當前位置:首頁(ye) > 產(chan)品(pin)展(zhan)示(shi) > 蛋(dan)白(bai)/抗體 > 壹(yi)抗(kang) > 結(jie)蛋(dan)白(bai)(抗體)

結(jie)蛋(dan)白(bai)(抗體)樣本(ben)的物種 應(ying)選擇(ze)物種相(xiang)同或有交(jiao)叉(cha)反應(ying)的抗(kang)體,抗體可能(neng)與(yu)不同(tong)物種的(de)同種靶蛋(dan)白(bai)有交(jiao)叉(cha)反應(ying),因其(qi)氨基(ji)酸序列同源性(xing)較(jiao)高(gao),如(ru)果(guo)樣本(ben)的種(zhong)類(lei)未(wei)列入(ru)抗體說明書(shu)上(shang)的(de)交叉(cha)反應(ying)種屬表(biao)中(zhong),並(bing)不意味(wei)著該抗體不適(shi)用(yong)於(yu)檢測該物種的(de)蛋(dan)白(bai),而只是(shi)表(biao)示(shi)該物種尚(shang)未(wei)用(yong)此抗體檢測(ce)驗(yan)證(zheng)過(guo),應(ying)通(tong)過(guo)序列比對(dui)的方法(fa)來(lai)預測(ce)交(jiao)叉(cha)反應(ying),可應(ying)用(yong)Expasy 和(he) NCBI BLAST 來進(jin)行(xing)不同(tong)物種蛋(dan)白(bai)同源(yuan)性(xing)比對(dui)。
結(jie)蛋(dan)白(bai)(抗體)壹(yi)抗(kang)宿主(zhu)物種的(de)選擇(ze)壹(yi)般(ban)說來,在(zai)使(shi)用(yong)偶聯二(er)抗(kang)結(jie)合(he)無偶聯物的壹(yi)抗(kang)時,壹(yi)抗(kang)宿主(zhu)動物的物種選(xuan)擇(ze)較為(wei)重要,對於(yu)免疫組化(hua)而言,盡(jin)可能(neng)選(xuan)擇(ze)與(yu)樣本(ben)不同(tong)種(zhong)系物種的(de)壹(yi)抗(kang),從(cong)而避免二抗與(yu)樣本(ben)內源(yuan)性(xing)免疫球(qiu)蛋(dan)白(bai)產(chan)生(sheng)交叉(cha)反應(ying),例(li)如:檢(jian)測(ce)小(xiao)鼠(shu)樣本(ben)蛋(dan)白(bai),則不應(ying)選擇(ze)小(xiao)鼠(shu)或大鼠(shu)源(yuan)的壹(yi)抗(kang),選兔(tu)源的壹(yi)抗(kang),則二(er)抗則可選擇(ze)偶聯了(le)檢(jian)測(ce)分子(酶、熒光(guang)素、等)的抗(kang)兔IgG。
如(ru)果(guo)選擇(ze)有偶聯物的壹(yi)抗(kang)則不適(shi)用(yong)上(shang)述(shu)情況,除(chu)免疫組化(hua)外(wai)的(de)其(qi)它對不含內源性(xing)免疫球(qiu)蛋(dan)白(bai)樣本(ben)的檢(jian)測方法(fa),則(ze)抗體宿主(zhu)物種的(de)影響不大(da),如(ru)對(dui)不含IgG 的細(xi)胞(bao)裂解物樣本(ben)的western blotting檢(jian)測,盡(jin)管如(ru)此,含有血清的(de)組(zu)織(zhi)裂解物和組(zu)織(zhi)培養(yang)上(shang)清(qing)中(zhong)含有免疫球(qiu)蛋(dan)白(bai),還原變性(xing)樣本(ben)中(zhong)含IgG,在western blot 檢測中(zhong)則(ze)結(jie)合(he)出現(xian)IgG 分子50 and 25 kDa 的(de)重鏈(lian)和(he)輕(qing)鏈(lian)條(tiao)帶(dai)。
二(er)抗的選擇(ze) 二抗(kang)應(ying)選用(yong)與(yu)使(shi)用(yong)的(de)壹(yi)抗(kang)相(xiang)同的(de)物種來(lai)源,例(li)如:如(ru)果(guo)妳的壹(yi)抗(kang)是小(xiao)鼠(shu)的(de)單克(ke)隆抗(kang)體,二抗(kang)則(ze)選(xuan)抗小(xiao)鼠(shu)的(de)二抗anti-mouse secondary。建議(yi)檢查二抗說明書(shu)確保該抗體適(shi)用(yong)於(yu)妳的檢(jian)測應(ying)用(yong), 二(er)抗壹(yi)般(ban)連接熒光(guang)素FITC 或發光(guang)團(tuan)。
上(shang)海谷研(yan)生(sheng)物科技有限(xian)公司特(te)殊(shu)抗(kang)體的保存(cun)條件(jian):
. 酶聯抗(kang)體:永遠保存(cun)在4 度(du),避(bi)免凍起來(lai)。否則(ze)會(hui)導致(zhi)酶活(huo)性(xing)的(de)下(xia)降或者喪(sang)失
2. 偶聯抗(kang)體:所有(you)偶聯抗(kang)體都是在(zai)棕色(se)管(guan)中(zhong)或使(shi)用(yong)錫(xi)箔紙(zhi)避(bi)光(guang)保存(cun)。尤(you)其(qi)是熒光(guang)抗體,對
光(guang)極為敏感(gan),因此在所(suo)有的實(shi)驗(yan)階(jie)段也是要避光(guang)操(cao)作(zuo)的(de)!
