【概(gai)要描(miao)述(shu)】大(da)鼠胸腺淋(lin)巴(ba)細(xi)胞(bao)公司正在出(chu)售的(de)產(chan)品：BSC1非洲綠猴正常(chang)腎(shen)上(shang)皮細(xi)胞人卵巢癌(ai)相(xiang)關(guan)成纖維(wei)細胞永(yong)生化人甲狀(zhuang)旁(pang)腺細胞永(yong)生化人乳(ru)腺上(shang)皮細(xi)胞永(yong)生化人乳(ru)腺癌(ai)成(cheng)纖(xian)維細胞(bao)永(yong)生化人軟骨(gu)細(xi)胞(bao)永(yong)生化小鼠角膜上(shang)皮細(xi)胞永(yong)生化小鼠肝(gan)星(xing)狀(zhuang)細(xi)胞(bao)永(yong)生化大鼠內皮祖細(xi)胞(bao)永(yong)生化雞氣管(guan)黏(nian)膜上(shang)皮細(xi)胞永(yong)生化

大鼠胸腺淋(lin)巴(ba)分離自胸(xiong)腺組織(zhi)；胸腺是(shi)機體的重(zhong)要(yao)淋(lin)巴(ba)器(qi)官，其(qi)功(gong)能與免疫(yi)緊(jin)密(mi)相關，是(shi)T細胞(bao)分化、發(fa)育(yu)、成(cheng)熟的(de)場(chang)所。其(qi)還(hai)可以(yi)分泌胸(xiong)腺激素(su)及激(ji)素(su)類物質(zhi)，具(ju)內分泌機(ji)能的器(qi)官。位(wei)於胸(xiong)腔(qiang)前(qian)縱(zong)隔(ge)。胚胎後(hou)期及初生時(shi)，是(shi)壹生中重量相對(dui)最大(da)的(de)時(shi)期(qi)。隨(sui)年(nian)齡增長，胸腺繼(ji)續發(fa)育(yu)；此(ci)後胸腺逐漸退(tui)化，淋(lin)巴(ba)細(xi)胞(bao)減少(shao)，脂肪組織(zhi)增多(duo)。胸(xiong)腺的結構(gou)表(biao)面有結締(di)組織(zhi)被膜，結(jie)締(di)組織(zhi)伸入(ru)胸腺實質(zhi)把(ba)胸腺分成許(xu)多(duo)不(bu)wan全(quan)分隔的(de)小葉。小葉周邊(bian)為皮質(zhi)，深(shen)部(bu)為髓(sui)質(zhi)。皮(pi)質(zhi)不(bu)wan全包圍(wei)髓(sui)質(zhi)，相(xiang)鄰(lin)小葉髓(sui)質(zhi)彼(bi)此銜(xian)接(jie)。皮質(zhi)主要(yao)由淋(lin)巴(ba)細(xi)胞(bao)和上(shang)皮性網狀(zhuang)細(xi)胞(bao)構成，胞質(zhi)中有顆粒(li)及泡(pao)狀(zhuang)結(jie)構(gou)。網狀(zhuang)細(xi)胞(bao)間有密(mi)集(ji)的淋(lin)巴(ba)細(xi)胞(bao)。胸腺的淋(lin)巴(ba)細(xi)胞(bao)又稱(cheng)為胸腺細胞，在皮質(zhi)淺(qian)層細(xi)胞較(jiao)大，為較原始(shi)的淋(lin)巴(ba)細(xi)胞(bao)。中層為中等大小的淋(lin)巴(ba)細(xi)胞(bao)，深層(ceng)為小淋(lin)巴(ba)細(xi)胞(bao)。從(cong)淺層(ceng)到深(shen)層(ceng)為造血(xue)幹(gan)細胞(bao)增(zeng)殖分化為小淋(lin)巴(ba)細(xi)胞(bao)的過(guo)程(cheng)。皮(pi)質(zhi)內(nei)還有巨噬(shi)細(xi)胞，無淋(lin)巴(ba)小結。髓(sui)質(zhi)中淋(lin)巴(ba)細(xi)胞(bao)少而(er)稀疏，上(shang)皮性網狀(zhuang)細(xi)胞(bao)多(duo)而(er)顯著。形態多(duo)樣(yang)，胞(bao)質(zhi)中有顆粒(li)及泡(pao)狀(zhuang)結(jie)構(gou)，為其(qi)分泌物(wu)，尚有散在的圓(yuan)形的胸腺小體。
方法(fa)簡(jian)介：

