【概要(yao)描(miao)述(shu)】人子(zi)宮(gong)平滑(hua)肌細(xi)胞公司正(zheng)在出售的產(chan)品：UM-UC-3人(ren)膀(pang)胱(guang)移行細(xi)胞癌人(ren)非小細(xi)胞肺癌細(xi)胞NCI-H2228(STR鑒(jian)定(ding)正確(que))人(ren)大(da)腦(nao)內皮細(xi)胞HBEC-5i(STR鑒(jian)定(ding)正確(que))人(ren)肝(gan)母細(xi)胞瘤細(xi)胞HuH-6(STR鑒(jian)定(ding)正確(que))人(ren)乳(ru)腺上皮細(xi)胞HMEC小鼠骨(gu)髓瘤(liu)細(xi)胞SP2/0（種(zhong)屬(shu)鑒(jian)定(ding)）人乳(ru)腺(xian)癌細(xi)胞帶熒光(guang)酶MCF-7+luc (STR鑒(jian)定(ding)正確(que))人(ren)急性單核(he)細(xi)胞白血病(bing)細(xi)胞MonoMac6(STR鑒(jian)定(ding)正確(que))人(ren)口(kou)腔(qiang)鱗(lin)癌細(xi)胞

人(ren)子(zi)宮(gong)平滑(hua)肌分(fen)離(li)自(zi)子(zi)宮(gong)組織；子(zi)宮(gong)是孕育(yu)胎兒(er)的器官(guan)，位(wei)於盆腔(qiang)中部，膀胱(guang)與(yu)直(zhi)腸(chang)之(zhi)間(jian)，其位(wei)置(zhi)可隨(sui)膀(pang)胱(guang)與(yu)直(zhi)腸(chang)的(de)充盈(ying)程度(du)或(huo)體位(wei)而有(you)變(bian)化(hua)。子(zi)宮(gong)的(de)正(zheng)常位(wei)置(zhi)主要(yao)依靠子(zi)宮(gong)諸(zhu)韌帶、盆膈、尿生(sheng)殖(zhi)膈及會(hui)陰(yin)中心(xin)腱(jian)等(deng)結(jie)構(gou)維(wei)持(chi)，這(zhe)些結(jie)構(gou)受(shou)損或松弛時(shi)，可以(yi)引起子(zi)宮(gong)脫(tuo)垂(chui)。子(zi)宮(gong)肌(ji)層(ceng)比(bi)較(jiao)厚(hou)，由(you)成束或成(cheng)片(pian)的平滑(hua)肌組成，肌束間(jian)以(yi)結(jie)締(di)組織分(fen)隔。子(zi)宮(gong)平滑(hua)肌具(ju)有(you)收(shou)縮(suo)功能(neng)，收(shou)縮(suo)受(shou)激素(su)的(de)調節(jie)，其(qi)收(shou)縮(suo)活動(dong)有(you)助於精(jing)子(zi)向(xiang)輸(shu)卵管(guan)運(yun)送、經血排(pai)出(chu)以(yi)及胎(tai)兒娩出(chu)。子(zi)宮(gong)平滑(hua)肌層(ceng)含(han)有(you)大(da)量的(de)血管(guan)，如果(guo)平滑(hua)肌層(ceng)細(xi)胞過(guo)度(du)生(sheng)長，勢必造(zao)成血管(guan)壁的(de)增厚(hou)，管(guan)腔(qiang)堵(du)塞(sai)，體外(wai)培養平滑(hua)肌細(xi)胞有(you)利(li)於(yu)研(yan)究子(zi)宮(gong)和(he)其他富含血管(guan)器官(guan)的(de)血管(guan)形成(cheng)機(ji)制。子(zi)宮(gong)平滑(hua)肌細(xi)胞原代(dai)分(fen)離(li)培(pei)養3天(tian)後(hou)，可見(jian)細(xi)胞貼壁伸(shen)展，細(xi)胞形態大(da)小不(bu)壹，呈梭(suo)形(xing)、不(bu)規則(ze)形、三(san)角形或扇(shan)形(xing)，核(he)卵(luan)圓(yuan)形(xing)、居(ju)中；2周後(hou)細(xi)胞匯合(he)，多數(shu)細(xi)胞伸展呈長梭(suo)形(xing)，胞漿豐富(fu)，有(you)分(fen)枝狀突(tu)起，細(xi)胞平行排列成(cheng)單層或(huo)部(bu)分(fen)區(qu)域多層重(zhong)疊生(sheng)長，高低起伏；細(xi)胞密度(du)低時，常交(jiao)織成(cheng)網狀；密度(du)高(gao)時(shi)，則(ze)排列(lie)為旋渦狀或柵(zha)欄狀。傳代(dai)後(hou)細(xi)胞生長較(jiao)快(kuai)，4-6天即(ji)可匯(hui)合(he)，並(bing)保持(chi)上述(shu)形態(tai)學特征(zheng)和(he)生長特點。子(zi)宮(gong)平滑(hua)肌細(xi)胞的主要(yao)功能(neng)：①子(zi)宮(gong)平滑(hua)肌能(neng)保持(chi)子(zi)宮(gong)的(de)基(ji)本形態(tai)，在孕期(qi)能(neng)的擴(kuo)張(zhang)子(zi)宮(gong)容(rong)積(ji)，保證胎兒(er)孕(yun)育(yu)環(huan)境；②平滑(hua)肌細(xi)胞有(you)收(shou)縮(suo)舒張(zhang)能(neng)力，在生產(chan)時(shi)能形成(cheng)生理性的(de)縮(suo)腹(fu)環(huan)，推(tui)動胎兒向(xiang)下(xia)移動，輔(fu)助生產。
方(fang)法(fa)簡(jian)介：

