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鼠抗(kang)人(ren)CD8單(dan)克(ke)隆抗體(ti)樣(yang)本(ben)的(de)物種 應(ying)選(xuan)擇物種相(xiang)同(tong)或有交叉(cha)反應(ying)的抗體(ti),抗體(ti)可能(neng)與不(bu)同(tong)物種的(de)同(tong)種靶(ba)蛋白有交叉(cha)反應(ying),因其氨(an)基(ji)酸序列同(tong)源性較(jiao)高(gao),如(ru)果樣(yang)本(ben)的(de)種(zhong)類未列入(ru)抗體(ti)說明(ming)書上的(de)交叉(cha)反應(ying)種屬表(biao)中(zhong),並不(bu)意(yi)味(wei)著該(gai)抗體(ti)不(bu)適用於(yu)檢(jian)測(ce)該(gai)物種的(de)蛋白,而只(zhi)是表(biao)示該(gai)物種尚(shang)未用此抗(kang)體(ti)檢(jian)測(ce)驗(yan)證(zheng)過(guo),應通過(guo)序列比(bi)對的(de)方(fang)法來預(yu)測(ce)交叉(cha)反應(ying),可應用Expasy 和 NCBI BLAST 來(lai)進行不(bu)同(tong)物種蛋白同(tong)源性比(bi)對。
鼠(shu)抗人(ren)CD8單(dan)克(ke)隆抗體(ti)壹抗宿(xiu)主(zhu)物種的(de)選(xuan)擇壹般(ban)說(shuo)來,在使用偶聯(lian)二(er)抗結合(he)無偶(ou)聯物的壹(yi)抗時,壹抗(kang)宿(xiu)主(zhu)動物的物種選(xuan)擇較(jiao)為(wei)重要(yao),對於(yu)免疫(yi)組(zu)化(hua)而言,盡可能(neng)選(xuan)擇與樣(yang)本(ben)不(bu)同(tong)種系物種的(de)壹抗,從而(er)避(bi)免二(er)抗與樣(yang)本(ben)內(nei)源性免疫(yi)球蛋白產生(sheng)交叉(cha)反應(ying),例(li)如(ru):檢(jian)測(ce)小(xiao)鼠樣(yang)本(ben)蛋白,則不(bu)應(ying)選(xuan)擇小(xiao)鼠或大鼠源的(de)壹(yi)抗(kang),選(xuan)兔(tu)源的(de)壹(yi)抗(kang),則二(er)抗則可選(xuan)擇偶聯(lian)了檢(jian)測(ce)分(fen)子(酶、熒(ying)光(guang)素(su)、等)的(de)抗(kang)兔IgG。
如(ru)果選(xuan)擇有偶(ou)聯物的壹(yi)抗則不(bu)適用上述情況(kuang),除免疫(yi)組(zu)化(hua)外(wai)的其(qi)它對不(bu)含(han)內(nei)源性免疫(yi)球蛋白樣(yang)本(ben)的(de)檢(jian)測(ce)方(fang)法,則抗(kang)體(ti)宿(xiu)主(zhu)物種的(de)影響不(bu)大(da),如(ru)對(dui)不(bu)含(han)IgG 的(de)細(xi)胞裂解物樣(yang)本(ben)的(de)western blotting檢(jian)測(ce),盡管(guan)如(ru)此,含(han)有血清的(de)組(zu)織裂解物和組(zu)織培養上清中(zhong)含有免疫(yi)球蛋白,還原變性樣(yang)本(ben)中(zhong)含IgG,在(zai)western blot 檢(jian)測(ce)中(zhong)則結(jie)合(he)出現(xian)IgG 分(fen)子50 and 25 kDa 的重鏈(lian)和輕(qing)鏈(lian)條(tiao)帶。
二(er)抗的選(xuan)擇 二(er)抗應選(xuan)用與使(shi)用的壹(yi)抗相同(tong)的物種來(lai)源,例(li)如(ru):如(ru)果妳的壹抗是小(xiao)鼠的單克(ke)隆抗體(ti),二(er)抗則選(xuan)抗(kang)小(xiao)鼠的二(er)抗anti-mouse secondary。建議(yi)檢(jian)查(zha)二(er)抗說明(ming)書確保(bao)該(gai)抗體(ti)適用於(yu)妳(ni)的(de)檢(jian)測(ce)應(ying)用, 二(er)抗壹般(ban)連接(jie)熒(ying)光(guang)素(su)FITC 或發光團(tuan)。
上海(hai)谷(gu)研生(sheng)物科技(ji)有限(xian)公(gong)司(si)特殊抗(kang)體(ti)的保存條(tiao)件:
. 酶聯(lian)抗(kang)體(ti):永(yong)遠(yuan)保存(cun)在4 度,避免凍起來(lai)。否(fou)則會(hui)導(dao)致酶活(huo)性的下(xia)降(jiang)或者喪失
2. 偶(ou)聯抗(kang)體(ti):所(suo)有偶(ou)聯抗體(ti)都(dou)是在(zai)棕色(se)管中(zhong)或使用錫箔紙避光保(bao)存(cun)。尤其是熒(ying)光(guang)抗(kang)體(ti),對
光極為(wei)敏感,因此在(zai)所(suo)有的(de)實驗(yan)階段(duan)也(ye)是要(yao)避光(guang)操(cao)作(zuo)的(de)!
