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豬(zhu)(Dex)elisa試(shi)劑(ji)盒操(cao)作(zuo)步驟(zhou):
. 標準(zhun)品(pin)的(de)稀(xi)釋與加樣(yang):在酶(mei)標包被(bei)板上設(she)標準(zhun)品(pin)孔0孔,在di壹、第(di)二(er)孔中(zhong)分別(bie)加標(biao)準(zhun)品(pin)00μl,然(ran)後(hou)在di壹、第(di)二(er)孔中(zhong)加標(biao)準(zhun)品(pin)稀(xi)釋液(ye)50μl,混勻(yun);然(ran)後(hou)從(cong)di壹孔、第(di)二(er)孔中(zhong)各(ge)取(qu)00μl分(fen)別加到第(di)三孔和(he)第(di)四(si)孔,再在第(di)三、第(di)四(si)孔分(fen)別(bie)加標(biao)準(zhun)品(pin)稀(xi)釋液(ye)50μl,混勻(yun);然(ran)後(hou)在第(di)三孔和(he)第(di)四(si)孔中(zhong)先各(ge)取(qu)50μl棄(qi)掉,再各(ge)取(qu)50μl分(fen)別加到第(di)五、第(di)六(liu)孔中(zhong),再在第(di)五、第(di)六(liu)孔中(zhong)分別(bie)加標(biao)準(zhun)品(pin)稀(xi)釋液(ye)50ul,混勻(yun);混勻(yun)後(hou)從(cong)第(di)五、第(di)六(liu)孔中(zhong)各(ge)取(qu)50μl分(fen)別加到第(di)七(qi)、第(di)八孔中(zhong),再在第(di)七(qi)、第(di)八孔中(zhong)分別(bie)加標(biao)準(zhun)品(pin)稀(xi)釋液(ye)50μl,混勻(yun)後(hou)從(cong)第(di)七(qi)、第(di)八孔中(zhong)分別(bie)取50μl加到第(di)九、第(di)十孔中(zhong),再在第(di)九第(di)十孔分(fen)別(bie)加標(biao)準(zhun)品(pin)稀(xi)釋液(ye)50μl,混勻(yun)後(hou)從(cong)第(di)九第(di)十孔中(zhong)各(ge)取(qu)50μl棄(qi)掉。(稀(xi)釋後(hou)各(ge)孔加樣(yang)量都為50μl,濃度分(fen)別為80 ng/L,20 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,5 ng/L)。
2. 加樣(yang):分別設(she)空白孔(空(kong)白對照孔不(bu)加樣(yang)品(pin)及(ji)酶標試劑(ji),其(qi)余各(ge)步操(cao)作(zuo)相同(tong))、待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)孔。在酶(mei)標包被(bei)板上待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)孔中(zhong)先加樣(yang)品(pin)稀(xi)釋液(ye)40μl,然(ran)後(hou)再加待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)0μl(樣(yang)品(pin)最(zui)終稀(xi)釋度為5倍(bei))。加樣(yang)將樣(yang)品(pin)加於酶標(biao)板孔底部,盡量不(bu)觸(chu)及孔壁,輕(qing)輕(qing)晃動(dong)混勻(yun)。
3. 溫(wen)育:用封板膜封板後(hou)置37℃溫(wen)育30分(fen)鐘(zhong)。
4. 配(pei)液(ye):將(jiang)30(48T的(de)20倍(bei))倍(bei)濃縮(suo)洗(xi)滌(di)液(ye)用蒸(zheng)餾水30(48T的(de)20倍(bei))倍(bei)稀(xi)釋後(hou)備(bei)用。
5. 洗滌(di):小(xiao)心(xin)揭(jie)掉封板膜,棄去(qu)液(ye)體(ti),甩(shuai)幹(gan),每孔加滿洗滌(di)液(ye),靜(jing)置30秒後(hou)棄(qi)去(qu),如(ru)此重(zhong)復5次(ci),拍幹。
6. 加酶(mei):每孔加入(ru)酶(mei)標(biao)試(shi)劑(ji)50μl,空(kong)白孔除(chu)外(wai)。
7. 溫(wen)育:操(cao)作(zuo)同3。
8. 洗(xi)滌(di):操(cao)作(zuo)同5。
9. 顯(xian)色(se):每孔先(xian)加入(ru)顯(xian)色(se)劑(ji)A50μl,再加入(ru)顯(xian)色(se)劑(ji)B50μl,輕(qing)輕(qing)震蕩(dang)混勻(yun),37℃避光顯色(se)5分(fen)鐘(zhong).
0. 終止(zhi):每孔加終止(zhi)液(ye)50μl,終止(zhi)反(fan)應(此(ci)時(shi)藍(lan)色(se)立(li)轉黃色(se))。
. 測(ce)定:以(yi)空白空調零(ling),450nm波長依序測(ce)量各(ge)孔的(de)吸(xi)光(guang)度(OD值(zhi))。 測(ce)定應(ying)在加終止(zhi)液(ye)後(hou)5分(fen)鐘(zhong)。
乙(yi)醛脫(tuo)氫(qing)酶家族3成(cheng)員A抗體
磷(lin)酸化熱休(xiu)克(ke)蛋(dan)白β5/αb晶體(ti)蛋(dan)白質/α-晶體(ti)蛋(dan)白b鏈(lian)抗體
γ2肌(ji)動(dong)蛋(dan)白抗體
gp30結(jie)合(he)蛋白GAM抗體
繆(mou)勒(le)激素(su)2型(xing)受(shou)體(ti)抗體
激活(huo)素(su)受(shou)體(ti)A抗體
激活(huo)素(su)受(shou)體(ti)2A抗體
激活(huo)素(su)受(shou)體(ti)2B抗體
2號(hao)染色(se)體(ti)開(kai)放(fang)閱(yue)讀框(kuang)88抗體
G蛋(dan)白偶聯(lian)受(shou)體(ti)ARHGEF8抗體
激活(huo)素(su)受(shou)體(ti)B抗體
雄激素(su)受(shou)體(ti)相(xiang)關(guan)蛋(dan)白24抗體
澱(dian)粉樣(yang)肽前體蛋(dan)白抗體
腺苷(gan)酸(suan)環化酶2抗體
載脂(zhi)蛋(dan)白C3抗體
載脂(zhi)蛋(dan)白E4抗體
自(zi)噬(shi)相(xiang)關(guan)基(ji)因AMBRA抗體
磷(lin)酸化自(zi)噬(shi)相(xiang)關(guan)蛋(dan)白4C抗體
磷(lin)酸化自(zi)噬(shi)相(xiang)關(guan)蛋(dan)白4C抗體
磷(lin)酸化細(xi)胞(bao)雕亡信號(hao)調節(jie)激酶(mei)抗體
磷(lin)酸化失(shi)調癥蛋白抗體
脊髓小(xiao)腦失(shi)調癥蛋白抗體
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