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小細(xi)胞肺(fei)癌(ai)細(xi)胞具(ju)體操作
取出凍(dong)存管: 根據(ju)細(xi)胞凍(dong)存記錄按標(biao)簽找到所需(xu)細(xi)胞的編號。
從液氮(dan)罐(guan)中取出細(xi)胞盒,取出所需(xu)的細(xi)胞,同(tong)時核對(dui)管外的編號。
初學(xue)者易(yi)犯(fan)錯(cuo)誤(wu):水浴(yu)鍋(guo)未預熱(re)或者(zhe)未預熱(re)到37℃。
水浴(yu)鍋(guo)內凍(dong)存管太多(duo),導(dao)致傳(chuan)熱(re)不(bu)佳,使融化時間延長(chang)。
離(li)心(xin)前(qian)忘記平(ping)衡,導致離(li)心(xin)機(ji)損壞(huai)和細(xi)胞丟失(shi)。
壹(yi)次(ci)復(fu)蘇(su)細(xi)胞過(guo)多(duo),忘(wang)記更換(huan)吸頭(tou)和吸管,導致細(xi)胞交叉汙(wu)染(ran)。
實(shi)驗前(qian)準備:將(jiang)水浴(yu)鍋(guo)預熱(re)至(zhi)37℃
小細(xi)胞肺(fei)癌(ai)細(xi)胞用75%酒精(jing)擦(ca)拭(shi)紫外(wai)線(xian)照(zhao)射(she)30min的超凈(jing)工作臺臺面。
在(zai)超凈工作臺中按次序(xu)擺放好消(xiao)過(guo)毒(du)的離心(xin)管、吸管、培養(yang)瓶 等。
迅(xun)速解(jie)凍:
迅(xun)速將(jiang)凍存(cun)管投入到已(yi)經(jing)預熱(re)的水浴(yu)鍋(guo)中迅(xun)速解(jie)凍,並(bing)要不(bu)斷的搖(yao)動(dong),使管中的液體迅(xun)速融化。
.約-2min後(hou)
凍存(cun)管內液體*溶解(jie),取出用酒(jiu)精(jing)棉(mian)球擦拭(shi)凍存(cun)管的外壁,再拿入(ru)超(chao)凈(jing)臺(tai)內(nei)。
平(ping)衡離心(xin):用架(jia)盤(pan)天平(ping)平(ping)衡後(hou),放入(ru)離心(xin)機(ji)中3000r/min 離心(xin)3min
制(zhi)備細(xi)胞懸(xuan)液:吸棄(qi)上清(qing)液。
向(xiang)離心(xin)管內加入0ml培養(yang)液,吹(chui)打制(zhi)成(cheng)細(xi)胞懸(xuan)液。
活化與(yu)細(xi)胞復(fu)蘇(su) 收到細(xi)胞株(zhu)包裹時, 請(qing)檢查(zha)細(xi)胞株(zhu)冷(leng)凍(dong)管是否(fou)有(you)解凍情(qing)形, 若(ruo)有(you)請(qing)立即(ji)通知(zhi)。細(xi)胞株(zhu)請(qing)盡速(su)開始(shi)培(pei)養(yang), 或立(li)即冷(leng)凍保(bao)存(置於(yu)–70 °C, 隔(ge)夜(ye)後(hou), 移到liq N2)。
細(xi)胞復(fu)蘇(su)的原則(ze)-快(kuai)速(su)融化:必須將(jiang)凍存(cun)在(zai)-96℃液氮(dan)中的細(xi)胞快(kuai)速融化至(zhi)37℃,使細(xi)胞外(wai)凍存(cun)時的冰晶(jing)迅(xun)速融化,避免冰晶(jing)緩(huan)慢(man)融化時進(jin)入細(xi)胞形(xing)成(cheng)再結(jie)晶(jing),對(dui)細(xi)胞造成(cheng)損害。
細(xi)胞計(ji)數:細(xi)胞濃(nong)度(du)以(yi)5×05/ml為宜(yi)。