3. IgG3 的(de)同(tong)型(xing)對(dui)照:永(yong)遠(yuan)保存(cun)在4 度,避免凍起來(lai)。因(yin)為如(ru)果出現凍融(rong)過(guo)程,該(gai)抗體(ti)非常
容易(yi)形(xing)成(cheng)多聚(ju)體(ti)無論是保(bao)存還(hai)是運(yun)輸,避(bi)免反復(fu)凍融(rong)!
反(fan)復凍融(rong)會(hui)導(dao)致抗(kang)體(ti)變性,導致(zhi)多聚(ju)體(ti)形成,從而(er)降(jiang)低抗(kang)體(ti)的結合(he)能(neng)力!
其它相關信息:
Statine
Stain-All
0-乙(yi)酰(xian)基(ji)-3,7-二(er)羥基(ji)吩(fen)嗪
ReadiUse? 過(guo)氧化(hua)氫(qing)片(pian)劑
ReadiUse?
Amplite?藍
Amplite? IR
HRP 交聯(lian)穩定劑(ji)
魯米(mi)諾(nuo);3-氨(an)基(ji)苯二(er)甲(jia)酰(xian)肼(jing);發光氨(an)
魯米(mi)諾(nuo);3-氨(an)基(ji)苯二(er)甲(jia)酰(xian)肼(jing);發光氨(an)
熒(ying)光(guang)素(su)二(er)磷酸酯四(si)銨(an)鹽(yan)
4-甲(jia)基(ji)傘形(xing)酮(tong)磷酸酯二(er)鈉(na)鹽
4-甲(jia)基(ji)傘形(xing)酮(tong)磷酸酯二(er)鈉(na)鹽
4-甲(jia)基(ji)傘形(xing)酮(tong)磷酸酯
4-甲(jia)基(ji)傘形(xing)酮(tong)磷酸酯
Ac-DEVD-AFC
Ac-DEVD-AMC
Ac-DEVD-CHO
Ac-DEVD-pNA
FITC-C6-DEVD-FMK
FITC-C6-LEHD-FMK
Ac-IETD-AFC
Ac-IETD-AMC
Ac-IETD-CHO
關於(yu)加(jia)入(ru)甘油保存:有些(xie)人(ren)會(hui)加(jia)50%的甘油到抗體(ti)中(zhong)來避(bi)免反復(fu)凍融(rong),甘油在-20 度 會(hui)降(jiang)低冰(bing)點(dian)。這(zhe)對很(hen)多(duo)抗(kang)體(ti)可能(neng)是可行的。但是abcam 僅(jin)對非(fei)常小(xiao)的壹部分(fen)抗體(ti)檢(jian)測(ce)過(guo)其在這(zhe)種(zhong)條(tiao)件下的穩定性;而abcam 只(zhi)對按(an)照條(tiao)件保存的抗體(ti)提供(gong)質(zhi)量保(bao)證(zheng)!加(jia)入甘油的溶液(ye)不(bu)建(jian)議(yi)在(zai)-80 度(du)保(bao)存(cun),因(yin)為(wei)這已經超(chao)過(guo)了甘油的冰點(dian)。如(ru)果您要(yao)加入(ru)甘油來保存(cun)抗(kang)體(ti)的話,請(qing)謹慎註(zhu)意(yi)無菌操(cao)作(zuo),避(bi)免汙(wu)染(ran)!
關(guan)於(yu)蛋白保護劑(ji):
蛋白在高(gao)濃(nong)度(du)時(shi)更(geng)不(bu)容(rong)易(yi)降(jiang)解( mg/ml 或者更(geng)高(gao)),這(zhe)就是為(wei)什麽在(zai)抗體(ti)中(zhong)加入(ru)BSA 之類作(zuo)為(wei)穩定劑(ji)的原因了;另(ling)壹方(fang)面(mian),加(jia)入(ru)的蛋白也(ye)可以減(jian)少(shao)抗(kang)體(ti)由於(yu)管(guan)壁(bi)吸(xi)附(fu)所(suo)造(zao)成(cheng)的(de)損(sun)失。但是如(ru)果抗體(ti)要(yao)用來標記的(de)話(hua),則不(bu)能(neng)加入(ru)蛋白穩定劑(ji),因為(wei)這(zhe)些(xie)穩定劑(ji)會(hui)和抗(kang)體(ti)壹起競(jing)爭(zheng)結合(he)標記物。
企業(ye)信息
ENTERPRISE INFORMATION上海(hai)谷(gu)研實業(ye)有限(xian)公(gong)司(si)
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