公司實(shi)驗(yan)室分(fen)離(li)的(de)人(ren)子(zi)宮(gong)平滑(hua)肌采(cai)用yi蛋(dan)白酶(mei)-膠原酶聯(lian)合(he)消化(hua)法(fa)結(jie)合(he)組織貼(tie)塊(kuai)法(fa)制(zhi)備而來(lai)，細(xi)胞總(zong)量約(yue)為(wei)5×10?cells/瓶。
質量檢(jian)測(ce)：

公司實(shi)驗(yan)室分(fen)離(li)的(de)人(ren)子(zi)宮(gong)平滑(hua)肌經α-SMA免疫熒(ying)光(guang)鑒(jian)定(ding)，純度(du)可達(da)90%以(yi)上，且不(bu)含有(you)HIV-1、HBV、HCV、支(zhi)原體、細(xi)菌、酵(jiao)母和(he)真菌等(deng)。

本公司所有(you)產(chan)品(pin)僅(jin)供(gong)科學實(shi)驗(yan)，不(bu)做其他(ta)科學實(shi)驗(yan)外(wai)的使用！

培(pei)養基(ji) 含(han)FBS、生(sheng)長添加(jia)劑、Penicillin、Streptomycin等(deng)

換(huan)液(ye)頻率 每2-3天(tian)換(huan)液(ye)壹次

生(sheng)長特性 貼(tie)壁(bi)

細(xi)胞形態 成(cheng)纖(xian)維細(xi)胞樣(yang)

傳(chuan)代(dai)特性 可傳(chuan)5代(dai)左右(you)；3代(dai)以(yi)內狀態

消(xiao)化(hua)液(ye) 0.25%yi蛋(dan)白酶(mei)

培(pei)養條(tiao)件(jian) 氣(qi)相(xiang)：空氣(qi)，95%；CO2，5%

準(zhun)備(bei)工(gong)作(zuo)

1. 實(shi)驗(yan)器材(cai)準備(bei)：準備(bei)無菌的(de)培(pei)養皿(min)、培(pei)養瓶(ping)、移(yi)液(ye)管(guan)、離(li)心(xin)管(guan)、手術(shu)器械(xie)等(deng)，並(bing)進行高壓滅(mie)菌(jun)或其他(ta)合(he)適的消(xiao)毒處理。

