【概(gai)要描(miao)述】小鼠elisa試劑(ji)盒(he)說明書標本(ben)采集後(hou)盡(jin)早(zao)進行提取，提取按(an)相關文(wen)獻(xian)進行，提取後(hou)應(ying)盡(jin)快進(jin)行實驗。若(ruo)不能(neng)馬(ma)上進(jin)行試驗，可(ke)將標本(ben)放(fang)於-20℃保存，但應避(bi)免反復凍(dong)融(rong)

                                                                                                          小(xiao)鼠(shu)elisa試劑(ji)盒(he)說明書
使用目(mu)的(de)：

本(ben)試劑(ji)盒(he)用於測(ce)定(ding)大鼠血(xue)清(qing)，血(xue)漿及(ji)相關液(ye)體樣(yang)本(ben)中含(han)量。

試劑(ji)盒(he)組成：

標本(ben)要求：

1．標本(ben)采集後(hou)盡(jin)早(zao)進行提取，提取按(an)相關文(wen)獻(xian)進行，提取後(hou)應(ying)盡(jin)快進(jin)行實驗。若(ruo)不能(neng)馬(ma)上進(jin)行試驗，可(ke)將標本(ben)放(fang)於-20℃保存，但應避(bi)免反復凍(dong)融(rong)

2．不(bu)能檢(jian)測(ce)含NaN3的(de)樣(yang)品(pin)，因(yin)NaN3抑制(zhi)辣根過(guo)氧化(hua)物酶(mei)的(de)（HRP）活(huo)性。

操(cao)作(zuo)步驟

1.標準(zhun)品(pin)的(de)稀(xi)釋(shi)：本(ben)試劑(ji)盒(he)提供(gong)原(yuan)倍標準(zhun)品(pin)壹支(zhi)，用戶(hu)可(ke)按(an)照(zhao)下(xia)列圖表(biao)在(zai)小試管中進(jin)行稀釋(shi)。

2.加(jia)樣(yang)：分別設空(kong)白孔（空(kong)白(bai)對照(zhao)孔不(bu)加(jia)樣(yang)品(pin)及(ji)酶(mei)標試劑(ji)，其(qi)余各步操(cao)作(zuo)相同）、標準(zhun)孔、待測(ce)樣品(pin)孔。在(zai)酶標包(bao)被板(ban)上標準(zhun)品(pin)準(zhun)確加(jia)樣(yang)50μl，待測(ce)樣品(pin)孔中先(xian)加(jia)樣(yang)品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye)40μl，然後(hou)再加(jia)待測(ce)樣品(pin)10μl（樣(yang)品(pin)最終稀(xi)釋(shi)度(du)為(wei)5倍(bei)）。加(jia)樣(yang)將樣(yang)品(pin)加(jia)於酶(mei)標板(ban)孔底(di)部，盡(jin)量(liang)不觸(chu)及孔壁(bi)，輕(qing)輕(qing)晃(huang)動混勻(yun)。

3.溫(wen)育(yu)：用封(feng)板(ban)膜(mo)封板(ban)後(hou)置(zhi)37℃溫(wen)育(yu)30分鐘。   

4.配(pei)液(ye)：將30倍(bei)濃縮(suo)洗滌(di)液(ye)用蒸(zheng)餾(liu)水(shui)30倍(bei)稀(xi)釋(shi)後(hou)備(bei)用(yong)

5.洗滌(di)：小心揭(jie)掉(diao)封(feng)板(ban)膜(mo)，棄去液(ye)體，甩(shuai)幹，每孔加(jia)滿(man)洗(xi)滌(di)液(ye)，靜置(zhi)30秒(miao)後(hou)棄(qi)去，如(ru)此(ci)重(zhong)復5次，拍幹。

6.加(jia)酶(mei)：每孔加(jia)入(ru)酶(mei)標試劑(ji)50μl，空(kong)白孔除外。 

7.溫育(yu)：操作(zuo)同3。

8.洗(xi)滌(di)：操作(zuo)同5。

9.顯(xian)色：每孔先(xian)加(jia)入(ru)顯(xian)色劑(ji)A50μl，再加(jia)入(ru)顯(xian)色劑(ji)B50μl，輕(qing)輕(qing)震蕩(dang)混(hun)勻，37℃避(bi)光(guang)顯(xian)色10分鐘.

