【概(gai)要(yao)描述(shu)】人(ren)胎盤絨毛膜(mo)細(xi)胞(bao)公司正(zheng)在(zai)出售(shou)的產品：U-937 人(ren)淋巴(ba)瘤(liu)細(xi)胞(bao)人(ren)結(jie)腸(chang)癌細(xi)胞(bao)SW620 (STR鑒(jian)定正(zheng)確(que))人(ren)胰腺(xian)導管癌細(xi)胞(bao)CFPAC-1(STR鑒(jian)定正(zheng)確(que))小(xiao)鼠肝(gan)癌(ai)帶熒(ying)光(guang)酶 H22+LUC人(ren)乳腺(xian)癌細(xi)胞(bao)JIMT-1(STR鑒(jian)定正(zheng)確(que))人(ren)乳腺(xian)癌細(xi)胞(bao)SUM159PT(STR鑒(jian)定正(zheng)確(que))小(xiao)鼠腦(nao)神(shen)經瘤細(xi)胞(bao)帶熒(ying)光(guang)酶Neuro-2a+LUC(種(zhong)屬(shu)鑒(jian)定)人(ren)甲(jia)狀(zhuang)腺癌(ai)細(xi)胞(bao)ARO(STR鑒(jian)定正(zheng)確(que))人(ren)食(shi)管腺癌(ai) OE-33(STR鑒(jian)

人(ren)胎盤絨毛膜(mo)分離自(zi)胎盤組織；胎盤（placenta）是哺(bu)乳(ru)動(dong)物(wu)妊(ren)娠(shen)期(qi)間由(you)胚(pei)胎的胚(pei)膜(mo)和(he)母體(ti)子(zi)宮(gong)內膜(mo)聯(lian)合長成(cheng)的(de)母(mu)子(zi)間交(jiao)換物(wu)質的過渡(du)性(xing)器(qi)官(guan)，由羊膜(mo)、葉狀(zhuang)絨毛膜(mo)和(he)底蛻(tui)膜(mo)構成(cheng)。胎(tai)兒在(zai)子(zi)宮(gong)中發(fa)育，依(yi)靠(kao)胎盤從母體(ti)取得(de)營(ying)養(yang)，而(er)雙方保(bao)持(chi)相當(dang)的(de)獨立性(xing)。胎(tai)盤還(hai)產生多種(zhong)維持(chi)妊(ren)娠(shen)的(de)激素，是壹(yi)個(ge)重要(yao)的(de)內(nei)分(fen)泌(mi)器(qi)官(guan)。有(you)些(xie)爬行(xing)類和(he)魚(yu)類(lei)也(ye)以胎(tai)生方式(shi)繁(fan)殖(zhi)後代(dai)，胚(pei)胎生長出壹(yi)些輔助結(jie)構(gou)如(ru)卵(luan)黃囊、鰓絲(si)等與母體(ti)組織緊密(mi)結(jie)合，以達(da)到(dao)母(mu)子(zi)間物(wu)質的交(jiao)換，這樣的結(jie)構(gou)稱假胎盤。絨毛膜(mo)是由滋養(yang)層和(he)胚(pei)外中胚(pei)層的壁(bi)層構成(cheng)。胚(pei)泡植入子(zi)宮(gong)內膜(mo)後，在(zai)胚(pei)泡表(biao)面形成(cheng)許(xu)多絨(rong)毛樣的突起，以細(xi)胞(bao)滋養(yang)層為(wei)中(zhong)軸，外裹(guo)合體(ti)滋養(yang)層，稱初(chu)級(ji)幹絨毛。胚(pei)外中胚(pei)層長入(ru)初級(ji)幹絨毛的(de)中軸(zhou)，使(shi)初(chu)級(ji)幹絨毛變成(cheng)了(le)次級(ji)幹絨毛。當(dang)絨(rong)毛膜(mo)的胚(pei)外中胚(pei)層內形成(cheng)血管網(wang)和(he)結(jie)締(di)組織，並與胚(pei)體(ti)內的(de)血管相通時(shi)，次級(ji)幹絨毛改稱三(san)級(ji)幹絨毛。三(san)級(ji)幹絨毛末(mo)端(duan)的(de)細(xi)胞(bao)滋養(yang)層細(xi)胞(bao)形成(cheng)細(xi)胞(bao)滋養(yang)層殼(ke)。隨(sui)著(zhe)胚(pei)胎發育，叢密(mi)絨(rong)毛膜(mo)與基蛻(tui)膜(mo)共同構成(cheng)了(le)胎(tai)盤，而(er)平(ping)滑(hua)絨毛膜(mo)則和(he)包(bao)蛻(tui)膜(mo)壹(yi)起逐(zhu)漸與壁蛻(tui)膜(mo)融合。
方法(fa)簡(jian)介：