公司實驗室(shi)分離的(de)大鼠胸腺淋(lin)巴(ba)采(cai)用(yong)機械研(yan)磨法結合(he)密(mi)度(du)梯度(du)離心(xin)法制備(bei)而來(lai)，細胞(bao)總(zong)量(liang)約(yue)為1×10?cells/瓶(ping)。
質(zhi)量(liang)檢測(ce)：

公司實驗室(shi)分離的(de)大鼠胸腺淋(lin)巴(ba)經(jing)過(guo)檢測(ce)，且(qie)不含有HIV-1、HBV、HCV、支(zhi)原體、細菌(jun)、酵母(mu)和真菌(jun)等(deng)。

本公(gong)司所有產品(pin)僅供科(ke)學實驗(yan)，不(bu)做(zuo)其(qi)他(ta)科學實驗(yan)外的使(shi)用(yong)！

培(pei)養(yang)基(ji) 含FBS、生長添(tian)加(jia)劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻(pin)率(lv) 每(mei)2-3天換液壹次

生長特性 懸浮(fu)

細胞(bao)形態 圓(yuan)形

傳代(dai)特性 不增(zeng)殖(zhi)；不傳(chuan)代(dai)

消化液 0.25%yi蛋白(bai)酶(mei)

培(pei)養(yang)條件(jian) 氣相(xiang)：空氣，95%；CO2，5%

準(zhun)備(bei)工作

1. 實驗(yan)器(qi)材(cai)準(zhun)備(bei)：準(zhun)備(bei)無菌(jun)的(de)培(pei)養(yang)皿、培(pei)養(yang)瓶(ping)、移(yi)液管(guan)、離(li)心(xin)管、手術(shu)器(qi)械(xie)等(deng)，並(bing)進行(xing)高壓滅(mie)菌(jun)或其(qi)他(ta)合適(shi)的(de)消毒(du)處(chu)理(li)。

2. 試(shi)劑準(zhun)備(bei)：配(pei)制或購買(mai)合(he)適(shi)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)、消化酶(mei)（如、膠原(yuan)酶(mei)等）、胎牛血(xue)清、雙(shuang)抗(kang)等(deng)試(shi)劑，確(que)保(bao)其(qi)無菌(jun)且(qie)在有效期(qi)內。

3. 實驗(yan)動(dong)物或組織(zhi)來源準(zhun)備(bei)：根據實驗(yan)需求(qiu)，選(xuan)擇合適(shi)的(de)動(dong)物並(bing)進行(xing)相應(ying)的麻醉(zui)或處(chu)死(si)，獲(huo)取(qu)所需組織(zhi)；或從(cong)已(yi)有的組織(zhi)樣本庫(ku)中獲取組織(zhi)。

取材(cai)與(yu)處(chu)理(li)

1. 取材(cai)：在無菌(jun)條件(jian)下(xia)，迅速(su)取(qu)出(chu)目標(biao)組織(zhi)，盡(jin)量減(jian)少對(dui)組織(zhi)的損傷(shang)，並(bing)去(qu)除多(duo)余(yu)的(de)脂肪、結締(di)組織(zhi)等非目的組織(zhi)。

2. 清洗(xi)：將(jiang)取(qu)出(chu)的組織(zhi)用預冷的(de)無菌(jun)PBS沖(chong)洗(xi)數次，以(yi)去(qu)除血(xue)液和雜(za)質(zhi)。

3. 剪切：將(jiang)組織(zhi)剪成約(yue)1 - 2mm³的(de)小塊(kuai)，以(yi)便(bian)後續消化。

細胞(bao)分離

1. 消化：將(jiang)剪(jian)碎(sui)的(de)組織(zhi)塊(kuai)放(fang)入(ru)含有適(shi)量(liang)消化酶(mei)的離心(xin)管中，在37℃恒溫(wen)搖床(chuang)或培(pei)養(yang)箱(xiang)中消化壹段時(shi)間。期間可輕輕搖(yao)晃離(li)心(xin)管，使(shi)消化更均勻。

2. 終止消化：當組織(zhi)塊(kuai)大(da)部(bu)分被消化成單(dan)細胞(bao)懸液或小細胞團(tuan)時(shi)，加(jia)入(ru)含血(xue)清的(de)培(pei)養(yang)基(ji)終止消化。

3. 過(guo)濾與(yu)離心(xin)：用細(xi)胞篩(shai)過(guo)濾細(xi)胞懸液，去(qu)除未(wei)消化的組織(zhi)碎片，然(ran)後(hou)將(jiang)濾(lv)液以(yi)適(shi)當(dang)的轉速(su)離(li)心(xin)，收集(ji)細胞(bao)沈澱(dian)。

細胞(bao)觀察與(yu)檢測(ce)