10.終(zhong)止(zhi)：每孔加(jia)終(zhong)止(zhi)液(ye)50μl，終止(zhi)反應（此(ci)時藍(lan)色立(li)轉(zhuan)黃(huang)色）。

11.測(ce)定(ding)：以(yi)空(kong)白(bai)孔調零(ling)，450nm波長(chang)依(yi)序(xu)測(ce)量各孔的(de)吸(xi)光(guang)度(du)（OD值(zhi)）。 測(ce)定(ding)應在(zai)加(jia)終(zhong)止(zhi)液(ye)後(hou)15分鐘以(yi)內(nei)進行。

操作(zuo)程序總(zong)結：

計算(suan)

  以(yi)標準(zhun)物的(de)濃度為(wei)橫(heng)坐標，OD值(zhi)為(wei)縱(zong)坐標，在(zai)坐標紙上繪(hui)出標準(zhun)曲線(xian)，根據樣(yang)品(pin)的(de)OD值(zhi)由標準(zhun)曲線(xian)查出相應的(de)濃度；再乘以(yi)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數；或(huo)用(yong)標準(zhun)物的(de)濃度與OD值(zhi)計算(suan)出標準(zhun)曲線(xian)的(de)直(zhi)線(xian)回(hui)歸(gui)方(fang)程式(shi)，將樣(yang)品(pin)的(de)OD值(zhi)代(dai)入(ru)方(fang)程式(shi)，計算(suan)出樣(yang)品(pin)濃度，再乘以(yi)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數，即(ji)為(wei)樣(yang)品(pin)的(de)實際濃度。 

小鼠elisa試劑(ji)盒(he)說明書註意事(shi)項(xiang)

1．試劑(ji)盒(he)從冷(leng)藏環(huan)境(jing)中取出應(ying)在(zai)室溫平衡15-30分鐘後(hou)方(fang)可(ke)使用，酶(mei)標包(bao)被板(ban)開封後(hou)如(ru)未用完(wan)，板(ban)條應(ying)裝(zhuang)入(ru)密(mi)封(feng)袋(dai)中保存。

2．濃洗滌液(ye)可(ke)能(neng)會有結晶(jing)析出，稀(xi)釋(shi)時可(ke)在(zai)水(shui)浴中加(jia)溫(wen)助(zhu)溶(rong)，洗(xi)滌(di)時不影(ying)響(xiang)結果(guo)。

3．各步加(jia)樣(yang)均(jun)應(ying)使用加(jia)樣(yang)器(qi)，並(bing)經常校(xiao)對其準(zhun)確性，以(yi)避(bi)免試驗誤(wu)差(cha)。壹次(ci)加(jia)樣(yang)時間最好(hao)控(kong)制(zhi)在(zai)5分鐘內(nei)，如(ru)標本(ben)數量(liang)多，推薦(jian)使用排槍(qiang)加(jia)樣(yang)。

4．請(qing)每次(ci)測(ce)定(ding)的(de)同時做標準(zhun)曲線(xian)，最好(hao)做復孔。如(ru)標本(ben)中待測(ce)物質(zhi)含(han)量(liang)過(guo)高(gao)（樣(yang)本(ben)OD值(zhi)大於標準(zhun)品(pin)孔第(di)壹孔的(de)OD值(zhi)），請(qing)先(xian)用樣品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye)稀釋(shi)壹定(ding)倍數（n倍）後(hou)再測(ce)定(ding)，計算(suan)時請(qing)最後(hou)乘以(yi)總(zong)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數（×n×5）。

5．封(feng)板(ban)膜(mo)只限(xian)壹次(ci)性使用，以(yi)避(bi)免交(jiao)叉汙染。

6．底(di)物請(qing)避(bi)光(guang)保存。

7．嚴格按(an)照(zhao)說明書的(de)操(cao)作(zuo)進行，試驗結果(guo)判定(ding)必須以(yi)酶(mei)標儀讀(du)數(shu)為(wei)準(zhun).

8．所有樣品(pin)，洗(xi)滌(di)液(ye)和(he)各種廢(fei)棄物都(dou)應按(an)傳(chuan)染物處理。

9．本(ben)試劑(ji)不(bu)同批號(hao)組(zu)分不(bu)得(de)混(hun)用(yong)。

保存條件及(ji)有效期

1．試劑(ji)盒(he)保存：；2-8℃。

2．有效期：6個月(yue)