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產品名稱:艱(jian)難(nan)梭(suo)菌(TCD-A)核酸(suan)檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒價(jia)格(ge)
規格(ge):48T/盒
類(lei)別:熒(ying)光-PCR法(fa)
運輸(shu):低溫(wen)、避光(guang)、快遞(di)免(mian)費(fei)送(song)貨(huo)上(shang)門(men)。
用(yong)途(tu):生化(hua)實(shi)驗(yan),合(he)成實驗(yan)等(deng)試驗(yan)。
運輸(shu)及(ji)保(bao)存(cun):低溫(wen)運輸(shu),-20℃保存(cun), 保(bao)存(cun)期(qi)限(xian)為(wei) 6 個月。
自(zi)備試劑(ji):樣(yang)品 RNA。
性能指(zhi)標:點(dian)擊(ji)了解更(geng)多熒(ying)光-PCR法(fa)。
.試劑(ji)盒檢(jian)測(ce)特異(yi)性為(wei)00%
2. 檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒重現(xian)性為(wei)00%
3. 靈(ling)敏(min)度可(ke)達(da)到(dao)03/ml
4. 有效(xiao)期(qi)為(wei)6個月
使用(yong)方法(fa):
壹(yi)、樣品 RNA 的(de)制備
、用自(zi)選方法(fa)抽提(ti)病毒樣品 RNA。註意(yi):可(ke)以選用本(ben)公(gong)司(si)的(de)壹(yi)管式(shi)病毒(du) RNAout
2、或(huo)柱式(shi)病毒(du) RNAout。
二:RT(逆轉錄)反應(ying)合(he)成 cDNA
. 按(an)下(xia)表配(pei)制 RT 反應(ying)體系(xi)(20 μL 體系(xi))
2. 70℃保溫(wen) 5 分鐘(zhong)變(bian)性模(mo)板後立(li)即(ji)冰(bing)浴。
3. 嚴格(ge)按(an)順序(xu)加入(ru) 6μL RT Buffer(含 dNTP)和(he) 2μL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),
反應(ying)終(zhong)體積(ji)為(wei) 20μL。
4. 42℃保溫(wen) 60 分鐘(zhong)。此步(bu)為(wei) RT 反應(ying)。
5. 70℃保(bao)溫(wen) 0 分鐘(zhong)以終(zhong)止反應(ying),然(ran)後(hou)放(fang)置在(zai)冰(bing)上(shang)待用。合成的(de) cDNA 可以直接(jie)作為(wei) PCR 模(mo)板使用(yong),丌(ji)需要純化。
註意(yi)事(shi)項:
①加入(ru)試劑(ji)的(de)順序(xu)應(ying)*,以保(bao)證(zheng)所有反應(ying)板孔溫(wen)育的(de)時間壹(yi)樣。
②使(shi)用(yong)幹(gan)凈的(de)塑料(liao)容器配置洗滌液。
③按(an)照雞(ji)血(xue)紅(hong)蛋白(bai)(HB)ELISA檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒說(shuo)明書中標(biao)明的(de)時間、加液的(de)量及(ji)順(shun)序(xu)進行溫(wen)育操(cao)作。
④底(di)物(wu)A應(ying)揮(hui)發,避免(mian)長(chang)時間打開(kai)蓋(gai)子。底(di)物(wu)B對光敏(min)感,避免(mian)長(chang)時間暴露(lu)於光(guang)下(xia)。避免(mian)用(yong)手(shou)接(jie)觸,有毒。實(shi)驗(yan)完(wan)成後應(ying)立(li)即(ji)讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biao)板時應(ying)充分拍幹(gan),不要將吸水(shui)紙(zhi)直接(jie)放(fang)入(ru)酶標(biao)反應(ying)孔中吸(xi)水。
⑥使用(yong)壹(yi)次(ci)性的(de)吸頭(tou)以免(mian)交叉汙染(ran),吸取終止液(ye)和(he)底(di)物(wu)A、B液時(shi),避免(mian)使(shi)用(yong)帶(dai)金屬部分的(de)加樣器 。
⑦實驗(yan)中不用的(de)板條應(ying)立(li)即(ji)放(fang)回包裝袋中,密(mi)封(feng)保存(cun),以免(mian)變(bian)質(zhi)。