培養(yang)細(xi)胞將(jiang)復合(he)細(xi)胞計(ji)數要求的細(xi)胞懸(xuan)液分(fen)裝入培(pei)養(yang)瓶內,將(jiang)培養(yang)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yang)箱內(nei)2-4小時(shi)(或者(zhe)24-48小時(shi))後(hou)換液繼(ji)續培(pei)養(yang)培養(yang),換液的時間由細(xi)胞情(qing)況而定。
公(gong)司(si)其(qi)他銷(xiao)量(liang)大(da)產品(pin)信息:天青(qing)II,天青(qing)A,蔚藍(lan)II,3-氨基(ji)-7-二甲基(ji)氨(an)基吩(fen)噻(sai)嗪-5-鎓(鎓)lv"化物(wu),7-(二甲基(ji))-3-亞(ya)胺(an)基-3H-分(fen)噻嗪鹽suan",Azure II
天青I,天(tian)青(qing)B,亞甲天(tian)青,蔚藍(lan)I,亞甲(jia)基天(tian)青(qing),氮(dan)雜(za)脲(niao)I ,Azure B
天(tian)青II曙紅(hong),Azure II eosin
橙黃G6,金(jin)橙G,桔黃G,橙(cheng)黃GG,suan"性(xing)耐光(guang)桔黃,suan"性(xing)橙0,橙(cheng)黃G鈉(na),-ben"基(ji)偶氮(dan)--萘(nai)酚(fen)-6,8-二磺suan"鈉(na),耐(nai)光橙(cheng)G,橙黃G,7-羥(qiang)基(ji)-8-(ben"基(ji)偶(ou)氮(dan)基(ji))-,3-萘(nai)二磺suan"二鈉(na)鹽(yan),Orange G6
橙黃IV,四(si)號橙,桔黃IV,suan"性(xing)黃D,suan"性(xing)四號橙,金(jin)蓮橙OO,金(jin)橙(cheng)IV,二ben"胺(an)黃,4-[[4-(ben"基(ji)氨基(ji))ben"基]偶氮(dan)]ben"磺suan"單(dan)鈉(na)鹽(yan),二ben"胺(an)偶氮(dan)對(dui)ben"磺suan"鈉(na),Orange IV
橙(cheng)黃Ⅱ,suan"性(xing)橙II,金(jin)橙Ⅱ,suan"性金(jin)黃II,-萘(nai)酚(fen)偶(ou)氮(dan)對(dui)ben"磺suan"鈉(na),二號橙,桔黃Ⅱ,suan"性(xing)橙,β-萘(nai)酚(fen)橙(cheng),suan"性(xing)二號橙,suan"性(xing)橙7,4-(-羥(qiang)基(ji)--萘(nai)偶氮(dan))ben"磺suan"鈉(na)鹽(yan),金蓮(lian)橙OOO,β-萘(nai)酚(fen)偶(ou)氮(dan)對(dui)ben"磺suan"鈉(na),金(jin)黃粉(fen),-萘(nai)酚(fen)偶(ou)氮(dan)對(dui)ben"磺suan"鈉(na),Orange Ⅱ
橙(cheng)黃Ⅰ,金(jin)橙I,壹(yi)號橙,suan"性(xing)橙I,4-羥(qiang)基(ji)萘(nai)偶氮(dan)對(dui)ben"磺suan"鈉(na),-萘(nai)酚(fen)偶(ou)氮(dan)對(dui)ben"磺suan"鈉(na),4-[(4-羥(qiang)基(ji)--萘(nai)基)偶(ou)氮(dan)基(ji)]ben"磺suan"單(dan)鈉(na)鹽(yan),桔黃I,Orange Ⅰ
金(jin)胺(an)O,金絲雀(que)黃O,鹽(yan)基淡(dan)黃,堿性黃,堿性嫩黃O,鹽(yan)基槐(huai)黃,堿性槐黃,4,4'-碳(tan)亞氨(an)基雙(N,N-二甲基(ji)ben"胺(an))單鹽(yan)suan"鹽,堿性淡(dan)黃O,鹽(yan)suan"氨基(ji)四甲基(ji)二氨基(ji)ben"甲(jia)烷,金胺(an),金絲雀(que)黃,奧(ao)黃,Auramine O
企(qi)業信息
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