當(dang)前位(wei)置(zhi):首(shou)頁 > 產(chan)品展示 > PCR檢測試劑盒(he) > 熒光-PCR法 > 山羊(yang)CYTB基(ji)因核酸檢測試劑盒(he)

性(xing)能指(zhi)標:點擊了解(jie)更(geng)多熒光-PCR法。
.試劑盒(he)檢測特異(yi)性(xing)為00%
2. 檢測試劑盒(he)重(zhong)現性為00%
3. 靈(ling)敏度可達(da)到(dao)03/ml
4. 有(you)效(xiao)期(qi)為6個月(yue)
產(chan)品名稱:山羊(yang)CYTB基(ji)因核酸檢測試劑盒(he)
規格:48T/盒(he)
類別(bie):熒光-PCR法
運(yun)輸:低(di)溫(wen)、避光、快(kuai)遞免(mian)費送(song)貨(huo)上(shang)門。
用(yong)途(tu):生(sheng)化實驗(yan),合(he)成(cheng)實驗(yan)等(deng)試驗(yan)。
運(yun)輸及(ji)保(bao)存:低溫(wen)運(yun)輸,-20℃保(bao)存, 保(bao)存期(qi)限(xian)為 6 個月(yue)。
自(zi)備試劑:樣(yang)品 RNA。
使(shi)用(yong)方(fang)法:
壹、樣(yang)品 RNA 的(de)制備
、用(yong)自(zi)選方法抽(chou)提病(bing)毒(du)樣(yang)品 RNA。註意:可(ke)以(yi)選用(yong)本(ben)公(gong)司的(de)壹(yi)管式(shi)病(bing)毒(du) RNAout
2、或(huo)柱式(shi)病(bing)毒(du) RNAout。
二(er):RT(逆轉錄(lu))反應(ying)合(he)成(cheng) cDNA
. 按下(xia)表(biao)配(pei)制 RT 反應(ying)體(ti)系(xi)(20 μL 體(ti)系(xi))
2. 70℃保(bao)溫(wen) 5 分(fen)鐘變性模(mo)板(ban)後立即冰(bing)浴。
3. 嚴(yan)格(ge)按(an)順(shun)序(xu)加(jia)入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和(he) 2μL MMLV 逆轉錄(lu)酶(含 RI),
反應(ying)終體(ti)積(ji)為 20μL。
4. 42℃保(bao)溫(wen) 60 分(fen)鐘。此步為 RT 反應(ying)。
5. 70℃保(bao)溫(wen) 0 分(fen)鐘以(yi)終止反應(ying),然後放置(zhi)在冰(bing)上待(dai)用(yong)。合(he)成(cheng)的(de) cDNA 可(ke)以(yi)直(zhi)接(jie)作為 PCR 模(mo)板(ban)使(shi)用(yong),丌(ji)需要純(chun)化。
反應(ying)五要素(su):
參加PCR反應(ying)的(de)物(wu)質(zhi)主(zhu)要有(you)五種即(ji)引(yin)物(wu)、酶、dNTP、模(mo)板(ban)和Mg2+
引(yin)物(wu):引(yin)物(wu)是PCR特異(yi)性(xing)反應(ying)的(de)關鍵,PCR 產(chan)物的(de)特異(yi)性(xing)取決(jue)於引(yin)物(wu)與(yu)模(mo)板(ban)DNA互(hu)補的(de)程(cheng)度(du)。理(li)論(lun)上,只要知道任(ren)何(he)壹段模(mo)板(ban)DNA序(xu)列(lie), 就能按(an)其設計互(hu)補的(de)寡核苷(gan)酸鏈做(zuo)引(yin)物(wu),利(li)用(yong)PCR就可將(jiang)模(mo)板(ban)DNA在體(ti)外(wai)大量擴(kuo)增。設(she)計引(yin)物(wu)應(ying)遵循以(yi)下(xia)原(yuan)則(ze):
①引(yin)物(wu)長度: 5-30bp,常(chang)用(yong)為20bp左右。
②引(yin)物(wu)擴增跨(kua)度: 以(yi)200-500bp為宜,特定(ding)條件下(xia)可(ke)擴(kuo)增長至0kb的(de)片段。
③引(yin)物(wu)堿基(ji):G+C含量以(yi)40-60%為宜,G+C太(tai)少(shao)擴增效(xiao)果(guo)不(bu)佳(jia),G+C過(guo)多(duo)易(yi)出(chu)現非特異(yi)條(tiao)帶。ATGC隨(sui)機分(fen)布,避免(mian)5個以(yi)上的(de)嘌(piao)呤(ling)或(huo)嘧啶(ding)核苷(gan)酸的(de)成(cheng)串(chuan)排(pai)列(lie)。
