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c-mer原癌基因(yin)激酶(mei)抗(kang)體樣(yang)本的(de)物(wu)種 應(ying)選擇(ze)物(wu)種相(xiang)同(tong)或有交(jiao)叉反(fan)應(ying)的(de)抗(kang)體,抗(kang)體可能與(yu)不同(tong)物(wu)種的(de)同(tong)種靶(ba)蛋白(bai)有交(jiao)叉反(fan)應(ying),因(yin)其氨基(ji)酸(suan)序列(lie)同(tong)源(yuan)性(xing)較高(gao),如(ru)果(guo)樣本(ben)的(de)種類(lei)未(wei)列(lie)入(ru)抗(kang)體說(shuo)明(ming)書(shu)上的(de)交叉反(fan)應(ying)種屬(shu)表中(zhong),並不意(yi)味著(zhe)該抗(kang)體不適(shi)用(yong)於檢測該物(wu)種的(de)蛋白(bai),而只是表(biao)示該物(wu)種尚(shang)未(wei)用(yong)此抗(kang)體檢(jian)測驗證過,應(ying)通(tong)過序列(lie)比(bi)對的(de)方法(fa)來(lai)預(yu)測交(jiao)叉反(fan)應(ying),可應(ying)用(yong)Expasy 和(he) NCBI BLAST 來進(jin)行(xing)不同(tong)物(wu)種蛋白(bai)同(tong)源(yuan)性(xing)比(bi)對。
c-mer原癌基因(yin)激酶(mei)抗(kang)體壹(yi)抗(kang)宿主物(wu)種的(de)選擇(ze)壹般說(shuo)來(lai),在使用(yong)偶聯二抗(kang)結(jie)合(he)無偶(ou)聯物(wu)的(de)壹抗(kang)時(shi),壹抗(kang)宿主動(dong)物(wu)的(de)物(wu)種選擇(ze)較為(wei)重(zhong)要(yao),對於(yu)免疫(yi)組(zu)化而言,盡可能選擇(ze)與(yu)樣本(ben)不同(tong)種系(xi)物(wu)種的(de)壹抗(kang),從(cong)而避(bi)免(mian)二抗(kang)與(yu)樣本(ben)內源(yuan)性(xing)免疫(yi)球(qiu)蛋白(bai)產生交叉反(fan)應(ying),例(li)如(ru):檢(jian)測小鼠樣(yang)本(ben)蛋白(bai),則(ze)不應選擇(ze)小鼠或(huo)大(da)鼠源(yuan)的(de)壹抗(kang),選兔(tu)源(yuan)的(de)壹抗(kang),則二(er)抗(kang)則可選擇(ze)偶聯了檢測分子(zi)(酶(mei)、熒光素、等(deng))的(de)抗(kang)兔(tu)IgG。
如(ru)果(guo)選擇(ze)有偶(ou)聯物(wu)的(de)壹抗(kang)則不適(shi)用(yong)上述(shu)情況(kuang),除(chu)免疫(yi)組(zu)化外的(de)其它(ta)對不含內源(yuan)性(xing)免疫(yi)球(qiu)蛋白(bai)樣(yang)本(ben)的(de)檢測(ce)方法(fa),則(ze)抗(kang)體宿(xiu)主物(wu)種的(de)影響(xiang)不大(da),如(ru)對不含IgG 的(de)細胞(bao)裂解物(wu)樣本(ben)的(de)western blotting檢測(ce),盡管如(ru)此(ci),含有血(xue)清(qing)的(de)組(zu)織(zhi)裂解物(wu)和(he)組(zu)織(zhi)培(pei)養上(shang)清(qing)中(zhong)含有免(mian)疫(yi)球(qiu)蛋白(bai),還(hai)原變(bian)性(xing)樣本(ben)中(zhong)含IgG,在western blot 檢測(ce)中(zhong)則(ze)結(jie)合(he)出現IgG 分(fen)子(zi)50 and 25 kDa 的(de)重(zhong)鏈(lian)和(he)輕(qing)鏈(lian)條(tiao)帶(dai)。
二(er)抗(kang)的(de)選擇(ze) 二抗(kang)應選用與(yu)使用(yong)的(de)壹抗(kang)相同(tong)的(de)物(wu)種來(lai)源(yuan),例(li)如(ru):如(ru)果(guo)妳(ni)的(de)壹抗(kang)是小鼠的(de)單克(ke)隆抗(kang)體,二(er)抗(kang)則選抗(kang)小鼠的(de)二抗(kang)anti-mouse secondary。建(jian)議檢查二(er)抗(kang)說(shuo)明(ming)書(shu)確保該抗(kang)體適(shi)用(yong)於妳(ni)的(de)檢測(ce)應用(yong), 二抗(kang)壹般連接熒(ying)光素FITC 或發(fa)光團。
上(shang)海谷研(yan)生物(wu)科(ke)技(ji)有限(xian)公司(si)特(te)殊抗(kang)體的(de)保存條(tiao)件(jian):
. 酶(mei)聯抗(kang)體:永(yong)遠(yuan)保存在4 度,避(bi)免(mian)凍起來。否(fou)則會(hui)導(dao)致(zhi)酶(mei)活(huo)性(xing)的(de)下(xia)降(jiang)或者喪失(shi)
2. 偶聯抗(kang)體:所(suo)有偶(ou)聯抗(kang)體都(dou)是在棕色管中(zhong)或(huo)使用(yong)錫箔紙避(bi)光保存。尤(you)其(qi)是熒(ying)光抗(kang)體,對
光極(ji)為(wei)敏(min)感,因(yin)此在所(suo)有的(de)實驗階段也(ye)是要(yao)避(bi)光操(cao)作的(de)!
