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大鼠ELISA試劑盒
() 抗(kang)原(yuan)包被:用包被液將(jiang)PEDV抗(kang)原(yuan)作(zuo)∶5稀(xi)釋(shi)包被反應(ying)板(ban),每(mei)孔00μl,同時(shi)設陰性細胞培養(yang)物對(dui)照(zhao)孔,置4℃過夜。
(2) 洗滌:用(yong)洗(xi)滌(di)液洗滌(di)2次,每次2min,瀝幹。
(3) 加入被檢血清:用保溫(wen)液將(jiang)被檢血清作(zuo)∶00稀(xi)釋(shi),加入(ru)反應板(ban)相鄰(lin)的兩(liang)個(ge)孔(kong)中,每孔(kong)00μl。同時(shi)作(zuo)陰、陽(yang)性標準(zhun)血清(qing)對(dui)照(zhao),置37℃孵育h。
(4) 洗(xi)滌3次:方(fang)法同上。
(5) 加入酶(mei)結合物(wu):用(yong)保溫(wen)液將(jiang)酶結(jie)合物(wu)作(zuo)∶4 000稀(xi)釋(shi),加入(ru)反應孔(kong)中,每孔(kong)00μl,置37℃孵育h。
(6) 洗(xi)滌3次:方(fang)法同上。
(7) 加入底(di)物:每(mei)孔00μl,置室(shi)溫(wen)暗盒(he)內顯(xian)色20min。
(8) 加入(ru)終止(zhi)液(ye):每(mei)孔(kong)50μl,靜(jing)置5min。
(9) 測(ce)定(ding)OD值(zhi):用檢測(ce)儀(yi),於492nm波長(chang),按儀(yi)器使(shi)用(yong)及制定標準(zhun)要求(qiu)調(tiao)節儀(yi)器,測(ce)定(ding)各反應(ying)孔(kong)的OD值,記錄(lu)結果。
操(cao)作(zuo)步(bu)驟:
. 取(qu)出(chu)試劑盒,室(shi)溫(wen)(20-25℃)放置 30 分鐘(zhong)。
2. 分組:取出 96 孔板,根(gen)據(ju)待測(ce)樣(yang)品(pin)數量加上標準(zhun)品(pin)的數量決定所(suo)需(xu)的板條數,把剩余(yu)的(de)板(ban)條繼(ji)續(xu)冷(leng)藏處理(li)。分別(bie)設標準(zhun)品(pin)組(6 個(ge)濃(nong)度(du))、空(kong)白孔(kong)、待測(ce)樣(yang)品(pin)組。
註:為(wei)減(jian)少實驗誤差(cha),保證準(zhun)確性,建(jian)議設置復孔。
3. 加(jia)樣(yang):依(yi)照(zhao)標準(zhun)品(pin)的順(shun)序(xu)分別(bie)加(jia)入 00ul 的(de)標準(zhun)品(pin)溶(rong)液(ye)於空(kong)白微(wei)孔(kong)中;空(kong)白對(dui)照(zhao)孔加(jia)入(ru) 00ul 的(de)蒸(zheng)餾水(shui);其(qi)余(yu)微(wei)孔(kong)中加入(ru)00ul 的待(dai)測(ce)樣(yang)本(ben)。
4. 加(jia)酶(mei)標溶(rong)液(ye):標準(zhun)品(pin)組、待測(ce)樣(yang)本(ben)組各孔中加入(ru) 50ul 的酶(mei)標溶(rong)液(ye)(空(kong)白對(dui)照(zhao)孔除(chu)外(wai))。
5. 溫(wen)育:酶(mei)標板(ban)用封(feng)板紙(zhi)密封(feng)後,放入濕(shi)盒內(nei)於 37℃恒(heng)溫(wen)孵育 小(xiao)時(shi)。
6. 洗(xi)板:用稀(xi)釋(shi)後的(de)洗滌液(ye)註滿(man)每孔(kong),靜(jing)置 5-30s,充(chong)分清(qing)洗(xi)酶標板(ban) 5 次,用吸(xi)水(shui)紙(zhi)*拍(pai)幹。
