【概要描述(shu)】人神(shen)經(jing)小膠質(zhi)細(xi)胞公司正在出(chu)售(shou)的(de)產品(pin)：THP-1白(bai)血(xue)病(bing)TM4 (正(zheng)常(chang)小鼠睪(gao)丸(wan)Sertoli細(xi)胞) (種(zhong)屬(shu)鑒定正確(que))U14 (小鼠子(zi)宮(gong)頸癌細(xi)胞)SV40 MES 13 (小鼠腎(shen)小球(qiu)系膜細(xi)胞) (種(zhong)屬(shu)鑒定正確(que))AE-1 (小鼠雜(za)交(jiao)瘤(liu)細(xi)胞(抗(kang)AChE))AE-2 (小鼠雜(za)交(jiao)瘤(liu)細(xi)胞(抗(kang)AChE))BALB/3T3 clone A31 (小鼠胚(pei)胎成纖維細(xi)胞) (種(zhong)屬(shu)鑒定正確(que))BV2 (小鼠小膠質(zhi)細(xi)胞) (種(zhong)屬(shu)

本(ben)公司所有產品(pin)僅(jin)供(gong)科(ke)學(xue)實(shi)驗，不做(zuo)其(qi)他(ta)科(ke)學(xue)實(shi)驗外的(de)使(shi)用(yong)！

人神(shen)經(jing)小膠質(zhi)分(fen)離(li)自腦組織(zhi)；大(da)腦分左右(you)兩個半(ban)球(qiu)，大腦皮質(zhi)(灰(hui)質)覆(fu)蓋著(zhe)每(mei)個(ge)大(da)腦半(ban)球(qiu)的(de)大(da)部分，它是(shi)神(shen)經(jing)元(yuan)胞體(ti)集中(zhong)的(de)地(di)方(fang)。內部(bu)則(ze)是(shi)由神(shen)經(jing)纖(xian)維或髓(sui)鞘構(gou)成的(de)白(bai)質(zhi)。每(mei)壹(yi)個(ge)半(ban)球(qiu)都有三個面(mian)，即外側(ce)面(mian)(約占整(zheng)個(ge)皮(pi)質面(mian)積的(de)1/3)、內(nei)側面(mian)和底(di)面(mian)(占2/3的(de)面(mian)積)；半(ban)球(qiu)表(biao)面(mian)有很(hen)多(duo)深淺(qian)不(bu)等的(de)溝(gou)或(huo)裂，溝(gou)或(huo)裂之(zhi)間的(de)隆(long)起叫回，它們(men)大(da)大增(zeng)加(jia)了大腦的(de)表(biao)面(mian)積；大(da)腦外側(ce)面(mian)重要(yao)的(de)溝(gou)、裂(lie)有大(da)腦外側(ce)裂(lie)、頂(ding)枕裂(lie)和(he)中(zhong)央溝(gou)。由(you)於三溝(gou)裂(lie)之(zhi)界(jie)隔，使(shi)大(da)腦皮質(zhi)組(zu)分為(wei)額(e)葉(ye)、頂(ding)葉、顳(nie)葉(ye)、枕(zhen)葉四大部分。