3. IgG3 的(de)同(tong)型對照(zhao):永遠(yuan)保存在4 度,避(bi)免(mian)凍起來。因(yin)為(wei)如(ru)果(guo)出現凍(dong)融過程(cheng),該抗(kang)體非(fei)常
容(rong)易形(xing)成多聚體(ti)無論(lun)是保存還(hai)是運(yun)輸,避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)!
反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)會(hui)導致抗(kang)體變(bian)性(xing),導致(zhi)多聚(ju)體形(xing)成,從(cong)而降(jiang)低抗(kang)體的(de)結(jie)合(he)能力(li)!
其它相關(guan)信(xin)息(xi):
部(bu)分凝(ning)血(xue)活(huo)酶(mei)時(shi)間(APTT)測定(ding)試劑盒(he)<鞣(rou)花(hua)酸(suan)含Cacl2> 凝(ning)固(gu)法(fa)
0.025M氯(lv)化鈣<Cacl2>
時(shi)間(TT)測定(ding)試劑盒(he)<含復溶(rong)液(ye)> 凝(ning)固(gu)法(fa)
時(shi)間(TT)測定(ding)試劑盒(he)<含復溶(rong)液(ye)> 凝(ning)固(gu)法(fa)
纖(xian)維蛋白(bai)原(BFI)測定(ding)試劑盒(he)<含IBS、定(ding)標(biao)血(xue)漿(jiang)> 凝(ning)固(gu)法(fa)
纖(xian)維蛋白(bai)原(BFI)測定(ding)試劑盒(he)<含IBS、定(ding)標(biao)血(xue)漿(jiang)> 凝(ning)固(gu)法(fa)
纖(xian)維蛋白(bai)原(BFI)測定(ding)試劑盒(he)<含IBS> 凝(ning)固(gu)法(fa)
纖(xian)維蛋白(bai)原(BFI)測定(ding)試劑盒(he)<含IBS> 凝(ning)固(gu)法(fa)
原時(shi)間(PT)測定(ding)試劑盒(he)ISI.0-.3 凝(ning)固(gu)法(fa)
原時(shi)間(PT)測定(ding)試劑盒(he)ISI.0-.3 凝(ning)固(gu)法(fa)
部(bu)分凝(ning)血(xue)活(huo)酶(mei)時(shi)間(APTT)測定(ding)試劑盒(he)<鞣(rou)花(hua)酸(suan)含Cacl2> 凝(ning)固(gu)法(fa)
部(bu)分凝(ning)血(xue)活(huo)酶(mei)時(shi)間(APTT)測定(ding)試劑盒(he)<白(bai)陶土(tu)含Cacl2> 凝(ning)固(gu)法(fa)
時(shi)間(TT)測定(ding)試劑盒(he) 凝(ning)固(gu)法(fa)
纖(xian)維蛋白(bai)原(BFI)測定(ding)試劑盒(he)<含IBS、定(ding)標(biao)血(xue)漿(jiang)> 凝(ning)固(gu)法(fa)
纖(xian)維蛋白(bai)原(BFI)測定(ding)試劑盒(he)<含IBS、定(ding)標(biao)血(xue)漿(jiang)> 凝(ning)固(gu)法(fa)
關(guan)於(yu)加入(ru)甘(gan)油(you)保存:有些(xie)人會加50%的(de)甘(gan)油(you)到(dao)抗(kang)體中(zhong)來(lai)避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong),甘(gan)油(you)在-20 度 會(hui)降(jiang)低冰點(dian)。這對很多(duo)抗(kang)體可能是可行(xing)的(de)。但是abcam 僅(jin)對非(fei)常小的(de)壹部(bu)分抗(kang)體檢(jian)測過其(qi)在這種條(tiao)件(jian)下(xia)的(de)穩定(ding)性(xing);而abcam 只對按照條件(jian)保存的(de)抗(kang)體提(ti)供(gong)質量保證!加入(ru)甘(gan)油(you)的(de)溶(rong)液(ye)不建(jian)議在-80 度保存,因(yin)為(wei)這(zhe)已經超過了甘(gan)油(you)的(de)冰點(dian)。如(ru)果(guo)您要(yao)加入(ru)甘(gan)油(you)來保存抗(kang)體的(de)話,請(qing)謹(jin)慎(shen)註意(yi)無菌(jun)操(cao)作,避(bi)免(mian)汙染(ran)!
關(guan)於(yu)蛋白(bai)保護劑:
蛋白(bai)在高濃(nong)度(du)時(shi)更不容(rong)易降(jiang)解( mg/ml 或者更高),這(zhe)就是為(wei)什(shen)麽在抗(kang)體中(zhong)加入(ru)BSA 之類(lei)作為(wei)穩(wen)定(ding)劑的(de)原因(yin)了;另(ling)壹方面(mian),加入(ru)的(de)蛋白(bai)也(ye)可以減少(shao)抗(kang)體由(you)於管壁(bi)吸附所(suo)造成的(de)損失(shi)。但是如(ru)果(guo)抗(kang)體要(yao)用(yong)來標(biao)記的(de)話,則不能加入(ru)蛋白(bai)穩(wen)定(ding)劑,因(yin)為(wei)這(zhe)些(xie)穩定(ding)劑會(hui)和(he)抗(kang)體壹(yi)起競爭結(jie)合(he)標(biao)記物(wu)。
企(qi)業信息(xi)
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