抗原(yuan)各種表(biao)位(wei)的反(fan)應性(xing)。
酶(mei)表抗(kang)體為(wei)與(yu)HBsAg有(you)不同(tong)結(jie)合(he)位(wei)點的鼠(shu)復合單位(wei)。
可(ke)測(ce)得HBsAg變(bian)異(yi)樣(yang)品。
提高(gao)檢測(ce)的特異性(xing)（99.98%）
提高(gao)檢測(ce)的靈(ling)敏度(du)，應用Parl  Ehrich 學(xue)說（PEI）HBsAg標(biao)準品(pin)，對(dui)ad標(biao)準品(pin)的靈(ling)敏度(du)為(wei)0.05nｇ/ml對(dui)ay標(biao)準品(pin)靈敏度(du)為(wei)0.025ng/ml

2、基因工程
較早(zao)用於(yu)免(mian)疫測定的基因工程抗(kang)原(yuan)是(shi)HBcAg和HBsAg,這兩種基因工程抗(kang)原(yuan)的出(chu)現(xian)，較好地解決(jue)了(le)抗HBc和HBe的測(ce)定問(wen)題。因為(wei)要(yao)從(cong)病(bing)毒(du)本身(shen)去大(da)量(liang)獲(huo)取這兩種純(chun)抗原(yuan)較為(wei)困(kun)難(nan)，並(bing)且(qie)這(zhe)壹(yi)點對(dui)於難(nan)培(pei)養(yang)的病(bing)原(yuan)微(wei)生(sheng)物來說，如HIV、HCV和梅(mei)毒(du)螺旋體等都有(you)些共性(xing)。
2. HCV-Elisa試(shi)劑(ji)
HCV目前尚不能(neng)體外(wai)培養(yang)，只能(neng)用基因工程或化學(xue)合(he)成(cheng)方法(fa)獲(huo)取HCV結(jie)構(gou)和非(fei)結(jie)構(gou)區(qu)的各種抗(kang)原片(pian)斷(duan)，已(yi)知(zhi)HCV基因組(zu)有7個(ge)功能(neng)區(qu)組(zu)成(cheng)：核心、E、E2/NS NS2 NS3 NS4 NS5（有(you)分(fen)為(wei)NS和NS5b）區(qu)，合成(cheng)抗原的優(you)點是(shi)易於(yu)純(chun)化，特異性(xing)好，抗(kang)原抗體(ti)反(fan)應強。
2..*代(dai)抗HCV-Elisa試(shi)劑(ji)盒：
-由美國(guo)ortho公(gong)司克隆C003抗(kang)原(yuan)幾個(ge)片斷與(yu)人(ren)超(chao)氧化(hua)物歧(qi)化酶(mei)（SOD）結(jie)合(he)。用酵母從病(bing)毒(du)基因組(zu)非(fei)結(jie)合(he)區(qu)得到(dao)表(biao)達，表達為(wei)融合蛋(dan)白(bai)，亦(yi)作(zuo)為(wei)包被(bei)固相(xiang)載(zai)體(ti)。
-抗(kang)原(yuan)組(zu)合：NS4 區(qu)二個(ge)基因片(pian)斷(duan)為(wei)NS 5--和C003
-特性(xing)：IgG抗C00在發(fa)病(bing)後(hou)數月後(hou)，才檢(jian)出(chu)，故(gu)不宜(yi)作(zuo)早(zao)期(qi)診(zhen)斷(duan)。
-約由20%的病(bing)人(ren)不出(chu)現(xian)抗體(ti)。IgM抗(kang)-C00急性(xing)期(qi)檢(jian)出(chu)率(lv)只有(you)64%。
-C00的抗(kang)原性(xing)較弱(ruo)，在HCV復制(zhi)中(zhong)，不能(neng)充(chong)分(fen)暴(bao)露宿(xiu)主(zhu)的免(mian)疫系統(tong)。