當(dang)前位(wei)置:首(shou)頁(ye) > 產(chan)品展(zhan)示 > PCR檢(jian)測試(shi)劑盒 > 熒光(guang)-PCR法 > 轉基因水(shui)稻LLRICE60核酸(suan)檢測試(shi)劑盒品牌

使(shi)用(yong)方法:
壹、樣品(pin) RNA 的制(zhi)備
、用自選(xuan)方法抽提病毒(du)樣品(pin) RNA。註(zhu)意(yi):可(ke)以(yi)選(xuan)用本公司(si)的壹管式病毒(du) RNAout
2、或(huo)柱(zhu)式病毒(du) RNAout。
二:RT(逆轉錄(lu))反(fan)應合成 cDNA
. 按下(xia)表配(pei)制(zhi) RT 反(fan)應體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分(fen)鐘(zhong)變(bian)性模(mo)板(ban)後(hou)立(li)即(ji)冰(bing)浴(yu)。
3. 嚴格按順(shun)序加(jia)入(ru) 6μL RT Buffer(含(han) dNTP)和 2μL MMLV 逆轉錄(lu)酶(mei)(含(han) RI),
反應(ying)終體(ti)積(ji)為(wei) 20μL。
4. 42℃保溫 60 分(fen)鐘(zhong)。此步(bu)為(wei) RT 反應。
5. 70℃保溫 0 分(fen)鐘(zhong)以(yi)終(zhong)止反應(ying),然後(hou)放(fang)置(zhi)在冰(bing)上待用。合成的 cDNA 可以(yi)直(zhi)接作為(wei) PCR 模板使用,丌(ji)需(xu)要(yao)純化。
產品(pin)名(ming)稱:轉基因水(shui)稻LLRICE60核酸(suan)檢測試(shi)劑盒品牌
規(gui)格:48T/盒
類(lei)別:熒光(guang)-PCR法
運輸(shu):低(di)溫、避光、快(kuai)遞(di)免費(fei)送貨(huo)上門。
用途:生化實驗,合成實驗等試(shi)驗。
運輸(shu)及(ji)保(bao)存(cun):低(di)溫運輸(shu),-20℃保(bao)存(cun), 保(bao)存(cun)期限(xian)為(wei) 6 個月。
自備試(shi)劑:樣品(pin) RNA。
性能(neng)指(zhi)標:點(dian)擊(ji)了解(jie)更(geng)多熒光(guang)-PCR法。
.試(shi)劑盒檢測特(te)異(yi)性為(wei)00%
2. 檢測試(shi)劑盒重(zhong)現(xian)性為(wei)00%
3. 靈敏度(du)可達(da)到(dao)03/ml
4. 有(you)效期為(wei)6個月
註意(yi)事(shi)項(xiang):
①加(jia)入試(shi)劑的順序應(ying)*,以(yi)保(bao)證(zheng)所(suo)有(you)反應(ying)板孔(kong)溫育的時間壹樣。
②使(shi)用(yong)幹凈的塑料(liao)容(rong)器配置(zhi)洗(xi)滌液。
③按(an)照雞血(xue)紅(hong)蛋(dan)白(HB)ELISA檢測試(shi)劑盒說明(ming)書(shu)中標明(ming)的時間、加液的量及順(shun)序(xu)進(jin)行(xing)溫育操(cao)作(zuo)。
④底物A應(ying)揮(hui)發(fa),避免長時間打(da)開(kai)蓋子。底(di)物B對(dui)光敏(min)感,避免長時間暴露於(yu)光下(xia)。避免用手接(jie)觸(chu),有(you)毒(du)。實驗完成後(hou)應(ying)立(li)即(ji)讀(du)取OD值。
⑤洗滌酶(mei)標板時應充分(fen)拍幹,不(bu)要(yao)將吸水紙直接(jie)放(fang)入(ru)酶標反應(ying)孔中吸水。
⑥使用壹(yi)次(ci)性的吸頭以(yi)免交(jiao)叉(cha)汙(wu)染,吸取終(zhong)止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬(shu)部分(fen)的加樣器 。
⑦實驗中不(bu)用的板條(tiao)應(ying)立(li)即(ji)放(fang)回(hui)包(bao)裝(zhuang)袋中,密(mi)封(feng)保(bao)存(cun),以(yi)免變質。