2. 試劑準(zhun)備(bei)：配(pei)制或(huo)購(gou)買(mai)合(he)適的培(pei)養基(ji)、消(xiao)化(hua)酶(mei)（如(ru)、膠原酶等）、胎(tai)牛(niu)血清(qing)、雙(shuang)抗(kang)等(deng)試劑，確(que)保其無菌且(qie)在有(you)效(xiao)期(qi)內。

3. 實(shi)驗(yan)動(dong)物或組織來(lai)源準(zhun)備(bei)：根(gen)據實驗(yan)需(xu)求，選(xuan)擇(ze)合(he)適的動(dong)物並(bing)進行相(xiang)應(ying)的(de)麻醉或(huo)處死，獲(huo)取所需(xu)組織；或(huo)從已(yi)有(you)的(de)組織樣(yang)本庫中獲(huo)取組織。

取材(cai)與(yu)處理

1. 取材(cai)：在無菌條(tiao)件(jian)下(xia)，迅速取出(chu)目(mu)標(biao)組織，盡量減(jian)少(shao)對組織的(de)損傷(shang)，並(bing)去(qu)除(chu)多余的(de)脂(zhi)肪(fang)、結(jie)締(di)組織等(deng)非目(mu)的組織。

2. 清(qing)洗(xi)：將取出(chu)的(de)組織用預(yu)冷(leng)的(de)無菌PBS沖(chong)洗(xi)數(shu)次(ci)，以(yi)去除(chu)血液(ye)和(he)雜質。

3. 剪切(qie)：將組織剪成(cheng)約(yue)1 - 2mm³的小塊(kuai)，以(yi)便後(hou)續消化(hua)。

細(xi)胞分(fen)離(li)

1. 消(xiao)化(hua)：將剪碎(sui)的(de)組織塊(kuai)放(fang)入含(han)有(you)適(shi)量消(xiao)化(hua)酶(mei)的(de)離(li)心(xin)管(guan)中，在37℃恒溫搖(yao)床或培(pei)養箱中消化(hua)壹段時間(jian)。期(qi)間(jian)可輕輕搖晃離(li)心(xin)管(guan)，使消化(hua)更均(jun)勻。

2. 終(zhong)止消化(hua)：當組織塊(kuai)大(da)部(bu)分(fen)被(bei)消(xiao)化(hua)成(cheng)單細(xi)胞懸液或(huo)小細(xi)胞團時，加(jia)入含(han)血清(qing)的(de)培養基(ji)終(zhong)止消化(hua)。

3. 過(guo)濾(lv)與(yu)離(li)心(xin)：用細(xi)胞篩過(guo)濾(lv)細(xi)胞懸液，去(qu)除未消化(hua)的(de)組織碎(sui)片(pian)，然(ran)後(hou)將濾(lv)液(ye)以(yi)適當的(de)轉速離(li)心(xin)，收(shou)集細(xi)胞沈澱。

細(xi)胞觀察與(yu)檢(jian)測(ce)

1. 日常觀(guan)察(cha)：每天(tian)用倒(dao)置(zhi)顯微鏡觀察(cha)細(xi)胞的形態(tai)、生長狀態、密度(du)等(deng)，記(ji)錄(lu)細(xi)胞的變化(hua)情(qing)況，如(ru)發(fa)現細(xi)胞汙染(ran)或(huo)異(yi)常，及(ji)時(shi)采取相(xiang)應(ying)措(cuo)施(shi)。
2. 細(xi)胞計(ji)數(shu)與(yu)活(huo)力(li)檢(jian)測(ce)：在需(xu)要(yao)時，可采(cai)用臺盼(pan)藍(lan)染(ran)色(se)等方(fang)法(fa)對(dui)細(xi)胞進行計(ji)數(shu)和(he)活力檢(jian)測(ce)，以(yi)了(le)解(jie)細(xi)胞的生長情(qing)況和(he)健康(kang)狀態。

壹、取材(cai)與(yu)分(fen)離(li)

1. 快(kuai)速操(cao)作(zuo)