④避免(mian)引(yin)物(wu)內部出(chu)現二級結構,避免(mian)兩條引(yin)物(wu)間互(hu)補,特別(bie)是3'端(duan)的(de)互(hu)補,否(fou)則(ze)會(hui)形成引(yin)物(wu)二聚(ju)體(ti),產(chan)生(sheng)非特異(yi)的(de)擴(kuo)增條(tiao)帶。
⑤引(yin)物(wu)3'端的(de)堿基(ji),特別(bie)是末(mo)及(ji)倒數(shu)第二(er)個堿基(ji),應(ying)嚴(yan)格(ge)要求配對(dui),以(yi)避免(mian)因末(mo)端(duan)堿基(ji)不(bu)配(pei)對(dui)而(er)導(dao)致PCR失敗。
⑥引(yin)物(wu)中有(you)或(huo)能加(jia)上合(he)適(shi)的(de)酶切位點, 被(bei)擴增的(de)靶(ba)序(xu)列(lie)有(you)適宜的(de)酶切位點, 這對(dui)酶切分(fen)析或(huo)分(fen)子克隆很(hen)有(you)好(hao)處。
⑦引(yin)物(wu)的(de)特異(yi)性(xing):引(yin)物(wu)應(ying)與(yu)核酸序(xu)列(lie)數(shu)據庫(ku)的(de)其它序(xu)列(lie)無(wu)明顯同(tong)源性(xing)。
引(yin)物(wu)量:每條(tiao)引(yin)物(wu)的(de)濃(nong)度(du)0.~umol或(huo)0~00pmol,以(yi)低引(yin)物(wu)量產(chan)生(sheng)所需要的(de)結果為好(hao),引(yin)物(wu)濃度(du)偏(pian)高會(hui)引(yin)起(qi)錯(cuo)配和(he)非特異(yi)性(xing)擴增,且(qie)可增加(jia)引(yin)物(wu)之間形成二聚體(ti)的(de)機(ji)會(hui)。
5-溴(xiu)煙(yan)乙(yi)酯(zhi) 25mL Laemmli’s Buffer with Pyronin Y (non reducing,4X) 常(chang)溫(wen)保(bao)存
L-苯氨醇(chun) 25mL Laemmli’s Buffer with Pyronin Y (reducing,4X) 常(chang)溫(wen)保(bao)存
2,4,5-三氟(fu)硝苯 25mL LDS-Sample Buffer (non-reducing,4X) 常(chang)溫(wen)保(bao)存
4-溴-2-氟(fu) 25mL LDS-Sample Buffer (reducing,4X) 常(chang)溫(wen)保(bao)存
4-氟-3-硝 5mg Leucine Solution,0.3% 常(chang)溫(wen)保(bao)存
2-溴丙(bing) 50mL Lithium Chloride Solution,M 常(chang)溫(wen)保(bao)存
6-溴-2-啶(ding)羧(suo) 00mL Lithium Chloride Solution,200mM 常(chang)溫(wen)保(bao)存
2-基-5-硝基(ji)啶 500mL Locke’s Solution 常(chang)溫(wen)保(bao)存
L-扁(bian)桃酯(zhi) 25mL Luminol and Oxidizing Solutions 常(chang)溫(wen)保(bao)存
吲哚(duo)-4-羧(suo) 500mL Lysis Buffer 常(chang)溫(wen)保(bao)存
右旋(xuan)樟腦(nao)-0-酰 250m Lysis Buffer with Triton 常(chang)溫(wen)保(bao)存
Boc-O-芐基(ji)-L-酪(lao)氨 500mL Lysis Buffer,pH8.0 常(chang)溫(wen)保(bao)存
L-哌啶甲鹽(yan)鹽(yan) 250ML MABT Washing Solution,5X 常(chang)溫(wen)保(bao)存
L-脯氨酯(zhi)鹽(yan)鹽(yan) 500mL Mac Ewen Solution 常(chang)溫(wen)保(bao)存
2-氯-3-氟苯胺(an) 50mL Magnesium Acetate Solution,M 常(chang)溫(wen)保(bao)存
山羊(yang)CYTB基(ji)因核酸檢測試劑盒(he)NAG(N-acetyl- Beta-D-glucosaminidase) 人(ren)N-乙(yi)酰(xian)-β-D-氨基(ji)葡萄糖苷(gan)酶 CAS: 4465-65-0 規格: 50mg
PAL(L-Phenylalanine ammonla-lyase) 人(ren)L苯丙(bing)氨解(jie)氨酶 CAS: 989-5-5 規格: 20mg
5-NT(5-Nucleotidase) 人(ren)5核苷(gan)酶 CAS: 50468-56-9 規格: 200mg
