當(dang)前(qian)位(wei)置:首頁(ye) > 產品(pin)展(zhan)示 > PCR檢(jian)測(ce)試劑盒 > 熒(ying)光-PCR法(fa) > 轉(zhuan)基(ji)因大(da)豆EPSPS基(ji)因核(he)酸檢(jian)測(ce)試劑盒

使(shi)用方(fang)法(fa):
壹、樣品(pin) RNA 的制備
、用自(zi)選方(fang)法(fa)抽提病毒(du)樣(yang)品(pin) RNA。註(zhu)意(yi):可以選用本(ben)公司的壹管(guan)式(shi)病毒(du) RNAout
2、或柱(zhu)式(shi)病毒(du) RNAout。
二(er):RT(逆轉(zhuan)錄)反(fan)應(ying)合(he)成 cDNA
. 按(an)下(xia)表配制(zhi) RT 反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)(20 μL 體(ti)系(xi))
2. 70℃保(bao)溫(wen) 5 分(fen)鐘變性(xing)模板後(hou)立即冰浴(yu)。
3. 嚴格按(an)順序(xu)加(jia)入(ru) 6μL RT Buffer(含(han) dNTP)和(he) 2μL MMLV 逆轉(zhuan)錄酶(mei)(含 RI),
反(fan)應(ying)終體(ti)積(ji)為(wei) 20μL。
4. 42℃保(bao)溫(wen) 60 分(fen)鐘。此步為(wei) RT 反(fan)應(ying)。
5. 70℃保(bao)溫(wen) 0 分(fen)鐘以終止反(fan)應(ying),然(ran)後(hou)放(fang)置在冰上待(dai)用。合(he)成的 cDNA 可以直接作(zuo)為(wei) PCR 模板使(shi)用,丌(ji)需要(yao)純(chun)化(hua)。
產品(pin)名稱(cheng):轉(zhuan)基(ji)因大(da)豆EPSPS基(ji)因核(he)酸檢(jian)測(ce)試劑盒
規格:48T/盒
類別:熒(ying)光-PCR法(fa)
運(yun)輸(shu):低(di)溫(wen)、避(bi)光(guang)、快(kuai)遞(di)免(mian)費送(song)貨(huo)上門(men)。
用途:生(sheng)化(hua)實(shi)驗(yan),合(he)成實(shi)驗(yan)等試驗(yan)。
運(yun)輸(shu)及(ji)保(bao)存:低溫(wen)運(yun)輸(shu),-20℃保(bao)存, 保(bao)存期限(xian)為(wei) 6 個(ge)月。
自(zi)備試劑:樣(yang)品(pin) RNA。
性(xing)能(neng)指(zhi)標(biao):點(dian)擊了解(jie)更(geng)多熒(ying)光-PCR法(fa)。
.試劑盒檢(jian)測(ce)特(te)異(yi)性(xing)為(wei)00%
2. 檢(jian)測(ce)試劑盒重(zhong)現(xian)性(xing)為(wei)00%
3. 靈敏(min)度可(ke)達到(dao)03/ml
4. 有效(xiao)期(qi)為(wei)6個(ge)月
註(zhu)意(yi)事(shi)項:
①加(jia)入(ru)試劑的順序(xu)應(ying)*,以保(bao)證(zheng)所有反(fan)應(ying)板孔(kong)溫育(yu)的時間(jian)壹(yi)樣(yang)。
②使(shi)用幹(gan)凈的塑(su)料容器配置洗(xi)滌液。
③按(an)照(zhao)雞血(xue)紅蛋(dan)白(HB)ELISA檢(jian)測(ce)試劑盒說(shuo)明(ming)書(shu)中(zhong)標(biao)明(ming)的時間(jian)、加(jia)液的量(liang)及(ji)順序(xu)進(jin)行(xing)溫(wen)育(yu)操(cao)作(zuo)。
④底(di)物A應(ying)揮發,避(bi)免(mian)長時間(jian)打(da)開蓋(gai)子。底(di)物B對(dui)光敏感(gan),避免(mian)長時間(jian)暴露(lu)於(yu)光下(xia)。避免(mian)用手接觸,有(you)毒(du)。實(shi)驗(yan)完成(cheng)後(hou)應(ying)立即讀取OD值(zhi)。
⑤洗(xi)滌酶(mei)標板(ban)時應(ying)充(chong)分(fen)拍幹,不要(yao)將吸水(shui)紙直接放(fang)入(ru)酶(mei)標反(fan)應(ying)孔中(zhong)吸水(shui)。
⑥使用壹(yi)次(ci)性的吸頭(tou)以免(mian)交叉汙(wu)染(ran),吸取終(zhong)止(zhi)液和(he)底(di)物A、B液時,避(bi)免(mian)使(shi)用帶金屬部(bu)分(fen)的加(jia)樣器 。