- 組織取材(cai)後(hou)需(xu)立(li)即處理，避免長時間(jian)暴露於(yu)室溫或(huo)非(fei)營(ying)養環(huan)境。

- 使用無菌 PBS 或(huo)生(sheng)理鹽(yan)水(shui)沖洗組織，去(qu)除血液(ye)、雜質。

2. 消(xiao)化(hua)酶(mei)選(xuan)擇(ze)

- 根(gen)據組織類型選(xuan)擇(ze)消(xiao)化(hua)酶(mei)，避(bi)免過(guo)度(du)消(xiao)化(hua)導致(zhi)細(xi)胞損傷。

- 消(xiao)化(hua)時(shi)間(jian)需(xu)嚴(yan)格(ge)控(kong)制（通常 10-30 分(fen)鐘(zhong)），可通(tong)過(guo)顯微鏡觀察(cha)細(xi)胞解(jie)離(li)狀態。

二(er)、培(pei)養條(tiao)件(jian)優化(hua)

1. 培(pei)養基(ji)選(xuan)擇(ze)

- 使用含(han)血清(qing)或(huo)特定(ding)生長因子(zi)的(de)培(pei)養基(ji)（如(ru) DMEM、RPMI 1640 等），部(bu)分(fen)細(xi)胞需(xu)添加(jia)胰(yi)島(dao)素(su)、EGF 等(deng)。

- 避(bi)免頻繁更換(huan)培(pei)養基(ji)品(pin)牌(pai)或批(pi)次(ci)，減少(shao)細(xi)胞適應壓(ya)力。

2. 貼(tie)壁(bi)與(yu)傳(chuan)代(dai)

- 原代(dai)細(xi)胞貼壁能(neng)力較(jiao)弱，可能(neng)需(xu)要(yao)包被(bei)培養皿(min)（如(ru)膠原蛋(dan)白、多(duo)聚(ju)賴氨(an)酸(suan)）。

- 傳(chuan)代(dai)時密度(du)建(jian)議控(kong)制(zhi)在 70%-80%，過(guo)度(du)匯(hui)合(he)會導致(zhi)接觸(chu)抑(yi)制(zhi)和(he)分(fen)化(hua)。

三(san)、汙染(ran)控(kong)制

1. 無菌操(cao)作(zuo)

- 全(quan)程在超凈(jing)臺操(cao)作(zuo)，使用壹次性耗材，避(bi)免交(jiao)叉汙染(ran)。

- 培(pei)養基(ji)中可添(tian)加(jia)雙抗(kang)，但(dan)長期(qi)使用可能(neng)影(ying)響(xiang)細(xi)胞活性。

2. 支(zhi)原體檢(jian)測(ce)

- 定(ding)期(qi)檢(jian)測(ce)支(zhi)原體汙染(ran)（如(ru) PCR 法(fa)），汙染(ran)後(hou)需(xu)及時(shi)丟(diu)棄(qi)細(xi)胞。

四、狀態監(jian)控

1. 日常觀(guan)察(cha)

- 每天(tian)檢(jian)查細(xi)胞形態、密度(du)及(ji)培(pei)養基(ji)顏(yan)色(se)，及時更換(huan)培(pei)養基(ji)（通(tong)常每 2-3 天(tian)換(huan)液(ye)壹次）。

- 異(yi)常形(xing)態(tai)（如細(xi)胞變圓、碎(sui)片(pian)增多(duo)）可能(neng)提(ti)示汙染(ran)或(huo)營(ying)養不(bu)足。

2. 傳(chuan)代(dai)與(yu)凍(dong)存

- 原代(dai)細(xi)胞分(fen)裂(lie)次(ci)數(shu)有(you)限(xian)（壹般 5-10 代(dai)），需(xu)及時(shi)凍(dong)存早(zao)期(qi)代(dai)次細(xi)胞。

- 凍(dong)存液建(jian)議使用 DMSO+血清(qing)（或(huo)專(zhuan)用凍(dong)存培養基(ji)），梯度(du)降溫後(hou)液(ye)氮(dan)保存。