當前(qian)位(wei)置:首頁(ye) > 產(chan)品(pin)展示(shi) > PCR檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he) > 熒光(guang)-PCR法(fa) > 轉基(ji)因(yin)植(zhi)物NPTII基(ji)因(yin)核(he)酸檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)價(jia)格(ge)

使(shi)用(yong)方(fang)法(fa):
壹(yi)、樣(yang)品(pin) RNA 的制備(bei)
、用(yong)自選(xuan)方(fang)法(fa)抽(chou)提(ti)病(bing)毒(du)樣(yang)品(pin) RNA。註意:可(ke)以選(xuan)用(yong)本(ben)公(gong)司的壹(yi)管(guan)式病(bing)毒(du) RNAout
2、或(huo)柱式病(bing)毒(du) RNAout。
二(er):RT(逆(ni)轉錄)反應合(he)成 cDNA
. 按(an)下表(biao)配制 RT 反(fan)應體(ti)系(20 μL 體(ti)系)
2. 70℃保溫(wen) 5 分(fen)鐘(zhong)變(bian)性模板(ban)後(hou)立(li)即(ji)冰(bing)浴(yu)。
3. 嚴(yan)格(ge)按(an)順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuan)錄酶(含 RI),
反應終(zhong)體(ti)積為 20μL。
4. 42℃保(bao)溫(wen) 60 分鐘(zhong)。此(ci)步為 RT 反(fan)應(ying)。
5. 70℃保溫(wen) 0 分(fen)鐘(zhong)以終(zhong)止反應(ying),然(ran)後(hou)放(fang)置在冰上(shang)待用。合(he)成的(de) cDNA 可(ke)以直(zhi)接(jie)作(zuo)為 PCR 模(mo)板(ban)使(shi)用(yong),丌(ji)需(xu)要純化(hua)。
產品(pin)名稱:轉基(ji)因(yin)植(zhi)物NPTII基(ji)因(yin)核(he)酸檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)價(jia)格(ge)
規格(ge):48T/盒(he)
類(lei)別:熒光(guang)-PCR法(fa)
運輸:低溫、避光(guang)、快遞(di)免(mian)費送貨上(shang)門(men)。
用(yong)途(tu):生化(hua)實驗,合(he)成(cheng)實驗等試驗。
運(yun)輸及(ji)保(bao)存(cun):低溫運輸,-20℃保存, 保存(cun)期(qi)限(xian)為 6 個(ge)月(yue)。
自(zi)備試劑(ji):樣(yang)品(pin) RNA。
性能指標(biao):點(dian)擊了解(jie)更多(duo)熒光(guang)-PCR法(fa)。
.試劑(ji)盒(he)檢(jian)測(ce)特異性為00%
2. 檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)重(zhong)現(xian)性為00%
3. 靈敏(min)度可(ke)達(da)到(dao)03/ml
4. 有效(xiao)期為6個(ge)月(yue)
註(zhu)意事(shi)項:
①加入試劑(ji)的(de)順序應(ying)*,以保(bao)證(zheng)所有反(fan)應(ying)板(ban)孔(kong)溫育的時(shi)間(jian)壹(yi)樣(yang)。
②使(shi)用(yong)幹凈的(de)塑(su)料容(rong)器(qi)配置洗滌液。
③按(an)照(zhao)雞(ji)血紅蛋(dan)白(HB)ELISA檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)說(shuo)明書(shu)中標(biao)明的(de)時(shi)間(jian)、加液的(de)量及(ji)順序進(jin)行溫(wen)育操作(zuo)。
④底(di)物A應(ying)揮(hui)發,避免長時(shi)間(jian)打開蓋(gai)子(zi)。底(di)物(wu)B對光(guang)敏(min)感(gan),避免長時(shi)間(jian)暴露(lu)於(yu)光(guang)下。避免用手接觸(chu),有毒(du)。實(shi)驗完(wan)成(cheng)後應(ying)立(li)即(ji)讀(du)取(qu)OD值。
⑤洗(xi)滌(di)酶標(biao)板(ban)時(shi)應充分(fen)拍(pai)幹,不要將(jiang)吸(xi)水(shui)紙直(zhi)接放(fang)入酶標(biao)反(fan)應(ying)孔(kong)中吸(xi)水(shui)。
⑥使(shi)用(yong)壹(yi)次(ci)性的吸(xi)頭(tou)以免(mian)交(jiao)叉汙(wu)染,吸(xi)取(qu)終(zhong)止液和(he)底(di)物A、B液時(shi),避免使(shi)用(yong)帶(dai)金屬(shu)部分(fen)的(de)加樣(yang)器(qi) 。