3. IgG3 的(de)同型對照(zhao):永遠保存(cun)在4 度(du),避(bi)免凍起來(lai)。因為(wei)如(ru)果(guo)出現(xian)凍(dong)融(rong)過(guo)程,該抗體非常
容易(yi)形成多(duo)聚體無論是(shi)保存(cun)還是運(yun)輸,避免反復凍(dong)融!
反(fan)復(fu)凍(dong)融會(hui)導致(zhi)抗體變性(xing),導致(zhi)多(duo)聚體形成,從(cong)而降低抗(kang)體的結(jie)合(he)能力!
其(qi)它相(xiang)關信息:
Tissue Total Protein Lysis Buffer組(zu)織(zhi)蛋(dan)白(bai)裂解液(ye)
5x蛋(dan)白(bai)印(yin)跡(ji)膜(mo)再(zai)生(sheng)液(ye)(強)
Inclusion body Purgation buffer包(bao)涵體洗(xi)滌液(ye)
Western?and?IP Cell?lysis?BufferWestern及IP細(xi)胞(bao)裂解液(ye)
5x蛋(dan)白(bai)印(yin)跡(ji)膜(mo)再(zai)生(sheng)液(ye)(溫和)
2D Sample Extraction Buffers I(major components: urea,NP-40 )2D電(dian)泳(yong)樣品(pin)提(ti)取(qu)液(ye) I
EZ-Buffers 0xHigh Molecules Western Transfer Buffer (no methanol)緩(huan)沖(chong)液(ye)
無蛋(dan)白(bai)封閉(bi)液(ye) 2% 封閉(bi)試(shi)劑(ji)
2D Sample Extraction Buffers II(major components: urea,CHAPS )2D電(dian)泳(yong)樣品(pin)提(ti)取(qu)液(ye) II
2D Sample Extraction Buffers V(major components: urea,thiourea, CHAPS )2D電泳(yong)樣品(pin)提(ti)取(qu)液(ye) V
2D Sample Extraction Buffers III(major components: urea,thiourea, CHAPS, ASB-6 )2D電泳(yong)樣品(pin)提(ti)取(qu)液(ye) III
2D Sample Extraction Buffers IV(major components :urea,thiourea ,CHAPS, SB3-0 )2D電泳(yong)樣品(pin)提(ti)取(qu)液(ye) IV
2D Sample Extraction Buffers VI(major components: urea,thiourea, CHAPS, ND SB20 )2D電泳(yong)樣品(pin)提(ti)取(qu)液(ye) VI
EZ-Buffers B 0XTBS Buffer緩(huan)沖(chong)液(ye)
EZ-Buffers C 0Xwestern transfer buffer緩(huan)沖(chong)液(ye)
無蛋(dan)白(bai)封閉(bi)液(ye) %封閉(bi)試(shi)劑(ji)in XTBS
EZ-Buffers E 0XPBST buffer with Tween緩(huan)沖(chong)液(ye)
關於(yu)加入(ru)甘油(you)保存(cun):有些人(ren)會(hui)加50%的(de)甘(gan)油到(dao)抗體中(zhong)來(lai)避(bi)免反復凍(dong)融,甘(gan)油(you)在(zai)-20 度(du) 會(hui)降低冰點(dian)。這(zhe)對(dui)很多(duo)抗體可能(neng)是(shi)可(ke)行的。但是abcam 僅(jin)對非(fei)常小(xiao)的壹(yi)部(bu)分抗體檢測(ce)過(guo)其(qi)在這(zhe)種條(tiao)件(jian)下(xia)的穩定(ding)性(xing);而abcam 只對(dui)按(an)照(zhao)條件(jian)保存(cun)的抗體提(ti)供質(zhi)量保證(zheng)!加入(ru)甘油(you)的溶液(ye)不建議(yi)在-80 度(du)保存(cun),因為這已經(jing)超過(guo)了(le)甘(gan)油(you)的(de)冰點(dian)。如(ru)果(guo)您要加入(ru)甘油(you)來保存(cun)抗體的話(hua),請(qing)謹(jin)慎註意無菌(jun)操(cao)作(zuo),避(bi)免汙染(ran)!
關於(yu)蛋(dan)白(bai)保護(hu)劑(ji):
蛋(dan)白(bai)在高(gao)濃(nong)度(du)時(shi)更(geng)不容(rong)易(yi)降解( mg/ml 或者更(geng)高(gao)),這(zhe)就是為(wei)什(shen)麽在抗(kang)體中(zhong)加入(ru)BSA 之類(lei)作(zuo)為(wei)穩定(ding)劑(ji)的(de)原因了(le);另(ling)壹(yi)方面(mian),加入(ru)的蛋(dan)白(bai)也可以減(jian)少抗(kang)體由於(yu)管壁吸(xi)附所(suo)造(zao)成的(de)損失。但是如果(guo)抗體要用(yong)來(lai)標(biao)記的話(hua),則(ze)不能(neng)加入(ru)蛋(dan)白(bai)穩定(ding)劑(ji),因(yin)為這些穩定(ding)劑(ji)會(hui)和抗(kang)體壹(yi)起(qi)競爭(zheng)結(jie)合(he)標(biao)記物。
企業(ye)信息
ENTERPRISE INFORMATION上(shang)海谷研(yan)實(shi)業有(you)限公司
3004918891發送(song)信件(jian)產(chan)品(pin)分類(lei)
CLASSIFICATION相(xiang)關文(wen)章(zhang)
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