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A72(膠(jiao)質母(mu)細胞瘤(liu)細胞) 具(ju)體操(cao)作(zuo)
取出(chu)凍(dong)存(cun)管: 根(gen)據(ju)細(xi)胞凍(dong)存(cun)記錄按(an)標簽找到(dao)所(suo)需細胞的編(bian)號(hao)。
從(cong)液(ye)氮(dan)罐(guan)中(zhong)取出(chu)細(xi)胞盒,取(qu)出(chu)所(suo)需的細(xi)胞,同時(shi)核(he)對管外(wai)的編(bian)號(hao)。
初(chu)學(xue)者(zhe)易(yi)犯錯(cuo)誤(wu):水(shui)浴(yu)鍋未(wei)預(yu)熱或者(zhe)未(wei)預(yu)熱到(dao)37℃。
水(shui)浴(yu)鍋內(nei)凍(dong)存(cun)管太多,導(dao)致(zhi)傳(chuan)熱不佳,使(shi)融化(hua)時間延(yan)長(chang)。
離心前忘(wang)記平(ping)衡,導(dao)致(zhi)離心機(ji)損壞和(he)細胞丟失(shi)。
壹(yi)次(ci)復(fu)蘇細(xi)胞過多,忘(wang)記更(geng)換吸頭(tou)和(he)吸管,導(dao)致(zhi)細胞交叉汙(wu)染。
實驗(yan)前準(zhun)備(bei):將水(shui)浴(yu)鍋預(yu)熱至(zhi)37℃
A72(膠(jiao)質母(mu)細胞瘤(liu)細胞) 用75%酒精擦拭(shi)紫外(wai)線(xian)照(zhao)射30min的(de)超(chao)凈(jing)工(gong)作(zuo)臺臺(tai)面。
在超(chao)凈(jing)工(gong)作(zuo)臺中(zhong)按(an)次(ci)序(xu)擺(bai)放(fang)好消(xiao)過毒的(de)離心管、吸(xi)管、培養瓶 等(deng)。
迅(xun)速(su)解(jie)凍(dong):
迅(xun)速(su)將(jiang)凍(dong)存(cun)管投(tou)入到(dao)已(yi)經預(yu)熱的水(shui)浴(yu)鍋中(zhong)迅(xun)速(su)解(jie)凍(dong),並(bing)要(yao)不斷(duan)的搖(yao)動(dong),使(shi)管中(zhong)的液(ye)體迅(xun)速(su)融(rong)化(hua)。
.約(yue)-2min後(hou)
凍(dong)存(cun)管內(nei)液(ye)體*溶(rong)解,取出(chu)用(yong)酒精棉(mian)球(qiu)擦拭(shi)凍(dong)存(cun)管的(de)外壁(bi),再拿(na)入超(chao)凈(jing)臺(tai)內(nei)。
平(ping)衡離心:用架(jia)盤(pan)天平(ping)平(ping)衡後(hou),放(fang)入離心機(ji)中3000r/min 離(li)心3min
制備(bei)細胞懸液(ye):吸(xi)棄上(shang)清(qing)液(ye)。
向(xiang)離(li)心管內(nei)加(jia)入0ml培養液(ye),吹(chui)打(da)制成(cheng)細(xi)胞懸液(ye)。
活(huo)化(hua)與(yu)細胞復蘇 收(shou)到(dao)細(xi)胞株包裹(guo)時, 請檢查(zha)細胞株冷凍(dong)管是(shi)否有解(jie)凍(dong)情(qing)形(xing), 若(ruo)有請立即(ji)通知(zhi)。細胞株請盡速(su)開(kai)始培養, 或(huo)立即(ji)冷凍(dong)保(bao)存(cun)(置(zhi)於–70 °C, 隔(ge)夜後(hou), 移到(dao)liq N2)。
細(xi)胞復蘇的(de)原則(ze)-快速(su)融(rong)化(hua):必須將凍(dong)存(cun)在-96℃液(ye)氮(dan)中(zhong)的(de)細胞快速(su)融(rong)化(hua)至(zhi)37℃,使(shi)細胞外凍(dong)存(cun)時的冰(bing)晶(jing)迅(xun)速(su)融(rong)化(hua),避免冰晶(jing)緩慢(man)融(rong)化(hua)時進入細胞形成(cheng)再結晶(jing),對細胞造成(cheng)損害。