,3- BetaD-Glu(,3- BetaD glucosidase) 人(ren),3-βD葡葡(pu)糖(tang)苷(gan)酶 CAS: 5-42-3 規格: 200mg
CK(Creatine Kinase) 人(ren)肌(ji)激酶 CAS: 2333-80-6 規格: 200mg
TR(targeted ribonuclease) 人(ren)靶(ba)向核糖核酶 CAS: 規格: 300mg
PKC(protein kinase C) 人(ren)蛋白(bai)激酶C CAS: 474-86-2 規格: 25mg
ALD(Aldolase) 人(ren)縮酶 CAS: 50-4-6 規格: 30mg×5ampules
L-LDH(L-Lactate Dehydrogenase) 人(ren)L-乳脫(tuo)氫酶 CAS: 8067-24- 規格: 300mg
ASM(acid sphingomyelinase) 人(ren)性神經鞘磷脂(zhi)酶 CAS: 29-5- 規格: 00mg
ALOX-5(arachidonate 5-lipoxygenase) 人(ren)花(hua)生(sheng)四烯(xi)5脂加(jia)氧(yang)酶 CAS: 57-87-4 規格: 50mg
5-LO/LOX(5-lipoxygenase) 人(ren)5脂加(jia)氧(yang)酶 CAS: 379-79-3 規格: 50mg
AC-(adenylyl cyclase ) 人(ren)腺苷(gan)環(huan)化酶 CAS: 639-8-6 規格: 00mg
sAC(Soluble Adenylate Cyclase) 人(ren)可溶(rong)性(xing)腺(xian)苷(gan)環(huan)化酶 CAS: 89-65-6 規格: 50mg
ODC(Ornithine decarboxylase) 人(ren)鳥氨脫(tuo)羧(suo)酶 CAS: 49-32-6 規格: 200mg
註(zhu)意事(shi)項:
①加入試劑的(de)順(shun)序(xu)應(ying)*,以(yi)保(bao)證(zheng)所(suo)有(you)反應(ying)板(ban)孔溫(wen)育(yu)的(de)時(shi)間壹(yi)樣(yang)。
②使(shi)用(yong)幹凈(jing)的(de)塑料容(rong)器配置(zhi)洗滌(di)液。
③按照雞(ji)血(xue)紅(hong)蛋白(bai)(HB)ELISA檢測試劑盒(he)說明書中標(biao)明的(de)時(shi)間、加(jia)液的(de)量及(ji)順(shun)序(xu)進(jin)行(xing)溫(wen)育(yu)操作。
④底(di)物(wu)A應(ying)揮發(fa),避免(mian)長時(shi)間打(da)開(kai)蓋子。底(di)物(wu)B對(dui)光敏感,避免(mian)長時(shi)間暴露(lu)於光下(xia)。避免(mian)用(yong)手(shou)接觸,有毒(du)。實驗(yan)完(wan)成後應(ying)立即(ji)讀(du)取(qu)OD值(zhi)。
⑤洗滌(di)酶標板(ban)時(shi)應(ying)充分(fen)拍幹,不(bu)要將(jiang)吸水紙直(zhi)接(jie)放入酶標反應(ying)孔中吸(xi)水。
⑥使(shi)用(yong)壹(yi)次性的(de)吸(xi)頭(tou)以(yi)免(mian)交叉(cha)汙染(ran),吸取(qu)終止液和底(di)物(wu)A、B液時(shi),避免(mian)使(shi)用(yong)帶(dai)金(jin)屬部分(fen)的(de)加(jia)樣(yang)器 。
⑦實驗(yan)中不(bu)用(yong)的(de)板(ban)條應(ying)立即(ji)放回(hui)包(bao)裝袋(dai)中,密(mi)封保(bao)存,以(yi)免(mian)變質(zhi)。
⑧試劑應(ying)按標(biao)簽(qian)說(shuo)明書儲(chu)存,使(shi)用(yong)前(qian)恢復到(dao)室(shi)溫(wen)。稀稀(xi)過(guo)後的(de)標(biao)準(zhun)品應(ying)丟棄(qi),不(bu)可(ke)保(bao)存。
⑨不(bu)用(yong)的(de)其它試劑應(ying)包(bao)裝好(hao)或(huo)蓋好(hao)。不(bu)同(tong)批號的(de)試劑不(bu)要混(hun)用(yong)。保(bao)質(zhi)前(qian)使(shi)用(yong)。
企業信(xin)息(xi)
ENTERPRISE INFORMATION上(shang)海(hai)谷研實業(ye)有(you)限(xian)公司(si)
3004918891發(fa)送信(xin)件產(chan)品分(fen)類
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