7. 顯(xian)色:各孔加(jia)入(ru)顯(xian)色劑 A 液 50ul 後(hou),再(zai)加(jia)入顯(xian)色劑 B 液 50ul。
8. 終(zhong)止(zhi):25-37℃下(xia)避光(guang)反應(ying) 0-5 分鐘(zhong),加(jia)入 50ul 終止液(ye)。
9. 讀板(ban):在(zai) 450nm 波長讀取(qu)各孔的(de) OD 值(zhi)。
公(gong)司(si)常年(nian)代(dai)理(li)德國(guo)TSZ品(pin)牌(pai)、Mercodia品(pin)牌(pai)、Panbio品(pin)牌(pai)、Alpco品(pin)牌(pai)、CST品(pin)牌(pai)、IBL-America品(pin)牌(pai)、AbFrontier品(pin)牌(pai)、Calbiotech品(pin)牌(pai)、Anogen品(pin)牌(pai)、Ani Biotech品(pin)牌(pai)、AAT Bioquest品(pin)牌(pai)、Jaica品(pin)牌(pai)等(deng)ELISA試劑盒產(chan)品(pin)。
大鼠ELISA試劑盒
elisa酶(mei)聯(lian)免(mian)疫試劑盒:雙抗體(ti)夾心(xin)法、間(jian)接(jie)法、競(jing)爭(zheng)法以(yi)及BAS-ELISA等。
檢測(ce)種(zhong)屬:人(ren)、大小(xiao)鼠(shu)、兔(tu)、羊(yang)、猴、豬、豚(tun)鼠(shu)ELISA檢測(ce)試劑盒等(deng)種(zhong)屬。
包裝:液體(ti)盒裝(zhuang)(48T/96T)
貯藏(zang):2—8°C,避光(guang)防潮保存(cun)。
有(you)效期:6個(ge)月(yue)
大鼠ELISA試劑盒檢測(ce)中樣品(pin)的處理(li)
.細胞培養(yang)物上(shang)清:細胞培養(yang)物於室(shi)溫(wen)000g,離心(xin)0分鐘(zhong)後(hou)收集上清(qing),並將(jiang)標本(ben)保存(cun)於-20℃,且(qie)應避免(mian)反復凍融。
2.血清(qing):標本(ben)請(qing)於室(shi)溫(wen)放置2小(xiao)時(shi)或(huo)4℃過夜後於000g,4℃離心(xin)20分鐘(zhong),取(qu)上清即(ji)可檢測(ce),或(huo)將(jiang)標本(ben)放於-20℃保存(cun),但應(ying)避免(mian)反復凍融。
3.血漿(jiang):可用EDTA或(huo)肝(gan)素(su)作(zuo)為(wei)抗(kang)凝(ning)劑標本(ben)采(cai)集(ji)後(hou)30分鐘(zhong)內(nei)於2-8℃,000g離心(xin)5分鐘(zhong),或(huo)將標本(ben)放於-20℃保存(cun),但應(ying)避免(mian)反復凍融。
4.尿液:無菌(jun)收集取初尿,離心(xin)除去沈澱(dian)物,即(ji)可用(yong)於檢測(ce),要(yao)保存(cun)尿樣,可(ke)以(yi)加入0.05%的NaN3在4-8℃保存(cun),或加(jia)入尿樣冰(bing)凍保護液放入-20℃冰(bing)箱(xiang)保存(cun)。
5.組織勻漿(jiang):將組織標本(ben)先(xian)用PBS洗(xi)滌,除(chu)去多余(yu)血(xue)液(ye),勻(yun)漿(jiang)化(hua)後放在PBS於-20℃放置過夜,再經過(guo)二次反復凍融破膜(mo),5000g,4℃離(li)心(xin)5分鐘(zhong),取(qu)上清即(ji)可檢測(ce)。註(zhu):取(qu)樣和(he)樣(yang)品(pin)處理(li)過(guo)程中,防止有(you)毒物質對(dui)操(cao)作(zuo)人(ren)員(yuan)的危害(hai),要采(cai)取相應(ying)的(de)保護措(cuo)施。
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