⑦實(shi)驗中(zhong)不(bu)用的(de)板(ban)條(tiao)應立(li)即(ji)放(fang)回包(bao)裝(zhuang)袋(dai)中(zhong),密封保存,以免(mian)變(bian)質。
⑧試劑(ji)應(ying)按(an)標簽(qian)說(shuo)明書(shu)儲存(cun),使(shi)用(yong)前(qian)恢復(fu)到(dao)室溫。稀(xi)稀(xi)過後(hou)的標(biao)準品(pin)應丟(diu)棄(qi),不可(ke)保存。
⑨不用的其(qi)它(ta)試劑(ji)應(ying)包(bao)裝(zhuang)好(hao)或(huo)蓋(gai)好。不同(tong)批號(hao)的試劑(ji)不(bu)要混用(yong)。保(bao)質前(qian)使(shi)用(yong)。
反(fan)應(ying)五要素(su):
參(can)加PCR反應(ying)的物(wu)質(zhi)主要有五(wu)種(zhong)即(ji)引物、酶、dNTP、模(mo)板(ban)和(he)Mg2+
引物(wu):引物(wu)是PCR特異性反應的(de)關鍵(jian),PCR 產物(wu)的特異性取(qu)決於(yu)引物(wu)與(yu)模(mo)板(ban)DNA互(hu)補(bu)的(de)程(cheng)度。理論(lun)上(shang),只要知(zhi)道任(ren)何(he)壹(yi)段模(mo)板(ban)DNA序列(lie), 就能(neng)按(an)其(qi)設計互(hu)補(bu)的(de)寡(gua)核(he)苷酸鏈(lian)做(zuo)引(yin)物,利(li)用(yong)PCR就可(ke)將模板(ban)DNA在體(ti)外大(da)量擴增(zeng)。設計引物應(ying)遵(zun)循以下原則:
①引(yin)物(wu)長度: 5-30bp,常用(yong)為20bp左(zuo)右。
②引物擴增(zeng)跨度: 以200-500bp為宜(yi),特定(ding)條件(jian)下可(ke)擴增(zeng)長至0kb的片(pian)段(duan)。
③引物堿(jian)基(ji):G+C含量以40-60%為宜(yi),G+C太(tai)少擴增(zeng)效(xiao)果不(bu)佳,G+C過多(duo)易出(chu)現非(fei)特異條帶(dai)。ATGC隨機(ji)分布(bu),避免5個以上(shang)的嘌呤(ling)或(huo)嘧(mi)啶(ding)核(he)苷酸的(de)成(cheng)串(chuan)排列(lie)。
④避免引物內(nei)部出(chu)現(xian)二級結(jie)構,避免兩條引物(wu)間(jian)互(hu)補(bu),特別是3'端(duan)的(de)互(hu)補(bu),否則會形成(cheng)引(yin)物二(er)聚(ju)體(ti),產生非(fei)特異的擴增(zeng)條帶(dai)。
⑤引物(wu)3'端(duan)的(de)堿基(ji),特別是末(mo)及(ji)倒(dao)數第二(er)個(ge)堿(jian)基(ji),應(ying)嚴(yan)格(ge)要求(qiu)配對,以避免因(yin)末(mo)端(duan)堿(jian)基(ji)不(bu)配對而導致(zhi)PCR失(shi)敗(bai)。
⑥引物中有或(huo)能(neng)加上(shang)合適的酶切位(wei)點(dian), 被(bei)擴增(zeng)的靶序列(lie)有適(shi)宜(yi)的(de)酶切位(wei)點(dian), 這(zhe)對酶切分(fen)析(xi)或(huo)分(fen)子(zi)克隆(long)很(hen)有好(hao)處(chu)。
⑦引物(wu)的(de)特異性:引物應(ying)與(yu)核(he)酸序列(lie)數據(ju)庫的(de)其(qi)它(ta)序列(lie)無明顯(xian)同(tong)源性。
引物量:每(mei)條(tiao)引物(wu)的濃(nong)度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chan)生所需(xu)要的(de)結(jie)果為好(hao),引(yin)物濃(nong)度偏高(gao)會引起(qi)錯配和非(fei)特異性擴增(zeng),且可(ke)增(zeng)加引物(wu)之(zhi)間(jian)形成(cheng)二聚(ju)體(ti)的機會。
3-啶硼(peng)片(pian)吶(na)酯(zhi) 00mL TES Buffer,0.2M,pH8.0 常溫(wen)保(bao)存
2-氨(an)基(ji)噻(sai)唑(zuo)-5-羧乙酯 250mL Thrombin Buffer 常溫(wen)保(bao)存
4-氟(fu)-3-硝苯甲酯 250mL Tissue Embedding Reagent 常溫(wen)保(bao)存
二(er)溴新(xin)戊(wu)二(er)醇 000mL Transfer or Electro Blotting Buffer,0X 常溫(wen)保(bao)存
4-三(san)氟(fu)甲氧苯(ben)甲(jia) 00mL Transformation Buffer- 常溫(wen)保(bao)存