⑧試劑(ji)應(ying)按(an)標簽說明(ming)書儲(chu)存(cun),使(shi)用(yong)前(qian)恢復到室溫(wen)。稀(xi)稀(xi)過後(hou)的(de)標準(zhun)品應(ying)丟(diu)棄,不可保(bao)存(cun)。
⑨不用的(de)其(qi)它(ta)試劑(ji)應(ying)包(bao)裝好或(huo)蓋好(hao)。不同批號的(de)試劑(ji)不要混(hun)用。保(bao)質(zhi)前(qian)使(shi)用。
反應(ying)五(wu)要素:
參加PCR反應(ying)的(de)物質(zhi)主(zhu)要(yao)有五種(zhong)即(ji)引物、酶、dNTP、模(mo)板和(he)Mg2+
引物:引物是(shi)PCR特(te)異(yi)性反應(ying)的(de)關(guan)鍵,PCR 產物的(de)特異(yi)性取決於(yu)引物與模(mo)板DNA互補(bu)的(de)程(cheng)度。理(li)論上(shang),只(zhi)要(yao)知道任(ren)何(he)壹(yi)段模(mo)板DNA序(xu)列(lie), 就(jiu)能按(an)其(qi)設(she)計(ji)互補(bu)的(de)寡(gua)核(he)苷酸(suan)鏈做引物,利用PCR就(jiu)可(ke)將模(mo)板DNA在體外(wai)大量擴(kuo)增(zeng)。設(she)計(ji)引物應(ying)遵(zun)循以下(xia)原(yuan)則:
①引物長(chang)度: 5-30bp,常(chang)用(yong)為(wei)20bp左右(you)。
②引物擴(kuo)增(zeng)跨(kua)度(du): 以200-500bp為(wei)宜,特定條(tiao)件(jian)下(xia)可擴(kuo)增(zeng)長(chang)至0kb的(de)片段。
③引物堿(jian)基(ji):G+C含量以40-60%為(wei)宜,G+C太(tai)少(shao)擴(kuo)增(zeng)效(xiao)果不佳,G+C過多(duo)易(yi)出現(xian)非特(te)異(yi)條(tiao)帶。ATGC隨機分布(bu),避(bi)免(mian)5個(ge)以上(shang)的(de)嘌(piao)呤(ling)或(huo)嘧啶(ding)核苷酸(suan)的(de)成串(chuan)排(pai)列(lie)。
④避免(mian)引物內(nei)部出現(xian)二級結(jie)構,避(bi)免(mian)兩(liang)條(tiao)引物間互補(bu),特(te)別是3'端(duan)的(de)互補(bu),否(fou)則會(hui)形成引物二聚體,產生非特(te)異(yi)的(de)擴增(zeng)條(tiao)帶(dai)。
⑤引物3'端(duan)的(de)堿基(ji),特別是末(mo)及(ji)倒(dao)數(shu)第二個(ge)堿(jian)基,應(ying)嚴格(ge)要求配對,以避(bi)免(mian)因(yin)末(mo)端堿基(ji)不配對而(er)導(dao)致(zhi)PCR失(shi)敗。
⑥引物中有或(huo)能加上(shang)合(he)適(shi)的(de)酶切(qie)位(wei)點(dian), 被(bei)擴增(zeng)的(de)靶序(xu)列(lie)有適(shi)宜(yi)的(de)酶切(qie)位(wei)點(dian), 這對酶切(qie)分析(xi)或(huo)分子克(ke)隆(long)很有好處(chu)。
⑦引物的(de)特異(yi)性:引物應(ying)與核(he)酸(suan)序(xu)列(lie)數(shu)據庫(ku)的(de)其(qi)它(ta)序(xu)列(lie)無明顯同源性。
引物量:每(mei)條(tiao)引物的(de)濃(nong)度(du)0.~umol或(huo)0~00pmol,以低引物量產生所(suo)需要的(de)結果為(wei)好,引物濃(nong)度(du)偏高會(hui)引起錯配和(he)非特(te)異(yi)性擴增(zeng),且(qie)可(ke)增(zeng)加引物之(zhi)間形成二聚體的(de)機會(hui)。
丙乙酯(zhi) 2 ug pIRES2-DsRed 低溫(wen)運輸(shu),-20℃保存(cun)
乙(yi)乙(yi)酯(zhi) 2 ug pIRES2-DsRed-Express 低溫(wen)運輸(shu),-20℃保存(cun)
5-氨(an)基(ji)-吡(bi)唑(zuo)-3-甲乙(yi)酯(zhi) 2 ug pIRES2-EGFP 低溫(wen)運輸(shu),-20℃保存(cun)
四(si)乙(yi)酰(xian)乙(yi)二胺(an) 2 ug pIRES2-GKP 低溫(wen)運輸(shu),-20℃保存(cun)
乙(yi)酰(xian)乙(yi)酯(zhi) 2 ug pIRES-hrGFP-a 低溫(wen)運輸(shu),-20℃保存(cun)