⑦實(shi)驗(yan)中不用的板條(tiao)應(ying)立即放(fang)回(hui)包裝(zhuang)袋中,密(mi)封(feng)保(bao)存,以免(mian)變(bian)質(zhi)。
⑧試劑應(ying)按(an)標簽說明(ming)書(shu)儲(chu)存,使用前(qian)恢復到(dao)室(shi)溫。稀(xi)稀(xi)過(guo)後(hou)的標準(zhun)品(pin)應(ying)丟棄(qi),不可(ke)保(bao)存。
⑨不用的其(qi)它試劑應(ying)包裝(zhuang)好或蓋(gai)好。不同(tong)批(pi)號(hao)的試劑不要(yao)混(hun)用。保(bao)質(zhi)前使用。
反(fan)應(ying)五要(yao)素(su):
參加(jia)PCR反(fan)應(ying)的物質主(zhu)要(yao)有五(wu)種(zhong)即(ji)引物(wu)、酶(mei)、dNTP、模板和(he)Mg2+
引物(wu):引物(wu)是PCR特(te)異(yi)性(xing)反(fan)應(ying)的關鍵(jian),PCR 產物的特(te)異(yi)性(xing)取決(jue)於(yu)引物(wu)與(yu)模板DNA互(hu)補的程度(du)。理(li)論(lun)上,只要(yao)知(zhi)道(dao)任(ren)何壹(yi)段(duan)模板DNA序(xu)列(lie), 就能(neng)按(an)其(qi)設(she)計(ji)互補(bu)的寡核苷(gan)酸(suan)鏈(lian)做(zuo)引物(wu),利用PCR就可(ke)將(jiang)模板DNA在(zai)體(ti)外(wai)大(da)量(liang)擴增。設(she)計(ji)引物(wu)應(ying)遵循以下(xia)原(yuan)則(ze):
①引物(wu)長度: 5-30bp,常(chang)用為(wei)20bp左右。
②引物(wu)擴增跨度(du): 以200-500bp為(wei)宜(yi),特(te)定條(tiao)件下(xia)可擴增長至(zhi)0kb的片(pian)段(duan)。
③引物(wu)堿基(ji):G+C含量(liang)以40-60%為(wei)宜(yi),G+C太(tai)少擴增效果(guo)不佳(jia),G+C過(guo)多易(yi)出現(xian)非(fei)特(te)異(yi)條(tiao)帶。ATGC隨機分(fen)布,避免(mian)5個(ge)以上的嘌呤或嘧(mi)啶(ding)核(he)苷(gan)酸(suan)的成串(chuan)排列(lie)。
④避(bi)免(mian)引物(wu)內(nei)部(bu)出現(xian)二(er)級(ji)結構,避免(mian)兩(liang)條(tiao)引物(wu)間(jian)互(hu)補(bu),特(te)別是3'端(duan)的互補,否則(ze)會(hui)形成引物(wu)二聚體(ti),產生(sheng)非(fei)特(te)異(yi)的擴增條(tiao)帶。
⑤引物(wu)3'端(duan)的堿基(ji),特(te)別是末及倒數(shu)第(di)二(er)個(ge)堿基(ji),應(ying)嚴格要(yao)求配對(dui),以避免(mian)因(yin)末端(duan)堿基(ji)不配對(dui)而(er)導(dao)致PCR失(shi)敗。
⑥引物(wu)中有或能(neng)加(jia)上合(he)適的酶(mei)切位(wei)點, 被(bei)擴增的靶(ba)序(xu)列(lie)有(you)適宜(yi)的酶(mei)切位(wei)點, 這(zhe)對(dui)酶(mei)切分(fen)析或分(fen)子克(ke)隆(long)很有(you)好處。
⑦引物(wu)的特(te)異(yi)性(xing):引物(wu)應(ying)與(yu)核(he)酸(suan)序(xu)列(lie)數(shu)據(ju)庫的其(qi)它序(xu)列(lie)無(wu)明(ming)顯(xian)同(tong)源(yuan)性(xing)。
引物(wu)量(liang):每(mei)條(tiao)引物(wu)的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物(wu)量(liang)產生(sheng)所(suo)需(xu)要(yao)的結果(guo)為(wei)好,引物(wu)濃度偏高會(hui)引起錯(cuo)配和(he)非(fei)特(te)異(yi)性(xing)擴增,且(qie)可增加(jia)引物(wu)之間(jian)形成二(er)聚體(ti)的機會(hui)。
3-氟-4-溴(xiu)-苯乙酮 500mL Sodium Phosphate Buffer,0.2M,pH8.5 常(chang)溫保(bao)存
三乙基(ji)膦酰(xian)乙酯 500mL Sodium Phosphate Buffer,0.2M,pH9.0 常(chang)溫保(bao)存
多聚甲 500mL Sodium Phosphate Buffer,0.2M,pH9.5 常(chang)溫保(bao)存