公司(si)實(shi)驗(yan)室(shi)分(fen)離的(de)人(ren)胎盤絨毛膜(mo)采用(yong)yi蛋白酶-DNA酶聯(lian)合消化法結(jie)合密(mi)度(du)梯(ti)度(du)離心(xin)法(fa)制備而(er)來，細(xi)胞(bao)總量(liang)約為(wei)5×10?cells/瓶(ping)。
質量(liang)檢測：

公司(si)實(shi)驗(yan)室(shi)分(fen)離的(de)人(ren)胎盤絨毛膜(mo)經hCG免疫(yi)熒光鑒(jian)定，純(chun)度(du)可(ke)達(da)90%以上，且(qie)不(bu)含有(you)HIV-1、HBV、HCV、支(zhi)原體(ti)、細(xi)菌、酵母(mu)和(he)真菌等。

本公(gong)司所有(you)產品僅供科(ke)學實(shi)驗(yan)，不(bu)做(zuo)其他科(ke)學實(shi)驗(yan)外的使用(yong)！

包(bao)被(bei)條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yang)基 含FBS、生長添(tian)加劑(ji)、Penicillin、Streptomycin等

換液(ye)頻率 每(mei)2-3天換(huan)液(ye)壹(yi)次

生長特(te)性 貼(tie)壁

細(xi)胞(bao)形態 梭形、多角(jiao)形

傳(chuan)代特(te)性 可(ke)傳(chuan)3代左(zuo)右(you)

消化液(ye) 0.25%yi蛋白酶

培養(yang)條件 氣(qi)相：空(kong)氣(qi)，95%；CO2，5%

準(zhun)備工(gong)作

1. 實驗(yan)器(qi)材(cai)準(zhun)備：準(zhun)備無(wu)菌的培養(yang)皿、培養(yang)瓶(ping)、移(yi)液(ye)管、離心(xin)管、手術(shu)器(qi)械(xie)等，並進(jin)行(xing)高壓(ya)滅菌或其他合適(shi)的消毒處(chu)理(li)。

2. 試劑(ji)準(zhun)備：配制或購買(mai)合適(shi)的培養(yang)基、消化酶（如(ru)、膠原(yuan)酶等(deng)）、胎(tai)牛血清(qing)、雙抗(kang)等試劑(ji)，確保(bao)其無菌且在(zai)有(you)效(xiao)期(qi)內。

3. 實驗(yan)動(dong)物(wu)或組(zu)織來源準(zhun)備：根(gen)據(ju)實驗(yan)需(xu)求，選擇合適(shi)的動(dong)物(wu)並進(jin)行(xing)相應(ying)的(de)麻(ma)醉或處(chu)死，獲(huo)取(qu)所(suo)需(xu)組織；或從已有(you)的(de)組織樣本庫(ku)中獲(huo)取(qu)組(zu)織。

取材(cai)與處(chu)理(li)

1. 取材(cai)：在(zai)無(wu)菌條件下，迅速取(qu)出目標(biao)組(zu)織，盡(jin)量(liang)減少對組(zu)織的損傷(shang)，並去(qu)除(chu)多余的(de)脂(zhi)肪(fang)、結(jie)締(di)組織等非目(mu)的(de)組織。

2. 清(qing)洗(xi)：將取出的組(zu)織用(yong)預冷(leng)的無(wu)菌PBS沖洗(xi)數次，以去(qu)除(chu)血液(ye)和(he)雜質。

3. 剪切(qie)：將組織剪成(cheng)約(yue)1 - 2mm³的(de)小(xiao)塊(kuai)，以便後續(xu)消化。

細(xi)胞(bao)分離

1. 消化：將剪碎的組(zu)織塊(kuai)放入(ru)含有(you)適(shi)量(liang)消化酶的(de)離心(xin)管中，在(zai)37℃恒(heng)溫(wen)搖床或培養(yang)箱中消化壹(yi)段時(shi)間(jian)。期(qi)間可(ke)輕輕搖晃離心(xin)管，使消化更(geng)均(jun)勻。

2. 終(zhong)止消化：當(dang)組(zu)織塊(kuai)大部(bu)分(fen)被(bei)消化成(cheng)單(dan)細(xi)胞(bao)懸液(ye)或小(xiao)細(xi)胞(bao)團時(shi)，加入含(han)血清(qing)的培養(yang)基終(zhong)止消化。

3. 過濾與離心(xin)：用(yong)細(xi)胞(bao)篩(shai)過濾細(xi)胞(bao)懸液(ye)，去除(chu)未消化的組(zu)織碎片，然後將濾液(ye)以適(shi)當(dang)的(de)轉速離心(xin)，收集細(xi)胞(bao)沈澱。