1. 日(ri)常(chang)觀察：每(mei)天用倒(dao)置顯微鏡(jing)觀察細(xi)胞的(de)形態、生長狀(zhuang)態(tai)、密(mi)度(du)等，記錄(lu)細(xi)胞(bao)的(de)變(bian)化情(qing)況(kuang)，如(ru)發(fa)現(xian)細(xi)胞汙(wu)染或異常(chang)，及時(shi)采(cai)取(qu)相應措(cuo)施(shi)。
2. 細胞計(ji)數與活(huo)力(li)檢測(ce)：在需要時(shi)，可(ke)采(cai)用(yong)臺盼藍(lan)染(ran)色等(deng)方法對(dui)細胞(bao)進行(xing)計(ji)數和活力檢測(ce)，以(yi)了解細胞的(de)生長情(qing)況(kuang)和健康狀(zhuang)態(tai)。

壹、取材(cai)與分離

1. 快速(su)操(cao)作

- 組織(zhi)取材後(hou)需立即(ji)處(chu)理(li)，避免長時(shi)間暴露(lu)於室(shi)溫或非營養(yang)環(huan)境。

- 使(shi)用(yong)無菌(jun) PBS 或生理鹽(yan)水沖(chong)洗(xi)組織(zhi)，去(qu)除血(xue)液、雜(za)質(zhi)。

2. 消化酶(mei)選擇

- 根據組織(zhi)類型(xing)選(xuan)擇(ze)消化酶(mei)，避免過(guo)度(du)消化導致(zhi)細胞損傷。

- 消化時(shi)間需嚴格(ge)控(kong)制（通(tong)常(chang) 10-30 分鐘），可(ke)通(tong)過(guo)顯微鏡(jing)觀察細(xi)胞解離狀(zhuang)態(tai)。

二、培(pei)養(yang)條件(jian)優(you)化

1. 培(pei)養(yang)基(ji)選擇

- 使(shi)用(yong)含血(xue)清或特定(ding)生長因子的培(pei)養(yang)基(ji)（如 DMEM、RPMI 1640 等），部(bu)分細胞(bao)需添(tian)加(jia)胰(yi)島(dao)素(su)、EGF 等(deng)。

- 避免頻繁(fan)更換(huan)培(pei)養(yang)基(ji)品牌(pai)或批次(ci)，減少細(xi)胞(bao)適(shi)應(ying)壓力。

2. 貼(tie)壁與傳(chuan)代(dai)

- 原代(dai)細胞(bao)貼(tie)壁能力較(jiao)弱(ruo)，可能需要包被培(pei)養(yang)皿（如膠原(yuan)蛋(dan)白(bai)、多(duo)聚賴(lai)氨酸(suan)）。

- 傳代(dai)時(shi)密(mi)度(du)建議(yi)控(kong)制在 70%-80%，過(guo)度(du)匯(hui)合會(hui)導致(zhi)接觸抑(yi)制和分化。

三、汙(wu)染控(kong)制

1. 無菌(jun)操(cao)作

- 全程(cheng)在超凈(jing)臺操(cao)作，使(shi)用(yong)壹次性耗材，避免交叉(cha)汙(wu)染。

- 培(pei)養(yang)基(ji)中可添(tian)加(jia)雙抗，但(dan)長期使(shi)用(yong)可能影(ying)響(xiang)細(xi)胞(bao)活(huo)性。

2. 支(zhi)原體檢測(ce)

- 定期(qi)檢測(ce)支(zhi)原體汙(wu)染（如 PCR 法(fa)），汙(wu)染後需及時(shi)丟(diu)棄(qi)細(xi)胞。

四(si)、狀(zhuang)態(tai)監(jian)控(kong)

1. 日(ri)常(chang)觀察

- 每(mei)天檢查細胞(bao)形態、密(mi)度(du)及培(pei)養(yang)基(ji)顏(yan)色，及時(shi)更(geng)換(huan)培(pei)養(yang)基(ji)（通(tong)常(chang)每(mei) 2-3 天換液壹次）。

- 異常(chang)形態（如細胞變(bian)圓(yuan)、碎片(pian)增多(duo)）可(ke)能提示(shi)汙(wu)染或營養(yang)不(bu)足。

2. 傳代(dai)與凍(dong)存(cun)

- 原代(dai)細胞(bao)分裂次(ci)數有限(xian)（壹般 5-10 代(dai)），需及時(shi)凍(dong)存(cun)早(zao)期(qi)代(dai)次細(xi)胞(bao)。

- 凍存(cun)液建(jian)議(yi)使(shi)用(yong) DMSO+血(xue)清（或專用(yong)凍存(cun)培(pei)養(yang)基(ji)），梯度(du)降溫(wen)後(hou)液氮(dan)保存(cun)。