丙烯(xi)縮(suo)二(er)乙醇 250mL Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH7.0 常(chang)溫保(bao)存
,2,4-丁(ding)三醇(chun) 250mL Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH7.4 常(chang)溫保(bao)存
分(fen)子篩(shai) 250mL Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH7.5 常(chang)溫保(bao)存
2-氯-4,6-二(er)基(ji)啶(ding) 250mL Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH7.6 常(chang)溫保(bao)存
鈦乙酯 250mL Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH8.0 常(chang)溫保(bao)存
N-叔丁(ding)氧(yang)羰基(ji)-L-谷(gu)氨(an) -芐(bian)酯 250mL Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH8.5 常(chang)溫保(bao)存
Boc-L-天冬氨(an) -芐(bian)酯 250mL Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH9.0 常(chang)溫保(bao)存
4-氨(an)基(ji)-2,5-二基(ji)酚 250mL Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH9.5 常(chang)溫保(bao)存
5-氨(an)基(ji)--基(ji)吡唑-4-甲乙酯 00mL Sodium Pyrophosphate Solution,200mM 常(chang)溫保(bao)存
3-(三氟基(ji))苯鹽鹽 500mL Sodium-free Lactated Buffered Ringer’s Solution 常(chang)溫保(bao)存
四丁(ding)基(ji)化(hua)銨(an) 000mL SSC,20X 常(chang)溫保(bao)存
苯甲碸 000mL SSPE,20X,pH7.4 常(chang)溫保(bao)存
轉(zhuan)基(ji)因大(da)豆EPSPS基(ji)因核(he)酸檢(jian)測(ce)試劑盒ADP(Adenosine diphosphate) 人(ren)二(er)磷腺(xian)苷(gan) CAS: 82240-09-3 規格: 25mg
PG(Proteoglycan) 人(ren)蛋(dan)白聚糖 CAS: 56-29- 規格: 500mg
PYD(Pyridinoline) 人(ren)吡啶(ding)酚(fen) CAS: 532-76-3 規格: g
5-HIAA(5-hydroxyindolacetic acid) 人(ren)5羥基(ji)吲哚(duo)乙 CAS: 07-4-5 規格: 25mg
2-HETE(20-hydroxyeicosatetraenoic acid) 人(ren)2羥二十(shi)烷(wan)四(si)烯(xi) CAS: 36-77-6 規格: 200mg
Hyp(hydroxyproline) 人(ren)羥脯(pu)氨(an) CAS: 7-00- 規格: 200mg
NO(nitric oxide) 人(ren)壹(yi)氧(yang)化(hua)氮(dan) CAS: 56-92-8 規格: 250mg
ENA-78/CXCL5(Epithelial neutrophil activating peptide 78) 人(ren)上皮(pi)中性粒(li)細胞活(huo)化(hua)肽78 CAS: 5-56-9 規格: 200mg
VC(Vitamin C) 人(ren) CAS: 80-49-9 規格: 250mg
VB6(Vitamin B6) 人(ren)6 CAS: 9003-07-0 規格: 3 strips
sP-selectin(soluble P-selectin) 人(ren)可(ke)溶(rong)性P選(xuan)擇素(su) CAS: 8-56-9 規格: 500mg
TIMP-(tissue inhibitors of metalloproteinase ) 人(ren)基(ji)質金(jin)屬蛋(dan)白酶(mei)抑制(zhi)因子 CAS: 304-20- 規格: 200mg
VD(Vitamin D) 人(ren) CAS: 8-08- 規格: 0mg
VK(Vitamin K) 人(ren) CAS: 58-93-5 規格: 200mg
VB2(Vitamin B2) 人(ren)2 CAS: 35-09- 規格: 200mg
企業信(xin)息(xi)
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