4-氨(an)基(ji)四(si)氫(qing)吡喃鹽(yan)鹽(yan) 00mL Transformation Buffer-2 常溫(wen)保(bao)存
Boc-beta-丙(bing)氨 00mL Tricine Buffer,0.5M pH6.5 常溫(wen)保(bao)存
多(duo)肽(tai)試劑(ji) TCTU 00mL Tricine Buffer,0.5M pH7.0 常溫(wen)保(bao)存
5-冠醚-5 00mL Tricine Buffer,0.5M pH7.4 常溫(wen)保(bao)存
3-氟(fu)苯乙 00mL Tricine Buffer,0.5M,pH8.0 常溫(wen)保(bao)存
5-氟(fu)-2-基(ji)甲(jia) 00mL Tricine Buffer,0.5M,pH8.5 常溫(wen)保(bao)存
L-丙(bing)氨胺鹽(yan)鹽(yan) 00mL Tricine Buffer,0.5M,pH9.0 常溫(wen)保(bao)存
4-三(san)氟(fu)甲氧苯(ben) 500mL Tricine Buffered Saline,5X,pH7.0 常溫(wen)保(bao)存
6-氯(lv)-3-基(ji)啶(ding) 500mL Tricine Buffered Saline,5X,pH7.4 常溫(wen)保(bao)存
2-氯(lv)-4-基(ji)啶(ding) 2500mL Tricine Buffered Saline,5X,pH8.0 常溫(wen)保(bao)存
轉(zhuan)基(ji)因(yin)植(zhi)物NPTII基(ji)因(yin)核(he)酸檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)價(jia)格(ge)Cq(Complement q) 人(ren)補(bu)體(ti)q CAS: 76350-28-2 規格(ge): 50mg
GP- IV (platelet membrane glycoprotein IV ) 人(ren)血小板(ban)膜(mo)糖蛋(dan)白Ⅳ CAS: 2276-90-6 規格(ge): 200mg
Thymosin Alpha 人(ren)α CAS: 8777-40-2 規格(ge): 200mg
CCP(complement control protein) 人(ren)補(bu)體(ti)調節蛋(dan)白 CAS: 7680-93-9 規格(ge): 50mg
PBP/CXCL7(platelet basic protein) 人(ren)血小板(ban)堿(jian)性蛋(dan)白 CAS: 0457-96-6 規格(ge): 50mg
HLA-C(leukocyte antigen C) 人(ren)類(lei)白細胞抗(kang)原C CAS: 5907-64-0 規格(ge): 00mg
HLA-E(leukocyte antigen E) 人(ren)類(lei)白細胞抗(kang)原E CAS: 07793-72-6 規格(ge): 400mg
HLA-A(leukocyte antigen A) 人(ren)類(lei)白細胞抗(kang)原A CAS: 2287-58-5 規格(ge): 00mg
SAP(Serum amyloid P) 人(ren)血清澱(dian)粉樣(yang)蛋(dan)白P CAS: 22-56-3 規格(ge): 200mg
MBLR(Mannma binding lectin receptor) 人(ren)甘(gan)露(lu)糖凝集素受(shou)體(ti) CAS: 66985-7-9 規格(ge): 00mg
PL/Fbn(plasmin/fibrinolysin) 人(ren)纖溶(rong)酶/纖維(wei)蛋(dan)白溶酶 CAS: 58005-8-8 規格(ge): 0mg
BCR(B cell receptor) 人(ren)B細胞受(shou)體(ti) CAS: 58073-59-9 規格(ge): 0mg
mIgM(membrane IgM) 人(ren)表(biao)面(mian)膜(mo)免(mian)疫(yi)球(qiu)蛋(dan)白M CAS: 552-63-6 規格(ge): 5mg
mIgD(membrane IgD) 人(ren)表(biao)面(mian)膜(mo)免(mian)疫(yi)球(qiu)蛋(dan)白D CAS: 36572-09-3 規格(ge): 00mg
KIR(killer cell immnoglobulin-like receptor) 人(ren)殺(sha)傷細胞免疫(yi)球(qiu)蛋(dan)白樣(yang)受(shou)體(ti) CAS: 9685-09-7 規格(ge): 0mg
企(qi)業信(xin)息
ENTERPRISE INFORMATION上(shang)海谷研實業(ye)有限(xian)公(gong)司
3004918891發送信件(jian)產品(pin)分類
CLASSIFICATION相關文章
RELATED ARTICLES
掃碼加微(wei)信
移(yi)動(dong)端(duan)瀏(liu)覽