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熒(ying)光素標記(ji)血管內皮生(sheng)長(chang)因(yin)子受體2抗體IgG樣本的(de)物(wu)種(zhong) 應選(xuan)擇(ze)物(wu)種(zhong)相同或(huo)有(you)交叉(cha)反應的(de)抗體(ti),抗(kang)體(ti)可能與(yu)不同物(wu)種(zhong)的(de)同種靶(ba)蛋白有交叉(cha)反應,因(yin)其氨基(ji)酸(suan)序(xu)列(lie)同源(yuan)性(xing)較(jiao)高(gao),如(ru)果樣本的(de)種類(lei)未(wei)列(lie)入(ru)抗體(ti)說(shuo)明書(shu)上(shang)的(de)交叉(cha)反應種(zhong)屬(shu)表(biao)中,並(bing)不(bu)意味著該抗體(ti)不(bu)適(shi)用(yong)於檢(jian)測該物(wu)種(zhong)的(de)蛋白(bai),而(er)只(zhi)是表示(shi)該物(wu)種(zhong)尚未(wei)用(yong)此抗(kang)體檢測驗(yan)證過,應通(tong)過序(xu)列(lie)比(bi)對(dui)的(de)方法(fa)來預(yu)測交叉(cha)反應,可應用(yong)Expasy 和 NCBI BLAST 來進(jin)行(xing)不同物(wu)種(zhong)蛋白同源(yuan)性(xing)比(bi)對(dui)。
熒(ying)光素標記(ji)血管內皮生(sheng)長(chang)因(yin)子受體2抗體IgG壹抗(kang)宿(xiu)主(zhu)物(wu)種(zhong)的(de)選(xuan)擇(ze)壹般說(shuo)來,在(zai)使(shi)用(yong)偶(ou)聯(lian)二抗結(jie)合(he)無(wu)偶(ou)聯(lian)物(wu)的(de)壹抗(kang)時(shi),壹抗(kang)宿(xiu)主(zhu)動物(wu)的(de)物(wu)種(zhong)選(xuan)擇(ze)較(jiao)為(wei)重(zhong)要(yao),對(dui)於(yu)免(mian)疫(yi)組(zu)化(hua)而(er)言,盡可能選(xuan)擇(ze)與(yu)樣本不同種系(xi)物(wu)種(zhong)的(de)壹抗(kang),從(cong)而避免(mian)二抗與(yu)樣本內源(yuan)性(xing)免(mian)疫(yi)球蛋(dan)白(bai)產生(sheng)交叉(cha)反應,例如(ru):檢測(ce)小鼠樣本蛋白(bai),則(ze)不應選(xuan)擇(ze)小鼠或(huo)大(da)鼠源(yuan)的(de)壹抗(kang),選(xuan)兔(tu)源(yuan)的(de)壹抗(kang),則(ze)二抗則(ze)可選(xuan)擇(ze)偶(ou)聯(lian)了(le)檢(jian)測(ce)分子(酶、熒光素、等)的(de)抗兔(tu)IgG。如(ru)果選(xuan)擇(ze)有(you)偶(ou)聯(lian)物(wu)的(de)壹抗(kang)則(ze)不適(shi)用(yong)上(shang)述(shu)情況(kuang),除(chu)免(mian)疫(yi)組(zu)化(hua)外(wai)的(de)其它對(dui)不(bu)含內源(yuan)性(xing)免(mian)疫(yi)球蛋(dan)白(bai)樣本的(de)檢測(ce)方法(fa),則抗(kang)體(ti)宿(xiu)主(zhu)物(wu)種(zhong)的(de)影響(xiang)不(bu)大(da),如(ru)對(dui)不(bu)含IgG 的(de)細胞(bao)裂(lie)解物(wu)樣本的(de)western blotting檢測(ce),盡(jin)管(guan)如(ru)此,含有血清的(de)組(zu)織裂(lie)解物(wu)和(he)組(zu)織培(pei)養(yang)上(shang)清中含有免(mian)疫(yi)球蛋(dan)白(bai),還原變性樣本中含IgG,在(zai)western blot 檢(jian)測中則(ze)結(jie)合(he)出現(xian)IgG 分子50 and 25 kDa 的(de)重(zhong)鏈(lian)和輕(qing)鏈(lian)條帶。二抗的(de)選(xuan)擇(ze) 二抗應選(xuan)用(yong)與使(shi)用(yong)的(de)壹抗(kang)相同的(de)物(wu)種(zhong)來源(yuan),例如(ru):如(ru)果妳(ni)的(de)壹抗(kang)是小鼠的(de)單(dan)克隆(long)抗(kang)體,二抗則(ze)選(xuan)抗(kang)小鼠的(de)二抗anti-mouse secondary。建(jian)議檢查(zha)二抗說(shuo)明書(shu)確(que)保該抗體(ti)適(shi)用(yong)於妳(ni)的(de)檢測(ce)應用(yong), 二抗壹般連接熒(ying)光素FITC 或(huo)發光團。
上(shang)海谷(gu)研(yan)生(sheng)物(wu)科技有限(xian)公司特殊(shu)抗(kang)體(ti)的(de)保存(cun)條(tiao)件(jian):. 酶聯(lian)抗體(ti):永(yong)遠保存(cun)在(zai)4 度(du),避免(mian)凍(dong)起來。否(fou)則(ze)會(hui)導致酶活(huo)性(xing)的(de)下降(jiang)或(huo)者(zhe)喪(sang)失(shi)2. 偶(ou)聯(lian)抗體(ti):所(suo)有偶(ou)聯(lian)抗體(ti)都(dou)是在(zai)棕(zong)色(se)管中或(huo)使(shi)用(yong)錫(xi)箔紙避光保存(cun)。尤(you)其是熒光抗體,對(dui)光極為(wei)敏(min)感,因(yin)此在(zai)所(suo)有的(de)實驗(yan)階(jie)段也是要(yao)避光操作(zuo)的(de)!3. IgG3 的(de)同型對(dui)照(zhao):永(yong)遠保存(cun)在(zai)4 度(du),避免(mian)凍(dong)起來。因(yin)為如(ru)果出現(xian)凍(dong)融(rong)過程,該抗體(ti)非(fei)常容易形(xing)成(cheng)多聚(ju)體無(wu)論(lun)是保存(cun)還(hai)是運輸,避免(mian)反(fan)復凍(dong)融(rong)!反復凍(dong)融(rong)會導致抗體(ti)變性,導致多聚(ju)體(ti)形成,從(cong)而(er)降(jiang)低(di)抗(kang)體的(de)結合(he)能力!
