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人(ren)星形膠質細胞(bao) 具(ju)體(ti)操作(zuo)
取(qu)出凍存管: 根據(ju)細胞(bao)凍存(cun)記(ji)錄(lu)按(an)標簽(qian)找到(dao)所需(xu)細胞(bao)的(de)編(bian)號。
從(cong)液氮(dan)罐(guan)中取(qu)出細胞(bao)盒(he),取出所需的(de)細胞(bao),同時核對管(guan)外的(de)編(bian)號。
初學(xue)者(zhe)易(yi)犯錯(cuo)誤(wu):水(shui)浴(yu)鍋未(wei)預熱或者(zhe)未(wei)預熱到37℃。
水(shui)浴(yu)鍋內(nei)凍存(cun)管(guan)太(tai)多,導致(zhi)傳(chuan)熱不(bu)佳,使融化(hua)時間延(yan)長(chang)。
離心前(qian)忘(wang)記平(ping)衡(heng),導(dao)致(zhi)離心機損壞(huai)和細胞(bao)丟失(shi)。
壹(yi)次(ci)復(fu)蘇(su)細胞(bao)過(guo)多,忘(wang)記更換吸(xi)頭(tou)和(he)吸(xi)管(guan),導(dao)致(zhi)細胞(bao)交叉汙(wu)染(ran)。
實(shi)驗(yan)前(qian)準(zhun)備(bei):將(jiang)水(shui)浴(yu)鍋預熱至(zhi)37℃
人(ren)星形膠質細胞(bao)用75%酒精(jing)擦(ca)拭(shi)紫(zi)外線(xian)照(zhao)射30min的(de)超凈(jing)工(gong)作(zuo)臺(tai)臺(tai)面(mian)。
在超(chao)凈(jing)工作(zuo)臺(tai)中(zhong)按次(ci)序擺放好消過(guo)毒的(de)離心管、吸(xi)管(guan)、培(pei)養(yang)瓶(ping) 等(deng)。
迅速(su)解凍(dong):
迅速(su)將(jiang)凍(dong)存管投(tou)入到(dao)已經(jing)預熱的(de)水(shui)浴(yu)鍋中(zhong)迅速(su)解凍(dong),並(bing)要不(bu)斷的(de)搖動(dong),使管中(zhong)的(de)液體(ti)迅速(su)融化(hua)。
.約-2min後(hou)
凍(dong)存(cun)管(guan)內(nei)液體(ti)*溶(rong)解,取(qu)出用酒精(jing)棉(mian)球(qiu)擦(ca)拭(shi)凍(dong)存(cun)管的(de)外壁(bi),再(zai)拿入超(chao)凈臺(tai)內(nei)。
平(ping)衡(heng)離心:用架(jia)盤(pan)天平(ping)平(ping)衡(heng)後(hou),放入離心機中3000r/min 離心3min
制備(bei)細胞(bao)懸液(ye):吸(xi)棄(qi)上(shang)清液(ye)。
向(xiang)離心管內(nei)加入0ml培養液(ye),吹打制成細胞(bao)懸液(ye)。
活(huo)化(hua)與(yu)細胞(bao)復(fu)蘇(su) 收到(dao)細胞(bao)株包(bao)裹時, 請檢查(zha)細胞(bao)株冷凍(dong)管(guan)是(shi)否(fou)有(you)解凍(dong)情形, 若(ruo)有(you)請(qing)立(li)即(ji)通知。細胞(bao)株請盡(jin)速(su)開(kai)始培養(yang), 或立即(ji)冷凍(dong)保存(cun)(置(zhi)於(yu)–70 °C, 隔夜(ye)後(hou), 移(yi)到(dao)liq N2)。
細胞(bao)復(fu)蘇(su)的(de)原則-快速(su)融(rong)化(hua):必(bi)須(xu)將(jiang)凍(dong)存在-96℃液氮中(zhong)的(de)細胞(bao)快速(su)融(rong)化(hua)至(zhi)37℃,使細胞(bao)外凍存(cun)時的(de)冰晶迅速(su)融化(hua),避(bi)免冰晶緩慢融化(hua)時進入細胞(bao)形成再結晶(jing),對(dui)細胞(bao)造成(cheng)損害(hai)。
