禽類(lei)支氣管(guan)炎(yan)（Bronchitis）ELISA試(shi)劑盒(he)技(ji)術(shu)標(biao)準

ELISA試(shi)劑盒(he)價格本試(shi)劑盒(he)用於(yu)測(ce)定(ding)禽(qin)類(lei)血清、血漿及相關(guan)液體(ti)樣(yang)本(ben)中(zhong)支氣管(guan)炎(yan)（Bronchitis）表(biao)達。
實(shi)驗(yan)原(yuan)理(li)
本(ben)試(shi)劑盒(he)應用雙抗(kang)體(ti)夾心(xin)法測(ce)定(ding)標(biao)本中(zhong)禽類(lei)支氣管(guan)炎(yan)（Bronchitis）表(biao)達。用純(chun)化的禽(qin)類(lei)支氣管(guan)炎(yan)（Bronchitis）抗體(ti)包(bao)被微孔板(ban)，制(zhi)成固(gu)相抗(kang)體(ti)，可(ke)與(yu)樣(yang)品中(zhong)支氣管(guan)炎(yan)（Bronchitis）相結合，經(jing)洗滌(di)除(chu)去未結合的抗(kang)原(yuan)和(he)其他(ta)成分後再與(yu) HRP 標(biao)記的支(zhi)氣管(guan)炎(yan)（Bronchitis）抗體(ti)結合，形成抗體(ti)-抗(kang)原(yuan)-酶(mei)標(biao)抗體(ti)復合物，經過(guo)*洗滌(di)後加底(di)物 TMB 顯色。 TMB 在(zai) HRP酶(mei)的催(cui)化下轉化成藍(lan)色，並在(zai)酸的作用下轉化成zui終(zhong)的黃(huang)色。用酶(mei)標(biao)儀(yi)在(zai) 450nm 波(bo)長下測(ce)定(ding)吸(xi)光度(du)（OD 值(zhi)），與(yu) CUTOFF 值(zhi)相比(bi)較，從(cong)而判定(ding)標(biao)本中(zhong)禽類(lei)支氣管(guan)炎(yan)（Bronchitis）的存在(zai)與(yu)否。
試(shi)劑盒(he)組(zu)成
30 倍濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌(di)液 20ml× 瓶(ping) 7 終(zhong)止液 6ml× 瓶(ping)
2 酶(mei)標(biao)試(shi)劑 6ml× 瓶(ping) 8 陽性(xing)對照(zhao) 0.5ml× 瓶(ping)
3 酶(mei)標(biao)包(bao)被板(ban) 2 孔×8 條(tiao) 9 陰(yin)性(xing)對(dui)照 0.5ml× 瓶(ping)
4 樣品稀(xi)釋(shi)液 6ml× 瓶(ping) 0 說(shuo)明書(shu) 份
5 顯色劑 A 液 6ml× 瓶(ping) 封板(ban)膜 2 張(zhang) 
6 顯色劑 B 液 6ml×/瓶(ping) 2 密封袋 個
禽類(lei)支氣管(guan)炎(yan)（Bronchitis）ELISA試(shi)劑盒(he)標(biao)本要求
．標(biao)本采集後盡早(zao)進行提(ti)取，提取按相關(guan)文獻進行，提(ti)取後應盡快進行實(shi)驗。若不能(neng)馬(ma)上進行試(shi)驗，可將標(biao)本放於(yu)-20℃保(bao)存，但應避(bi)免(mian)反復凍融(rong)
2．不能(neng)檢測(ce)含 NaN3 的樣(yang)品，因 NaN3 抑制(zhi)辣(la)根過(guo)氧化(hua)物酶(mei)的（HRP）活(huo)性。
ELISA試(shi)劑盒(he)價格操作步驟
. 編(bian)號(hao)：將樣(yang)品對(dui)應(ying)微孔按序(xu)編(bian)號(hao)，每板(ban)應設(she)陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao) 2 孔、陽(yang)性對(dui)照 2 孔、空(kong)白對照(zhao) 孔(kong)（空(kong)白對照(zhao)孔(kong)不(bu)加樣(yang)品及(ji)酶(mei)標(biao)試(shi)劑，其余(yu)各步(bu)操(cao)作相同）
2. 加(jia)樣(yang)：分(fen)別在(zai)陰、陽(yang)性(xing)對照(zhao)孔(kong)中(zhong)加入陰(yin)性(xing)對(dui)照、陽性(xing)對(dui)照(zhao) 50µl。然後在(zai)待(dai)測(ce)樣(yang)品孔(kong)先(xian)加樣(yang)品稀(xi)釋(shi)液 40µl，然(ran)後再加(jia)待(dai)測(ce)樣(yang)品 0µl。加(jia)樣(yang)將樣品加(jia)於(yu)酶(mei)標(biao)板(ban)孔底(di)部，盡量不(bu)觸(chu)及(ji)孔壁，輕輕晃(huang)動混勻，
3. 溫育(yu)：用封板(ban)膜封板(ban)後置(zhi) 37℃溫育(yu) 30 分鐘(zhong)。
4. 配液：將(jiang) 30 倍濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌(di)液用蒸(zheng)餾水 30 倍稀(xi)釋(shi)後備用
5. 洗滌(di)：小心(xin)揭掉(diao)封板(ban)膜，棄去液體(ti)，甩幹，每孔(kong)加滿洗滌(di)液，靜(jing)置(zhi) 30 秒後棄去，如(ru)此重(zhong)復 5 次(ci)，拍幹。
6. 加酶(mei)：每孔(kong)加入酶(mei)標(biao)試(shi)劑 50µl，空白孔除(chu)外(wai)。 
7. 溫(wen)育：操(cao)作同 3。
8. 洗(xi)滌(di)：操(cao)作同 5。
9. 顯色：每孔(kong)先(xian)加入(ru)顯色劑 A50µl，再(zai)加(jia)入顯色劑 B50µl，輕(qing)輕(qing)震蕩混勻，37℃避光顯色5 分鐘(zhong).
