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熒光素標(biao)記脫羧酶-65抗體(ti)IgG樣(yang)本(ben)的(de)物(wu)種(zhong) 應(ying)選擇(ze)物(wu)種(zhong)相(xiang)同(tong)或(huo)有交(jiao)叉反(fan)應(ying)的抗(kang)體(ti),抗體(ti)可能(neng)與不(bu)同(tong)物(wu)種(zhong)的同(tong)種(zhong)靶(ba)蛋白有交(jiao)叉反(fan)應(ying),因其氨(an)基酸(suan)序列(lie)同(tong)源(yuan)性較高(gao),如(ru)果(guo)樣(yang)本(ben)的(de)種(zhong)類未(wei)列(lie)入(ru)抗體(ti)說明(ming)書上的交(jiao)叉反(fan)應(ying)種(zhong)屬表(biao)中,並(bing)不(bu)意(yi)味著該(gai)抗(kang)體(ti)不(bu)適用於(yu)檢(jian)測(ce)該(gai)物(wu)種(zhong)的蛋白,而(er)只是表(biao)示該(gai)物(wu)種(zhong)尚(shang)未(wei)用此抗體(ti)檢(jian)測(ce)驗(yan)證過,應(ying)通過(guo)序列(lie)比(bi)對(dui)的方(fang)法來(lai)預測(ce)交(jiao)叉反(fan)應(ying),可應(ying)用Expasy 和(he) NCBI BLAST 來(lai)進行(xing)不(bu)同(tong)物(wu)種(zhong)蛋白同(tong)源(yuan)性比對(dui)。
熒光素標(biao)記脫羧酶-65抗體(ti)IgG壹(yi)抗宿(xiu)主(zhu)物(wu)種(zhong)的選(xuan)擇(ze)壹(yi)般說(shuo)來(lai),在(zai)使用(yong)偶(ou)聯二(er)抗(kang)結(jie)合(he)無偶(ou)聯物(wu)的(de)壹(yi)抗時,壹(yi)抗宿(xiu)主(zhu)動(dong)物(wu)的(de)物(wu)種(zhong)選擇(ze)較為(wei)重(zhong)要(yao),對(dui)於免(mian)疫(yi)組化(hua)而(er)言(yan),盡可能選擇(ze)與樣(yang)本(ben)不(bu)同(tong)種(zhong)系物(wu)種(zhong)的壹(yi)抗,從(cong)而避(bi)免(mian)二(er)抗(kang)與(yu)樣(yang)本(ben)內(nei)源(yuan)性免(mian)疫(yi)球(qiu)蛋白產生交(jiao)叉反(fan)應(ying),例如(ru):檢(jian)測(ce)小鼠樣(yang)本(ben)蛋白,則(ze)不(bu)應(ying)選擇(ze)小鼠或(huo)大鼠源(yuan)的壹(yi)抗,選(xuan)兔源(yuan)的壹(yi)抗,則(ze)二(er)抗(kang)則(ze)可(ke)選擇(ze)偶(ou)聯了(le)檢(jian)測(ce)分(fen)子(酶、熒光素、等)的抗兔IgG。如(ru)果(guo)選擇(ze)有偶(ou)聯物(wu)的(de)壹(yi)抗則(ze)不(bu)適用上(shang)述(shu)情況(kuang),除(chu)免(mian)疫(yi)組化(hua)外(wai)的(de)其它(ta)對(dui)不(bu)含內(nei)源(yuan)性免(mian)疫(yi)球(qiu)蛋白樣(yang)本(ben)的(de)檢(jian)測(ce)方(fang)法,則(ze)抗(kang)體(ti)宿(xiu)主(zhu)物(wu)種(zhong)的影(ying)響(xiang)不(bu)大,如(ru)對(dui)不(bu)含IgG 的細(xi)胞(bao)裂(lie)解物(wu)樣(yang)本(ben)的(de)western blotting檢(jian)測(ce),盡管如(ru)此,含有血清的組織裂(lie)解物(wu)和(he)組織培(pei)養(yang)上清中(zhong)含(han)有免(mian)疫(yi)球(qiu)蛋白,還(hai)原(yuan)變性樣(yang)本(ben)中(zhong)含(han)IgG,在(zai)western blot 檢(jian)測(ce)中(zhong)則結合出(chu)現(xian)IgG 分(fen)子50 and 25 kDa 的(de)重(zhong)鏈和輕(qing)鏈(lian)條(tiao)帶(dai)。