當前位置(zhi):首頁 > 產品(pin)展示(shi) > 蛋(dan)白/抗體 > 壹抗(kang) > 細(xi)胞角(jiao)蛋(dan)白5抗體

細(xi)胞角(jiao)蛋(dan)白5抗體樣本的(de)物(wu)種(zhong) 應選(xuan)擇(ze)物(wu)種(zhong)相同或(huo)有交(jiao)叉(cha)反應的(de)抗(kang)體,抗(kang)體可能與(yu)不同物(wu)種(zhong)的同種(zhong)靶(ba)蛋(dan)白有交(jiao)叉(cha)反應,因其(qi)氨(an)基(ji)酸序(xu)列(lie)同源性較(jiao)高(gao),如果(guo)樣本的(de)種(zhong)類未(wei)列(lie)入抗體說明(ming)書(shu)上的(de)交(jiao)叉(cha)反應種(zhong)屬(shu)表中(zhong),並(bing)不意(yi)味(wei)著(zhe)該(gai)抗體(ti)不適用(yong)於(yu)檢測該(gai)物(wu)種(zhong)的蛋(dan)白,而只是(shi)表示(shi)該(gai)物(wu)種(zhong)尚未(wei)用(yong)此抗(kang)體(ti)檢(jian)測驗(yan)證過(guo),應(ying)通過序列(lie)比對的(de)方(fang)法(fa)來(lai)預測(ce)交(jiao)叉(cha)反應,可應用(yong)Expasy 和(he) NCBI BLAST 來(lai)進(jin)行(xing)不(bu)同物(wu)種(zhong)蛋(dan)白同源性比對。
細(xi)胞角(jiao)蛋(dan)白5抗體壹抗(kang)宿主(zhu)物(wu)種(zhong)的選(xuan)擇(ze)壹(yi)般說(shuo)來,在(zai)使用(yong)偶聯二抗(kang)結合無(wu)偶聯物(wu)的壹(yi)抗時,壹抗宿主(zhu)動(dong)物(wu)的物(wu)種(zhong)選擇(ze)較(jiao)為重要,對於(yu)免(mian)疫組化而(er)言,盡(jin)可能選(xuan)擇與(yu)樣本不(bu)同種(zhong)系物(wu)種(zhong)的壹(yi)抗(kang),從而避免(mian)二抗(kang)與(yu)樣本內(nei)源(yuan)性免(mian)疫球蛋(dan)白產生(sheng)交(jiao)叉(cha)反應,例如:檢測小(xiao)鼠(shu)樣本蛋(dan)白,則(ze)不(bu)應選(xuan)擇(ze)小(xiao)鼠(shu)或(huo)大鼠源(yuan)的壹(yi)抗(kang),選(xuan)兔(tu)源的(de)壹抗,則(ze)二(er)抗則(ze)可選擇(ze)偶聯了檢(jian)測(ce)分子(酶、熒光素(su)、等)的(de)抗(kang)兔IgG。
如果(guo)選(xuan)擇(ze)有偶聯物(wu)的壹(yi)抗則(ze)不(bu)適用(yong)上述(shu)情況,除(chu)免(mian)疫組化外(wai)的(de)其(qi)它(ta)對不(bu)含內源性(xing)免(mian)疫球蛋(dan)白樣本的(de)檢(jian)測方(fang)法(fa),則(ze)抗(kang)體宿主(zhu)物(wu)種(zhong)的影(ying)響(xiang)不大,如對不(bu)含IgG 的細(xi)胞裂解物(wu)樣本的(de)western blotting檢(jian)測,盡(jin)管(guan)如此,含有血(xue)清(qing)的組織(zhi)裂解物(wu)和(he)組織(zhi)培養上清(qing)中(zhong)含(han)有免(mian)疫球蛋(dan)白,還原(yuan)變(bian)性樣本中(zhong)含(han)IgG,在(zai)western blot 檢(jian)測中(zhong)則(ze)結合出現IgG 分子50 and 25 kDa 的重鏈和(he)輕(qing)鏈條(tiao)帶。
二抗(kang)的(de)選擇 二(er)抗應(ying)選(xuan)用(yong)與(yu)使用(yong)的壹(yi)抗(kang)相(xiang)同的物(wu)種(zhong)來源(yuan),例如:如果(guo)妳(ni)的(de)壹(yi)抗(kang)是(shi)小(xiao)鼠(shu)的(de)單(dan)克隆(long)抗(kang)體(ti),二(er)抗(kang)則(ze)選(xuan)抗小(xiao)鼠(shu)的(de)二(er)抗anti-mouse secondary。建議檢查二抗(kang)說明(ming)書(shu)確(que)保(bao)該(gai)抗體(ti)適用(yong)於(yu)妳(ni)的(de)檢(jian)測(ce)應(ying)用(yong), 二抗(kang)壹(yi)般(ban)連(lian)接(jie)熒光素(su)FITC 或(huo)發光(guang)團(tuan)。
上海(hai)谷研生(sheng)物(wu)科技有(you)限(xian)公司(si)特殊抗(kang)體的(de)保(bao)存(cun)條(tiao)件(jian):
. 酶聯抗體(ti):永遠保存(cun)在(zai)4 度(du),避免(mian)凍起(qi)來(lai)。否(fou)則(ze)會(hui)導致(zhi)酶(mei)活(huo)性的(de)下降(jiang)或(huo)者(zhe)喪(sang)失(shi)
2. 偶(ou)聯抗體(ti):所(suo)有偶聯抗體(ti)都(dou)是(shi)在(zai)棕(zong)色(se)管中(zhong)或(huo)使用(yong)錫箔紙避(bi)光保(bao)存(cun)。尤其(qi)是(shi)熒光抗體(ti),對
光(guang)極(ji)為敏感(gan),因此在(zai)所(suo)有的實(shi)驗(yan)階(jie)段(duan)也(ye)是(shi)要避(bi)光操(cao)作的(de)!