細(xi)胞計數(shu):細(xi)胞濃度(du)以(yi)5×05/ml為(wei)宜。
培養細(xi)胞將復(fu)合細(xi)胞計數(shu)要(yao)求的(de)細(xi)胞懸液(ye)分(fen)裝(zhuang)入培養瓶內(nei),將培養瓶放(fang)入37℃和(he)5%CO2的(de)培養箱(xiang)內(nei)2-4小(xiao)時(或(huo)者24-48小(xiao)時)後(hou)換(huan)液(ye)繼續(xu)培養培養,換(huan)液(ye)的(de)時(shi)間由細胞情況(kuang)而(er)定。
公司(si)其他(ta)銷量大產(chan)品(pin)信息:每 00ml 培養基(ji)中添加(jia) 支 70
606 假單胞菌分(fen)離瓊(qiong)脂 50g/瓶 用(yong)於(yu)假單胞菌的(de)檢(jian)驗(yan)
607 NAC 瓊(qiong)脂培養基(ji) 50g/瓶 用(yong)於(yu)銅(tong)綠(lv)假單胞菌的(de)分(fen)離培養
608 洋(yang)蔥假單胞菌瓊(qiong)脂基(ji)礎(PC)Pseudomonas Cepacia Agar Base 50g/瓶 用(yong)於(yu)洋(yang)蔥(cong)假單胞菌的(de)分(fen)離,每升培 養基(ji)中添加(jia)過(guo)濾(lv)除(chu)菌的(de) 羥基(ji)噻吩(fen) 青(qing)黴(mei)溶液(ye)素(su)(00mg)和(he)多粘菌素(su) B 溶(rong)液(ye)(300,000units)
609
60
6 含(han) 0.6%酵母(mu)浸膏的(de)胰(yi)酪腖大豆(dou)肉(rou)湯(TSB-YE) 50g/瓶 用(yong)於(yu)李(li)斯特氏菌的(de)培養
63 含(han) 0.6%酵母(mu)浸膏的(de)胰(yi)酪腖大豆(dou)瓊(qiong)脂(TSA-YE) 50g/瓶 用(yong)於(yu)李(li)斯特氏菌純化(hua)
64 李(li)氏(shi)增菌肉(rou)湯(LB,LB)基(ji)礎 50g/瓶 用(yong)於(yu)李(li)斯特氏菌增(zeng)菌,每 5ml 培養 基(ji)中添加(jia) 支 40 和(he) 支 40 組成(cheng) LB,每 00ml 培養基(ji)中添加(jia) 支 46 和(he) 支 47 組成(cheng) LB
65 PALCAM 瓊(qiong)脂基(ji)礎 50g/瓶 用(yong) 於(yu) 李(li) 斯 特 氏 菌 選(xuan) 擇(ze) 性(xing) 分(fen) 離 , 每00ml 培養基(ji)中添加(jia) 支 403
66 Fraser 肉(rou)湯增(zeng)菌液(ye)基(ji)礎 フレーザー増(増)菌ブイヨン基(ji)礎 Fraser Enrichment Broth Base 50g/瓶 用(yong)於(yu)李(li)斯特氏菌增(zeng)菌,每 5ml 培養基(ji)中添加(jia) 407、408、48 各(ge) 支組成(cheng) Half-Fraser,每 00ml 添加(jia) 套支 49、40 組成(cheng) Fraser
67 牛津(jin)瓊(qiong)脂(OXA)基(ji)礎 50g/瓶 用(yong) 於(yu) 李(li) 斯 特 氏 菌 選(xuan) 擇(ze) 性(xing) 分(fen) 離 , 每00ml 培養基(ji)中添加(jia) 支 409
68 EB 肉(rou)湯增(zeng)菌液(ye)基(ji)礎 50g/瓶 用(yong)於(yu)李(li)斯特氏菌的(de)選(xuan)擇(ze)性(xing)增(zeng)菌,每5ml 培養基(ji)中添加(jia) 支 40
企業(ye)信息
ENTERPRISE INFORMATION上(shang)海(hai)谷研實業(ye)有限(xian)公司(si)
3004918891發(fa)送信件產(chan)品(pin)分(fen)類
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