二(er)抗(kang)的(de)選(xuan)擇(ze) 二(er)抗(kang)應(ying)選用(yong)與(yu)使用(yong)的壹(yi)抗相(xiang)同(tong)的物(wu)種(zhong)來(lai)源(yuan),例如(ru):如(ru)果(guo)妳(ni)的(de)壹(yi)抗是(shi)小鼠的(de)單(dan)克隆(long)抗(kang)體(ti),二(er)抗(kang)則(ze)選(xuan)抗小鼠的(de)二(er)抗(kang)anti-mouse secondary。建(jian)議檢(jian)查(zha)二(er)抗(kang)說(shuo)明(ming)書確(que)保(bao)該抗(kang)體(ti)適用(yong)於妳(ni)的(de)檢(jian)測(ce)應(ying)用, 二(er)抗(kang)壹(yi)般連(lian)接熒(ying)光素FITC 或(huo)發(fa)光團。
上(shang)海(hai)谷(gu)研生物(wu)科(ke)技(ji)有限(xian)公司(si)特(te)殊抗(kang)體(ti)的保(bao)存條(tiao)件(jian):. 酶聯抗(kang)體(ti):永遠保(bao)存在(zai)4 度,避(bi)免(mian)凍起(qi)來(lai)。否則會導(dao)致(zhi)酶活(huo)性的下(xia)降或(huo)者(zhe)喪失(shi)2. 偶(ou)聯抗(kang)體(ti):所有偶(ou)聯抗(kang)體(ti)都是(shi)在(zai)棕色(se)管中(zhong)或(huo)使用(yong)錫箔紙避(bi)光保(bao)存。尤(you)其是熒(ying)光抗體(ti),對(dui)光極(ji)為(wei)敏(min)感(gan),因(yin)此在(zai)所有的(de)實驗(yan)階(jie)段也是(shi)要(yao)避(bi)光操作(zuo)的!3. IgG3 的(de)同(tong)型對(dui)照:永遠保(bao)存在(zai)4 度,避(bi)免(mian)凍起(qi)來(lai)。因為(wei)如(ru)果(guo)出現凍融(rong)過程(cheng),該抗(kang)體(ti)非(fei)常(chang)容易形(xing)成多(duo)聚(ju)體(ti)無論(lun)是(shi)保(bao)存還(hai)是運輸(shu),避(bi)免(mian)反(fan)復凍融(rong)!反(fan)復凍融(rong)會導(dao)致(zhi)抗體(ti)變性,導(dao)致(zhi)多(duo)聚(ju)體(ti)形成,從(cong)而降低抗體(ti)的結(jie)合能力!
關(guan)於加(jia)入(ru)甘油保(bao)存:有些(xie)人(ren)會加50%的(de)甘(gan)油到(dao)抗體(ti)中來(lai)避(bi)免(mian)反(fan)復凍融(rong),甘油在(zai)-20 度 會降低(di)冰(bing)點。這(zhe)對(dui)很多(duo)抗(kang)體(ti)可能(neng)是可行的。但(dan)是abcam 僅對(dui)非(fei)常(chang)小的壹(yi)部分(fen)抗體(ti)檢(jian)測(ce)過(guo)其在(zai)這(zhe)種(zhong)條(tiao)件(jian)下的(de)穩(wen)定性;而abcam 只(zhi)對(dui)按照(zhao)條(tiao)件(jian)保(bao)存的(de)抗體(ti)提(ti)供質量保(bao)證!加(jia)入甘油的(de)溶液(ye)不(bu)建議在(zai)-80 度保(bao)存,因(yin)為(wei)這(zhe)已(yi)經(jing)超(chao)過了(le)甘油的(de)冰(bing)點。如(ru)果(guo)您要加(jia)入甘(gan)油來(lai)保(bao)存抗(kang)體(ti)的話(hua),請謹慎註意(yi)無菌(jun)操作(zuo),避(bi)免(mian)汙(wu)染(ran)!