細(xi)胞(bao)觀察(cha)與檢測

1. 日(ri)常觀(guan)察(cha)：每(mei)天用(yong)倒(dao)置顯微鏡觀察(cha)細(xi)胞(bao)的形態、生長狀(zhuang)態、密(mi)度(du)等(deng)，記錄(lu)細(xi)胞(bao)的變化情況(kuang)，如(ru)發(fa)現(xian)細(xi)胞(bao)汙染或(huo)異常，及時(shi)采(cai)取相(xiang)應(ying)措施。
2. 細(xi)胞(bao)計數與活(huo)力檢測：在(zai)需(xu)要(yao)時(shi)，可(ke)采用(yong)臺盼藍(lan)染色(se)等方法(fa)對細(xi)胞(bao)進(jin)行(xing)計數和(he)活(huo)力檢測，以了(le)解(jie)細(xi)胞(bao)的生長情(qing)況(kuang)和(he)健康(kang)狀(zhuang)態。

壹(yi)、取材(cai)與分離

1. 快(kuai)速(su)操作

- 組織取材(cai)後需(xu)立即(ji)處(chu)理(li)，避(bi)免(mian)長時(shi)間(jian)暴露(lu)於室(shi)溫(wen)或非營(ying)養(yang)環(huan)境(jing)。

- 使用(yong)無菌 PBS 或生理(li)鹽(yan)水沖洗(xi)組織，去除(chu)血液(ye)、雜質。

2. 消化酶選擇

- 根(gen)據(ju)組織類型(xing)選擇消化酶，避(bi)免(mian)過度消化導致細(xi)胞(bao)損傷(shang)。

- 消化時(shi)間(jian)需(xu)嚴格(ge)控制（通常(chang) 10-30 分(fen)鐘），可(ke)通過顯微鏡觀察(cha)細(xi)胞(bao)解(jie)離狀(zhuang)態。

二、培養(yang)條件優(you)化

1. 培養(yang)基選擇

- 使用(yong)含血清(qing)或特(te)定生長因(yin)子(zi)的培養(yang)基（如 DMEM、RPMI 1640 等），部(bu)分(fen)細(xi)胞(bao)需(xu)添加胰島素、EGF 等。

- 避免(mian)頻繁(fan)更(geng)換培養(yang)基品牌(pai)或(huo)批次，減少細(xi)胞(bao)適(shi)應壓(ya)力。

2. 貼(tie)壁與傳(chuan)代

- 原代(dai)細(xi)胞(bao)貼(tie)壁能(neng)力較(jiao)弱，可(ke)能(neng)需(xu)要(yao)包(bao)被(bei)培養(yang)皿（如膠原(yuan)蛋(dan)白、多聚賴氨(an)酸）。

- 傳(chuan)代時(shi)密(mi)度(du)建議(yi)控制在(zai) 70%-80%，過度匯合會導致接(jie)觸抑(yi)制和(he)分化。

三、汙染控制

1. 無菌操作

- 全(quan)程(cheng)在(zai)超(chao)凈(jing)臺操作，使(shi)用(yong)壹(yi)次性耗(hao)材(cai)，避(bi)免交(jiao)叉汙染。

- 培養(yang)基中可(ke)添加雙抗(kang)，但(dan)長期(qi)使用(yong)可(ke)能(neng)影(ying)響(xiang)細(xi)胞(bao)活(huo)性(xing)。

2. 支原(yuan)體(ti)檢測

- 定期(qi)檢測支(zhi)原體(ti)汙染（如(ru) PCR 法(fa)），汙染後需(xu)及時(shi)丟(diu)棄細(xi)胞(bao)。

四、狀(zhuang)態監控

1. 日(ri)常觀(guan)察(cha)

- 每(mei)天檢查(zha)細(xi)胞(bao)形態、密(mi)度(du)及培養(yang)基顏色(se)，及時(shi)更(geng)換培養(yang)基（通常(chang)每(mei) 2-3 天換(huan)液(ye)壹(yi)次）。

- 異常形態（如(ru)細(xi)胞(bao)變圓、碎片增多）可(ke)能(neng)提(ti)示汙染或(huo)營(ying)養(yang)不(bu)足。

2. 傳(chuan)代與凍存(cun)

- 原代(dai)細(xi)胞(bao)分裂次數有(you)限(xian)（壹(yi)般(ban) 5-10 代），需(xu)及時(shi)凍(dong)存早期(qi)代次細(xi)胞(bao)。

- 凍存(cun)液(ye)建議(yi)使(shi)用(yong) DMSO+血清(qing)（或專(zhuan)用(yong)凍存培養(yang)基），梯度降溫(wen)後液(ye)氮保(bao)存(cun)。