小膠質(zhi)細(xi)胞是(shi)神(shen)經(jing)膠(jiao)質(zhi)細(xi)胞的(de)壹(yi)種，相當(dang)於(yu)腦和脊(ji)髓(sui)中的(de)巨(ju)噬細(xi)胞，是(shi)中(zhong)樞(shu)神(shen)經(jing)系統(CNS)中(zhong)的(de)道也是(shi)最(zui)主(zhu)要的(de)壹(yi)道免疫(yi)防線。小膠質(zhi)細(xi)胞大(da)約占大腦中的(de)神(shen)經(jing)膠(jiao)質(zhi)細(xi)胞的(de)20%，小膠質(zhi)細(xi)胞不(bu)停(ting)地(di)清除(chu)著中(zhong)樞(shu)神(shen)經(jing)系統中(zhong)的(de)損壞的(de)神(shen)經(jing)，斑(ban)塊(kuai)及(ji)感(gan)染性物(wu)質。無數臨床(chuang)上和神(shen)經(jing)理(li)學(xue)研(yan)究表(biao)明激(ji)活(huo)的(de)小膠質(zhi)細(xi)胞在神(shen)經(jing)退(tui)化(hua)類疾病的(de)發病(bing)機(ji)理中(zhong)起到十(shi)分(fen)重(zhong)要(yao)的(de)作用(yong)，如帕(pa)金森(sen)病(bing)、多(duo)發性(xing)硬(ying)化(hua)和(he)阿(e)茲海默癥等。但(dan)是過多(duo)激(ji)活(huo)或失控(kong)的(de)小膠質(zhi)細(xi)胞會(hui)引(yin)起神(shen)經(jing)毒性(xing)。它們(men)是(shi)促炎因(yin)子(zi)和氧化(hua)應激(ji)的(de)重(zhong)要來源，如腫瘤(liu)壞死因子(zi)(TNF)，壹氧化(hua)氮(dan)，白(bai)介素等有神(shen)經(jing)毒性(xing)的(de)物(wu)質。神(shen)經(jing)小膠質(zhi)細(xi)胞的(de)主(zhu)要功(gong)能(neng)：①神(shen)經(jing)膠(jiao)質(zhi)出(chu)現在大(da)腦發育早(zao)期(qi)向(xiang)成熟(shu)階(jie)段轉(zhuan)化(hua)的(de)過程(cheng)中；②當(dang)程(cheng)序性(xing)細(xi)胞死(si)亡時(shi)，或在大(da)腦發育的(de)過程(cheng)中，中樞(shu)神(shen)經(jing)系統受(shou)損或(huo)受(shou)到病理(li)損壞時(shi)，神(shen)經(jing)膠(jiao)質(zhi)可(ke)做(zuo)為(wei)大(da)腦的(de)巨(ju)噬細(xi)胞；③膠(jiao)質(zhi)細(xi)胞能(neng)在Ⅱ類組織(zhi)相(xiang)容性復合體(ti)表(biao)達CD-4陽性(xing)T細(xi)胞時(shi)表(biao)達抗(kang)原(yuan)，能(neng)進(jin)行(xing)Fc介導(dao)的(de)巨(ju)噬作用(yong)，並(bing)且與造(zao)血(xue)細(xi)胞和(he)巨(ju)噬細(xi)胞組(zu)織(zhi)共(gong)享(xiang)抗(kang)原(yuan)。
方(fang)法簡介：