關(guan)於蛋白保(bao)護(hu)劑(ji):蛋白在(zai)高(gao)濃(nong)度時更(geng)不(bu)容易降(jiang)解( mg/ml 或(huo)者(zhe)更(geng)高(gao)),這(zhe)就(jiu)是為(wei)什(shen)麽在(zai)抗體(ti)中加(jia)入BSA 之類作(zuo)為(wei)穩(wen)定劑(ji)的原(yuan)因了;另(ling)壹(yi)方面,加入(ru)的蛋白也(ye)可以減(jian)少(shao)抗(kang)體(ti)由於(yu)管(guan)壁吸(xi)附(fu)所造成的(de)損失(shi)。但(dan)是如(ru)果(guo)抗體(ti)要用(yong)來(lai)標記的話(hua),則(ze)不(bu)能加入(ru)蛋白穩(wen)定劑(ji),因為(wei)這(zhe)些(xie)穩(wen)定劑(ji)會和抗(kang)體(ti)壹(yi)起競爭結(jie)合標記物(wu)。
其它(ta)相(xiang)關(guan)信息:
堿性蛋白腖(dong)水(shui) 250 用(yong)於(yu)霍亂弧(hu)菌(jun)選(xuan)擇(ze)性增菌(jun)培(pei)養(yang)(SN標準)
Alkaline Peptone Water
TCBS瓊(qiong)脂(zhi) 250 用(yong)於(yu)致(zhi)病性弧菌(jun)的選(xuan)擇(ze)性分(fen)離(GB、SN標準)
Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose Agar
氯(lv)化(hua)鈉(na)肉湯(tang)基礎(SCPB) 250 用(yong)於副(fu)溶血性弧菌(jun)選擇(ze)性增菌(jun)培(pei)養(yang),用前(qian)應(ying)無菌(jun)加入(SN標準)
Sodium Chloride Polymyxin Broth Base
2.5萬單(dan)位/支(zhi)*5 添(tian)加於00mlHB43中(zhong)
雙水(shui)解酶試驗(yan)用(yong)培(pei)養(yang)基(AD) 5 生化(hua)培(pei)養(yang)基,用於(yu)弧(hu)菌的(de)試驗(yan)
瓊(qiong)脂(zhi) 250 用於霍亂弧(hu)菌(jun)選(xuan)擇(ze)性分(fen)離培(pei)養(yang)
Gentamycin Agar
四(si)號(hao)瓊脂基(ji)礎 250 用(yong)於(yu)霍亂弧(hu)菌(jun)選(xuan)擇(ze)性分(fen)離培(pei)養(yang),滅菌冷(leng)至(zhi)50℃加入(ru)亞碲(di)酸(suan)鉀,倒平(ping)板
No.4 Agar Base
我(wo)妻氏培(pei)養(yang)基基礎(chu) 250 用(yong)於神奈(nai)川(chuan)現(xian)象(xiang)試驗(yan)(SN標(biao)準)
Wagstsuma Agar Base
60%/L氯(lv)化(hua)鈉(na)蛋白腖(dong)肉湯(tang) 250 用於副(fu)溶血性弧菌(jun)的前(qian)增菌(jun)培(pei)養(yang)
60%/L NaCl Peptone Water (SN標準)
氯(lv)化(hua)鈉(na)三糖(tang)鐵 250 用(yong)於副(fu)溶血性弧菌(jun)的生化(hua)反(fan)應(ying)篩選(xuan)(SN標(biao)準)
NaCl Triple Sugar Iron Agar
胰(yi)腖(dong)大豆(dou)瓊(qiong)脂斜(xie)面(TSA) 250 培(pei)養(yang)副溶血性弧菌(jun),做細(xi)胞(bao)色(se)素氧化(hua)酶實驗(yan)(SN標(biao)準)
Tryptic Soy Agar
42℃生長(chang)培(pei)養(yang)基 250 用於(yu)副(fu)溶血性弧菌(jun)42℃生長(chang)試驗(yan)
企業(ye)信息
ENTERPRISE INFORMATION上海(hai)谷(gu)研實業有限(xian)公司(si)
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