⑧試(shi)劑應按標簽(qian)說明(ming)書(shu)儲(chu)存,使(shi)用(yong)前恢(hui)復(fu)到(dao)室(shi)溫。稀(xi)稀(xi)過後(hou)的標準品(pin)應丟(diu)棄(qi),不(bu)可保存。
⑨不(bu)用的其它試(shi)劑應包(bao)裝(zhuang)好(hao)或(huo)蓋好(hao)。不(bu)同批(pi)號的試(shi)劑不(bu)要(yao)混(hun)用(yong)。保(bao)質前(qian)使(shi)用(yong)。
反(fan)應五要(yao)素(su):
參(can)加(jia)PCR反(fan)應的物質(zhi)主要(yao)有(you)五種(zhong)即(ji)引物、酶(mei)、dNTP、模板(ban)和Mg2+
引物:引物是(shi)PCR特(te)異性反(fan)應(ying)的關鍵(jian),PCR 產物的特異性取決(jue)於(yu)引物與(yu)模(mo)板(ban)DNA互(hu)補(bu)的程度(du)。理論(lun)上,只要(yao)知(zhi)道(dao)任何壹段模(mo)板(ban)DNA序列(lie), 就(jiu)能(neng)按(an)其(qi)設(she)計互補(bu)的寡(gua)核苷(gan)酸(suan)鏈做(zuo)引物,利用PCR就(jiu)可(ke)將模板(ban)DNA在體(ti)外(wai)大量擴(kuo)增。設(she)計引物應(ying)遵(zun)循以(yi)下(xia)原則:
①引物長度(du): 5-30bp,常用為(wei)20bp左右。
②引物擴(kuo)增跨(kua)度(du): 以(yi)200-500bp為(wei)宜,特定條(tiao)件下(xia)可擴(kuo)增長至(zhi)0kb的片(pian)段。
③引物堿(jian)基:G+C含(han)量以(yi)40-60%為(wei)宜,G+C太少(shao)擴(kuo)增效(xiao)果不(bu)佳,G+C過多易出現(xian)非(fei)特異(yi)條(tiao)帶。ATGC隨機分(fen)布,避免5個以(yi)上的嘌呤或(huo)嘧啶核苷(gan)酸(suan)的成串排列(lie)。
④避免引物內(nei)部(bu)出現(xian)二級結(jie)構,避免兩條(tiao)引物間(jian)互補(bu),特(te)別是(shi)3'端的互補(bu),否則會(hui)形成引物二(er)聚體(ti),產(chan)生(sheng)非(fei)特異(yi)的擴(kuo)增條(tiao)帶。
⑤引物3'端的堿(jian)基,特別是(shi)末及倒數第二個(ge)堿(jian)基,應嚴(yan)格要(yao)求(qiu)配(pei)對,以(yi)避免因末端堿(jian)基不(bu)配對而(er)導(dao)致(zhi)PCR失敗(bai)。
⑥引物中有(you)或(huo)能(neng)加(jia)上合適的酶切位(wei)點(dian), 被擴(kuo)增的靶序(xu)列(lie)有(you)適宜的酶切位(wei)點(dian), 這(zhe)對酶(mei)切分(fen)析(xi)或(huo)分(fen)子(zi)克(ke)隆(long)很(hen)有(you)好(hao)處。
⑦引物的特異性:引物應(ying)與(yu)核(he)酸(suan)序(xu)列(lie)數據庫的其它序(xu)列(lie)無明(ming)顯(xian)同源性。
引物量:每(mei)條(tiao)引物的濃度(du)0.~umol或(huo)0~00pmol,以(yi)低(di)引物量產生(sheng)所(suo)需(xu)要(yao)的結果為(wei)好(hao),引物濃(nong)度(du)偏高(gao)會(hui)引起錯配和非(fei)特異(yi)性擴(kuo)增,且(qie)可增(zeng)加(jia)引物之間(jian)形(xing)成二聚(ju)體的機會。
5-基煙 000mL TBE Running Buffer,0X 常溫保存(cun)
4-基啶-3-羧(suo) 25mL TBE Sample Buffer,6X 常溫保存(cun)
2-基煙 0mL TBE Urea Sample Buffer,2X 常溫保存(cun)
3,5-雙(shuang)三(san)氟(fu)基芐(bian)溴 000mL TBE,0X 常溫保存(cun)
3-環丙(bing)基-3-氧(yang)代(dai)丙酯 2000mL TBE,5X 常溫保存(cun)
二(三(san)氯基)碳酯 000mL TBS-EDTA Solution,0X 常溫保存(cun)