公司實(shi)驗室分離(li)的(de)人神(shen)經(jing)小膠質(zhi)采(cai)用(yong)酶(mei)消(xiao)化(hua)法結合差(cha)速貼(tie)壁(bi)法，在培(pei)養基(ji)營養缺失數(shu)天後(hou)經(jing)搖(yao)床震蕩(dang)收(shou)集(ji)脫(tuo)落(luo)細(xi)胞制(zhi)備而(er)來，細(xi)胞總(zong)量約為(wei)5×10?cells/瓶(ping)。
質量檢(jian)測(ce)：

公司實(shi)驗室分離(li)的(de)人神(shen)經(jing)小膠質(zhi)經(jing)CD11b免疫(yi)熒(ying)光(guang)鑒(jian)定，純(chun)度可(ke)達(da)90%以上，且不含(han)有HIV-1、HBV、HCV、支(zhi)原(yuan)體(ti)、細(xi)菌、酵(jiao)母和(he)真菌(jun)等。

培(pei)養基(ji) 含(han)FBS、生長添(tian)加(jia)劑(ji)、Penicillin、Streptomycin等

換液(ye)頻(pin)率(lv) 每(mei)2-3天換液(ye)壹(yi)次

生長特性 貼壁(bi)

細(xi)胞形態(tai) 梭形、多(duo)角形

傳代(dai)特性 屬(shu)於終末分(fen)化(hua)細(xi)胞；屬(shu)於不增(zeng)殖細(xi)胞群

消(xiao)化(hua)液(ye) 利多(duo)ka因（12mM）

培(pei)養條件(jian) 氣(qi)相：空(kong)氣(qi)，95%；CO2，5%

準備工作

1. 實(shi)驗器材(cai)準備：準備無菌的(de)培(pei)養皿(min)、培(pei)養瓶(ping)、移液(ye)管(guan)、離(li)心(xin)管(guan)、手(shou)術(shu)器械(xie)等，並(bing)進(jin)行(xing)高(gao)壓(ya)滅菌(jun)或(huo)其他(ta)合(he)適的(de)消(xiao)毒處理(li)。

2. 試劑(ji)準備：配(pei)制(zhi)或購買(mai)合適的(de)培(pei)養基(ji)、消(xiao)化(hua)酶(mei)（如、膠原(yuan)酶(mei)等）、胎牛(niu)血(xue)清、雙(shuang)抗(kang)等試(shi)劑(ji)，確(que)保(bao)其無菌且在有效(xiao)期(qi)內。

3. 實(shi)驗動(dong)物(wu)或組織(zhi)來(lai)源(yuan)準備：根(gen)據實(shi)驗需求(qiu)，選擇(ze)合(he)適的(de)動(dong)物(wu)並(bing)進(jin)行(xing)相(xiang)應的(de)麻(ma)醉(zui)或處死(si)，獲(huo)取(qu)所(suo)需組織(zhi)；或(huo)從已有的(de)組(zu)織(zhi)樣(yang)本(ben)庫(ku)中獲(huo)取(qu)組(zu)織(zhi)。

取(qu)材(cai)與(yu)處理(li)

1. 取(qu)材(cai)：在無菌條件(jian)下，迅速取(qu)出(chu)目標組(zu)織(zhi)，盡(jin)量減少(shao)對組(zu)織(zhi)的(de)損傷(shang)，並(bing)去除(chu)多(duo)余(yu)的(de)脂(zhi)肪(fang)、結締(di)組(zu)織(zhi)等非(fei)目的(de)組(zu)織(zhi)。

2. 清洗(xi)：將(jiang)取(qu)出(chu)的(de)組(zu)織(zhi)用(yong)預(yu)冷的(de)無菌PBS沖(chong)洗(xi)數次，以(yi)去除(chu)血(xue)液(ye)和(he)雜質。

3. 剪切(qie)：將(jiang)組(zu)織(zhi)剪(jian)成約1 - 2mm³的(de)小塊(kuai)，以(yi)便(bian)後(hou)續消(xiao)化(hua)。

細(xi)胞分(fen)離(li)

1. 消(xiao)化(hua)：將(jiang)剪(jian)碎的(de)組(zu)織(zhi)塊(kuai)放入含(han)有適量消(xiao)化(hua)酶(mei)的(de)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，在37℃恒(heng)溫搖(yao)床或(huo)培(pei)養箱(xiang)中消(xiao)化(hua)壹(yi)段時(shi)間。期(qi)間可輕(qing)輕(qing)搖(yao)晃離(li)心(xin)管(guan)，使(shi)消(xiao)化(hua)更(geng)均(jun)勻(yun)。

2. 終止(zhi)消(xiao)化(hua)：當(dang)組(zu)織(zhi)塊(kuai)大(da)部(bu)分(fen)被(bei)消(xiao)化(hua)成單細(xi)胞懸(xuan)液(ye)或(huo)小細(xi)胞團(tuan)時(shi)，加(jia)入含(han)血(xue)清的(de)培(pei)養基(ji)終止(zhi)消(xiao)化(hua)。

3. 過濾(lv)與離(li)心(xin)：用(yong)細(xi)胞篩(shai)過濾(lv)細(xi)胞懸(xuan)液(ye)，去除(chu)未(wei)消(xiao)化(hua)的(de)組(zu)織(zhi)碎片(pian)，然後(hou)將(jiang)濾(lv)液(ye)以(yi)適當(dang)的(de)轉(zhuan)速(su)離(li)心(xin)，收(shou)集(ji)細(xi)胞沈(chen)澱(dian)。

細(xi)胞觀(guan)察(cha)與(yu)檢(jian)測(ce)