細胞(bao)計數(shu):細胞(bao)濃度(du)以(yi)5×05/ml為(wei)宜(yi)。
培養(yang)細胞(bao)將(jiang)復(fu)合(he)細胞(bao)計數(shu)要求(qiu)的(de)細胞(bao)懸液(ye)分(fen)裝入培(pei)養瓶內(nei),將(jiang)培(pei)養瓶放入37℃和5%CO2的(de)培養(yang)箱(xiang)內(nei)2-4小(xiao)時(或者(zhe)24-48小(xiao)時)後(hou)換液繼(ji)續培養(yang)培養(yang),換液的(de)時間由(you)細胞(bao)情況而(er)定。
公司(si)其(qi)他銷量(liang)大產(chan)品信(xin)息(xi):030 三糖(tang)鐵瓊(qiong)脂(zhi)培(pei)養基(TSI) 50g/瓶(ping) 用(yong)於腸(chang)桿菌(jun)科(ke)細菌生(sheng)化(hua)試(shi)驗(yan)
03 三(san)糖(tang)鐵(TSI)瓊(qiong)脂(zhi)斜(xie)面 4ml×0 支/盒(he) 用於(yu)腸(chang)桿菌(jun)科(ke)細菌生(sheng)化(hua)試(shi)驗(yan)
03 四(si)硫(liu)磺酸鈉(na)亮(liang)綠(lv)培(pei)養(yang)基(TTB)基礎 50g/瓶(ping) 用於沙(sha)門(men)氏菌選擇性(xing)增(zeng)菌(jun) 035 碘(dian)溶(rong)液 ml×0 支(zhi)/盒(he) 各取(qu) 支用於 00ml03 中
036 0.%煌(huang)綠(lv)溶(rong)液 ml×0 支(zhi)/盒(he)
30309 四(si)硫(liu)磺酸鈉(na)亮(liang)綠(lv)培(pei)養(yang)基(TTB) 0ml×0 支(zhi)/箱(xiang) 用於(yu)沙(sha)門(men)氏菌選擇性(xing)增(zeng)菌(jun)
03 沙(sha)門(men)、誌(zhi)賀菌屬(shu)瓊(qiong)脂(zhi)培(pei)養基(SS) 50g/瓶(ping) 用(yong)於沙(sha)門(men)氏菌、誌(zhi)賀氏菌選擇性(xing)分(fen)離
3030 沙(sha)門(men)、誌(zhi)賀菌屬(shu)瓊(qiong)脂(zhi)培(pei)養基(SS)平(ping)板(ban) 90mm×0 個/包(bao) 用於(yu)沙(sha)門(men)氏菌、誌(zhi)賀氏菌選擇性(xing)分(fen)離
033 膽鹽(yan)硫(liu)乳(ru)瓊(qiong)脂(zhi)培(pei)養基(DHL) 50g/瓶(ping) 用(yong)於腸(chang)道菌(jun)選擇性(xing)分(fen)離
70 溴化(hua)十(shi)六(liu)烷基*銨瓊(qiong)脂(zhi)培(pei)養基 50g/瓶(ping) 用(yong)於銅(tong)綠(lv)假(jia)單胞(bao)菌的(de)選擇性(xing)分(fen)離
0808 卵黃(huang)氯(lv)化(hua)鈉(na)瓊(qiong)脂(zhi)培(pei)養基基礎 50g/瓶(ping) 用於金(jin)黃(huang)色葡萄球(qiu)菌(jun)選擇性(xing)分(fen)離
0804 0%氯(lv)化(hua)鈉(na)卵黃液 5ml×0 支(zhi)/盒(he) 每 支(zhi)用於 65ml0808 中
0809 氯(lv)化(hua)鈉(na)瓊(qiong)脂(zhi)培(pei)養基 50g/瓶(ping) 用(yong)於金(jin)黃(huang)色葡萄球(qiu)菌(jun)選擇性(xing)分(fen)離
080 兔血(xue)漿(jiang)(檸檬酸鈉(na)) 0.5ml×0 支(zhi)/盒(he) 用於(yu)血(xue)漿(jiang)凝(ning)固(gu)酶(mei)試驗(yan)
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