0. 終(zhong)止：每孔(kong)加終(zhong)止液 50µl，終(zhong)止反應（此時藍(lan)色立轉黃色）。
. 測(ce)定(ding)：以(yi)空白空調(tiao)零(ling)，450nm 波(bo)長依序測(ce)量各孔(kong)的吸(xi)光度(du)（OD 值(zhi)）。 測(ce)定(ding)應(ying)在(zai)加終(zhong)止液後 5 分鐘(zhong)以(yi)內進行。
操(cao)作程序總(zong)結：
禽類(lei)支氣管(guan)炎(yan)（Bronchitis）ELISA試(shi)劑盒(he)計算和(he)結果判定(ding)：
試(shi)驗有效(xiao)性(xing)：陽性(xing)對(dui)照孔(kong)平(ping)均(jun)值(zhi)≥.00; 陰性(xing)對照(zhao)平(ping)均(jun)值(zhi)≤0.0 臨界(jie)值(zhi)（CUT OFF）計算：臨界(jie)值(zhi)=陰性(xing)對照(zhao)孔平(ping)均(jun)值(zhi)+0.5 陰性(xing)判定(ding)：樣(yang)品 OD 值(zhi)< 臨界(jie)值(zhi)（CUT OFF）者為支氣管炎(yan)（Bronchitis）陰性(xing)陽性(xing)判定(ding)：樣(yang)品 OD 值(zhi)≥ 臨界(jie)值(zhi)（CUT OFF）者為支氣管炎(yan)（Bronchitis）陽性(xing)。
禽類(lei)支氣管(guan)炎(yan)（Bronchitis）ELISA試(shi)劑盒(he)註意事(shi)項(xiang) 
．操(cao)作嚴格按照(zhao)ELISA試(shi)劑盒(he)價格說(shuo)明書(shu)進行，本(ben)試(shi)劑不同批(pi)號(hao)組(zu)分(fen)不(bu)得(de)混用。
2．試(shi)劑盒(he)從冷藏環境中(zhong)取出(chu)應在(zai)室溫(wen)平(ping)衡(heng) 5-30 分鐘(zhong)後方(fang)可(ke)使(shi)用，酶(mei)標(biao)包(bao)被板(ban)開封後如未用完，板(ban)條(tiao)應(ying)裝入密(mi)封袋中(zhong)保存。
3．濃(nong)洗(xi)滌(di)液可(ke)能(neng)會(hui)有結晶析出(chu)，稀釋(shi)時可(ke)在(zai)水浴(yu)中(zhong)加溫助(zhu)溶(rong)，洗(xi)滌時(shi)不(bu)影響結果。
4．封板(ban)膜只限(xian)壹次(ci)性(xing)使(shi)用，以避(bi)免交叉汙染(ran)。
5．底物請(qing)避光保(bao)存。
6．試(shi)驗結果判定(ding)必(bi)須(xu)以酶(mei)標(biao)儀(yi)讀(du)數(shu)為準，使用雙波(bo)長檢測(ce)時(shi)，參(can)考波(bo)長為 630nm 
7．所有樣(yang)品，洗(xi)滌(di)液和(he)各種(zhong)廢(fei)棄物都應(ying)按傳(chuan)染(ran)物處理(li)。終(zhong)止液為 2M 的硫(liu)酸，使用時必(bi)須(xu)註意(yi)安全(quan)。