關於(yu)加(jia)入甘油保存(cun):有(you)些人(ren)會加(jia)50%的(de)甘油到抗(kang)體中來避免(mian)反(fan)復凍(dong)融(rong),甘油在(zai)-20 度(du) 會降(jiang)低(di)冰(bing)點。這對(dui)很多(duo)抗體(ti)可能是可行的(de)。但是abcam 僅(jin)對(dui)非(fei)常小的(de)壹部(bu)分抗體檢測(ce)過其在(zai)這(zhe)種條件(jian)下的(de)穩定(ding)性(xing);而abcam 只(zhi)對(dui)按(an)照(zhao)條件(jian)保存(cun)的(de)抗體(ti)提(ti)供(gong)質(zhi)量(liang)保證!加(jia)入甘油的(de)溶液不建(jian)議在(zai)-80 度(du)保存(cun),因(yin)為這(zhe)已經(jing)超(chao)過了(le)甘(gan)油的(de)冰點。如(ru)果您(nin)要(yao)加(jia)入甘油來保存(cun)抗(kang)體的(de)話,請謹(jin)慎(shen)註意無(wu)菌操作(zuo),避免(mian)汙(wu)染!關於(yu)蛋白保護劑(ji):蛋白在(zai)高(gao)濃度(du)時(shi)更(geng)不容易降(jiang)解( mg/ml 或(huo)者(zhe)更高(gao)),這就(jiu)是為什麽在(zai)抗(kang)體中加(jia)入BSA 之類作(zuo)為穩定(ding)劑(ji)的(de)原因(yin)了(le);另(ling)壹方面(mian),加(jia)入的(de)蛋白(bai)也可以減少抗體由(you)於(yu)管壁(bi)吸附(fu)所造成(cheng)的(de)損(sun)失(shi)。但(dan)是如(ru)果抗體(ti)要(yao)用(yong)來標(biao)記(ji)的(de)話,則不(bu)能加(jia)入蛋白穩定(ding)劑(ji),因(yin)為這(zhe)些(xie)穩定(ding)劑(ji)會和抗(kang)體(ti)壹起競爭(zheng)結(jie)合(he)標記(ji)物(wu)。
其它相關信(xin)息:
葡萄糖(tang)半固(gu)體培(pei)養(yang)基 250 用(yong)於誌(zhi)賀(he)氏(shi)菌的(de)復合(he)生(sheng)化(hua)試驗(yan)(GB標準(zhun))
Dextrose Semisolid Medium
動(dong)力-吲(yin)哚-尿(niao)素(su)培(pei)養(yang)基基(ji)礎(chu)(MIU) Motility Indol Urea Medium Base 250 用(yong)於細(xi)菌的(de)復合(he)生(sheng)化(hua)試驗(yan)
Selenite Enrichment Medium
醋(cu)酸(suan)鉛(qian)培(pei)養(yang)基 250 用(yong)於硫(liu)化(hua)氫(qing)試驗(yan)
Lead Acetate Medium
SIM培(pei)養(yang)基 250 用(yong)於硫(liu)化(hua)氫(qing)、動力、吲(yin)哚試驗(yan)
Hydrogen Sulfide Indole Motility Medium
乳糖(tang)肉(rou)湯 250 用(yong)於食(shi)品中沙(sha)門氏(shi)菌檢驗(yan)前(qian)增(zeng)菌
Lactose Broth
EF-8 瓊(qiong)脂 250 用(yong)於濾(lv)膜(mo)法(fa)檢測(ce)食(shi)品中沙(sha)門氏(shi)菌(SN/T059.)
EF-8 Agar
新生(sheng)黴素(su) .5mg/支(zhi)*5 使(shi)用(yong)前(qian),每支(zhi)加(jia)入00mlHB453中
Novobiocin Sodium Salt
RVS 肉(rou)湯 250 用(yong)於食(shi)品中沙(sha)門氏(shi)菌檢驗(yan)選(xuan)擇(ze)性(xing)增(zeng)菌(ISO標準)
RVS Broth
MKTTn 肉(rou)湯 250 用(yong)於食(shi)品中沙(sha)門氏(shi)菌檢驗(yan)選(xuan)擇(ze)性(xing)增(zeng)菌(ISO標準)
MKTTn Broth
賴(lai)氨酸(suan)鐵瓊(qiong)脂(LIA) 250 用(yong)於食(shi)品中沙(sha)門氏(shi)菌生(sheng)化(hua)試驗(yan)(FDA標準(zhun))
Lysine Iron Agar
企業信息
ENTERPRISE INFORMATION上(shang)海谷(gu)研(yan)實業有限(xian)公司
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