,3-丙二羧二乙(yi)酯(zhi) 2 ug pIRES-neo 低溫(wen)運輸(shu),-20℃保存(cun)
4-溴(xiu)-2-氟--三(san)氟甲氧苯 2 ug pIRES-neo2 低溫(wen)運輸(shu),-20℃保存(cun)
丙二二乙(yi)酯(zhi) 2 ug pADH2 低溫(wen)運輸(shu),-20℃保存(cun)
丁乙(yi)酯(zhi) 2 ug pIRES-neo3 低溫(wen)運輸(shu),-20℃保存(cun)
乙(yi)乙(yi)酯(zhi) 2 ug pIRES-puro 低溫(wen)運輸(shu),-20℃保存(cun)
,-二乙(yi)氧基烷 2 ug pIRES-puro2 低溫(wen)運輸(shu),-20℃保存(cun)
碳二乙(yi)酯(zhi) 2 ug pIRESshyg3 低溫(wen)運輸(shu),-20℃保存(cun)
2,4-二基(ji)酚(fen) 2 ug pISRE-TA-Luc 低溫(wen)運輸(shu),-20℃保存(cun)
2-氯(lv)-5-氯(lv)基(ji)噻(sai)唑(zuo) 2 ug pIZT/V5-His 低溫(wen)運輸(shu),-20℃保存(cun)
4-溴(xiu)-2-氟苯 2 ug Piz/v5-His 低溫(wen)運輸(shu),-20℃保存(cun)
艱(jian)難(nan)梭(suo)菌(TCD-A)核酸(suan)檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒價(jia)格(ge)AT II R(angiotension II receptor Antibody) 人血(xue)管緊(jin)張素Ⅱ受(shou)體抗體現(xian)貨供(gong)應(ying)含量:≥97%
CINH(Mouse Complement inhibitor autoantibody) 小(xiao)鼠(shu)補(bu)體抑(yi)制(zhi)物(wu)抗體*含量:≥95%
ANG- I R(angiotension I receptor Antibody) 人(ren)血(xue)管緊(jin)張素Ⅰ受(shou)體抗體 進(jin)口,*含量:≥95%
Gelsolin 大(da)鼠(shu)凝(ning)溶(rong)膠(jiao)蛋(dan)白(bai) 進(jin)口/國(guo)產含量:≥99%
PABA(Mouse para-aminobenzoic acid) 小(xiao)鼠(shu)對氨基苯(ben)甲(jia)現(xian)貨供(gong)應(ying)含量:>95%
OVA sIgG(ovalbumin specific IgG) 人(ren)卵(luan)清蛋白(bai)特(te)異(yi)性IgG*含量:>95%
RANKL 大(da)鼠(shu)核(he)因(yin)子κB受(shou)體活(huo)化(hua)因(yin)子配(pei)基(ji) 進(jin)口,*含量:>95%
CAM-ab(anti-calmodulin specific antibody) 人(ren)抗鈣調(tiao)素特異(yi)抗體 進(jin)口/國(guo)產含量:>95%
TpP 大(da)鼠(shu)血(xue)栓前(qian)體蛋(dan)白(bai)現(xian)貨供(gong)應(ying)含量:>95%
hs-CRP(Mouse high sensitivity C-Reactive Protein) 小(xiao)鼠(shu)超(chao)敏(min)C反應(ying)蛋(dan)白(bai)*含量:>95%
Beta2-GP IgA/G/M(Mouse Beta2-glycoprotein antibody IgA/G/M) 小(xiao)鼠(shu)β2糖(tang)蛋(dan)白(bai)抗體IgA/G/M 進(jin)口,*含量:>95%
INH-B 大(da)鼠(shu)抑(yi)制(zhi)素B 進口/國(guo)產含量:>95%
THAA(thyroid hormone autoantibodies) 人(ren)甲(jia)狀腺(xian)非肽(tai)激(ji)素抗體現(xian)貨供(gong)應(ying)含量:>95%
LAT(Mouse Linker for activation of T cell) 小(xiao)鼠(shu)T細(xi)胞活(huo)化(hua)連(lian)接(jie)蛋白(bai)*含量:>95%
SCA(steroid producing cell autoantibody) 人(ren)抗類固(gu)醇(chun)生成細(xi)胞抗體 進(jin)口,*含量:>95%
企業(ye)信息
ENTERPRISE INFORMATION上(shang)海谷研實(shi)業(ye)有限公(gong)司(si)
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