3. IgG3 的同型(xing)對照(zhao):永遠保存(cun)在(zai)4 度(du),避免(mian)凍起(qi)來(lai)。因為如果(guo)出現凍融過(guo)程,該(gai)抗體(ti)非常
容易形成(cheng)多聚(ju)體無(wu)論是(shi)保存(cun)還是(shi)運輸(shu),避免(mian)反復凍(dong)融(rong)!
反復凍(dong)融(rong)會導致(zhi)抗(kang)體變性,導致(zhi)多聚(ju)體形成,從而降(jiang)低抗(kang)體(ti)的結合能(neng)力(li)!
其(qi)它(ta)相關(guan)信息:
油紅(hong)O 5g
玉(yu)米(mi)素(su) 5mg
蔗糖(tang) 500g
脂(zhi)質(zhi)體(ti) 66809 .5ml
脂(zhi)質(zhi)體(ti) 668027 0.75ml
植(zhi)物(wu)凝(ning)膠(jiao) P869 500g
制(zhi)菌酶素(su) 00mg
中(zhong)性(xing)紅(hong) 5g
轉鐵(tie)蛋(dan)白 0mg
轉鐵蛋(dan)白 00mg
g
Eppendorf Research單道可調(tiao)量(liang)程移液器, 含吸頭(tou), 0.-2.5μl Eppendorf 0.-2.5ul 支
Eppendorf Research單道可調(tiao)量(liang)程移液器, 含吸頭(tou), 0.5-0μl Eppendorf 0.5-0ul 支
Eppendorf Research單道可調(tiao)量(liang)程移液器, 含吸頭(tou), 2-20μl Eppendorf 2-20ul 支
Eppendorf Research單道可調(tiao)量(liang)程移液器, 含吸頭(tou), 0-00μl Eppendorf 0-00ul 支
關(guan)於(yu)加(jia)入甘油保(bao)存:有(you)些(xie)人(ren)會(hui)加(jia)50%的(de)甘油到抗(kang)體中(zhong)來(lai)避免(mian)反復凍(dong)融(rong),甘油在(zai)-20 度(du) 會降(jiang)低冰(bing)點。這對很(hen)多抗體可能是(shi)可行的(de)。但是(shi)abcam 僅對非(fei)常小(xiao)的(de)壹(yi)部(bu)分抗(kang)體(ti)檢測過其(qi)在(zai)這種(zhong)條(tiao)件(jian)下的穩定性;而(er)abcam 只對按(an)照條(tiao)件(jian)保存(cun)的(de)抗體(ti)提供質(zhi)量(liang)保(bao)證!加(jia)入甘油的(de)溶(rong)液不(bu)建(jian)議在(zai)-80 度(du)保存(cun),因為這已(yi)經超(chao)過了(le)甘(gan)油的(de)冰(bing)點。如果(guo)您(nin)要(yao)加(jia)入甘油來(lai)保存(cun)抗體的(de)話(hua),請(qing)謹慎(shen)註(zhu)意(yi)無(wu)菌操(cao)作,避(bi)免(mian)汙染(ran)!
關(guan)於(yu)蛋(dan)白保護劑(ji):
蛋(dan)白在(zai)高(gao)濃度(du)時更不容易降(jiang)解( mg/ml 或(huo)者(zhe)更高),這就(jiu)是(shi)為什(shen)麽在(zai)抗(kang)體中(zhong)加(jia)入BSA 之(zhi)類作為穩(wen)定劑(ji)的原(yuan)因了;另(ling)壹(yi)方(fang)面,加(jia)入的蛋(dan)白也(ye)可以(yi)減(jian)少(shao)抗(kang)體由(you)於(yu)管壁(bi)吸附(fu)所(suo)造成的(de)損(sun)失。但是(shi)如果(guo)抗(kang)體(ti)要用(yong)來標(biao)記的(de)話,則(ze)不(bu)能加(jia)入蛋(dan)白穩定劑(ji),因為這些(xie)穩(wen)定劑(ji)會和(he)抗(kang)體(ti)壹(yi)起(qi)競(jing)爭(zheng)結合標(biao)記物(wu)。
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