嗎(ma)啉(lin)-4-基乙 500mL TBS-Tween-20 (TTBS),0X 常溫保存(cun)
苯二(er)乙(yi) 500mL TBS-Tween-20 (TTBS),0X,in Classical TBS) 常溫保存(cun)
四丁(ding)基氫銨 000mL TBS-Tween-20 (TTBS),20X 常溫保存(cun)
硝銅(tong) 500mL TBS-Tween-20 (TTBS),20X,in Classical TBS) 常溫保存(cun)
對基乙胺(an) 500mL TBS-Tween-20 (TTBS),20X,pH7.6 常溫保存(cun)
BOC-L-絲氨(an) 00mL TE Buffer,00X,pH7.4 常溫保存(cun)
D-(+)-二對(dui)基甲酰酒(jiu)石 00mL TE Buffer,00X,pH7.6 常溫保存(cun)
2-噻(sai)吩(fen)甲酰三(san)氟(fu)丙(bing) 00mL TE Buffer,00X,pH8.0 常溫保存(cun)
5-硝基二氫吲(yin)哚(duo) 250mL TE Buffer,20X,pH7.4 常溫保存(cun)
轉基因水(shui)稻LLRICE60核酸(suan)檢測試(shi)劑盒品牌anti-RV IgM(anti-rubella virus IgM antibody,anti-RV IgM) 人抗風疹(zhen)病毒(du)IgM抗體 CAS: 860-22-0 規(gui)格: 500mg
OT(oxytocin) 人催(cui)產素(su) CAS: 80683-37-8 規(gui)格: 00mg
PAPP-A(pregnancy associated plasma protein A) 人相(xiang)關血(xue)漿(jiang)蛋(dan)白A CAS: 80683-37-8 規(gui)格: 00mg
EMAb(Endometrium Antibody,EMAb ) 人抗子宮(gong)內(nei)膜(mo)抗體 CAS: 3599-32-4 規(gui)格: 200mg
AsAb(anti-sperm antibody) 人抗抗體 CAS: 87-89-8 規(gui)格: 500mg
HG(Herpes Gestation) 人皰疹(zhen)抗體 CAS: 53-86- 規(gui)格: 200mg
PLGF(placenta growth factor) 人胎(tai)盤生(sheng)長因子 CAS: 2594965 規(gui)格: 00mg
TM(Thrombin) 人 CAS: 規(gui)格: ea
F VII (coagulation factor VII ) 人Ⅶ CAS: 06-68-0 規(gui)格: 00mg
sHLA-G(soluble leucocyte antigen G) 人可(ke)溶性白細胞(bao)抗原G CAS: 06-68-0 規(gui)格: 支
PT(Prothrombin0 人原 CAS: 070-73-8 規(gui)格: 00mg
CFD(complement factor D) 人補(bu)體(ti)因(yin)子(zi)D CAS: 2584-58-6 規(gui)格: 00mg
pFN(Plasma fibronectin) 人血(xue)漿(jiang)纖(xian)維連(lian)接(jie)蛋(dan)白 CAS: 3307-64-9 規(gui)格: 5.97mg
cFn(cellular fibronectin) 人細(xi)胞(bao)纖(xian)維連(lian)接(jie)蛋(dan)白 CAS: 606-7-7 規(gui)格: 200mg
TPS(Total protein S) 人總蛋(dan)白S CAS: 92339--2 規(gui)格: 200mg
企(qi)業(ye)信(xin)息
ENTERPRISE INFORMATION上海谷研(yan)實業(ye)有(you)限(xian)公司(si)
3004918891發(fa)送(song)信(xin)件產品(pin)分(fen)類(lei)
CLASSIFICATION相(xiang)關文(wen)章(zhang)
RELATED ARTICLES聯(lian)系方式
郵(you)箱(xiang):[email protected] 地址(zhi):上海市嘉定(ding)區澄瀏公路(lu)52號(hao)盛(sheng)創(chuang)企(qi)業(ye)
掃(sao)碼(ma)加微(wei)信(xin)
移動端瀏覽(lan)