1. 日(ri)常觀(guan)察(cha)：每(mei)天用(yong)倒(dao)置顯微鏡(jing)觀(guan)察(cha)細(xi)胞的(de)形態(tai)、生長狀(zhuang)態(tai)、密度等，記(ji)錄細(xi)胞的(de)變化(hua)情況，如發現(xian)細(xi)胞汙染或異(yi)常，及(ji)時(shi)采(cai)取(qu)相(xiang)應措(cuo)施。
2. 細(xi)胞計(ji)數(shu)與(yu)活(huo)力檢(jian)測(ce)：在需要時(shi)，可采(cai)用(yong)臺(tai)盼藍染色等方(fang)法對細(xi)胞進(jin)行(xing)計(ji)數(shu)和(he)活力檢(jian)測(ce)，以了(le)解細(xi)胞的(de)生(sheng)長情況和健康狀(zhuang)態(tai)。

壹、取(qu)材(cai)與(yu)分(fen)離(li)

1. 快速(su)操(cao)作

- 組織(zhi)取(qu)材(cai)後(hou)需立即(ji)處理(li)，避免長時(shi)間暴露於(yu)室溫或非(fei)營養環境(jing)。

- 使(shi)用(yong)無菌 PBS 或(huo)生(sheng)理鹽水沖洗(xi)組(zu)織(zhi)，去除(chu)血(xue)液(ye)、雜(za)質。

2. 消(xiao)化(hua)酶(mei)選擇

- 根(gen)據組(zu)織(zhi)類型(xing)選(xuan)擇(ze)消(xiao)化(hua)酶(mei)，避免過度消(xiao)化(hua)導(dao)致(zhi)細(xi)胞損傷(shang)。

- 消(xiao)化(hua)時(shi)間需嚴格控(kong)制(zhi)（通常 10-30 分鐘(zhong)），可(ke)通過顯微鏡(jing)觀(guan)察(cha)細(xi)胞解離(li)狀(zhuang)態(tai)。

二、培(pei)養條件(jian)優化(hua)

1. 培(pei)養基(ji)選擇

- 使(shi)用(yong)含(han)血(xue)清或(huo)特定生長因(yin)子(zi)的(de)培(pei)養基(ji)（如 DMEM、RPMI 1640 等），部(bu)分細(xi)胞需添(tian)加(jia)胰島素(su)、EGF 等。

- 避免頻繁更(geng)換培(pei)養基(ji)品牌或批(pi)次，減少(shao)細(xi)胞適應壓力。

2. 貼壁(bi)與(yu)傳代(dai)

- 原(yuan)代(dai)細(xi)胞貼(tie)壁(bi)能(neng)力較(jiao)弱，可能(neng)需要包(bao)被(bei)培(pei)養皿(min)（如膠原(yuan)蛋(dan)白(bai)、多(duo)聚(ju)賴(lai)氨(an)酸）。

- 傳代(dai)時(shi)密度建議控(kong)制(zhi)在 70%-80%，過度匯(hui)合(he)會導(dao)致(zhi)接觸(chu)抑制(zhi)和(he)分化(hua)。

三、汙染控(kong)制(zhi)

1. 無菌操(cao)作

- 全程在超(chao)凈(jing)臺操(cao)作，使(shi)用(yong)壹次性(xing)耗(hao)材(cai)，避免交叉(cha)汙染。

- 培(pei)養基(ji)中可添(tian)加(jia)雙抗(kang)，但長期(qi)使(shi)用(yong)可能(neng)影響細(xi)胞活(huo)性(xing)。

2. 支原(yuan)體(ti)檢(jian)測(ce)

- 定期(qi)檢(jian)測(ce)支原(yuan)體(ti)汙染（如 PCR 法），汙染後需及時(shi)丟棄細(xi)胞。

四、狀(zhuang)態(tai)監(jian)控(kong)

1. 日(ri)常觀(guan)察(cha)

- 每(mei)天檢(jian)查(zha)細(xi)胞形態(tai)、密度及(ji)培(pei)養基(ji)顏色，及時(shi)更(geng)換培(pei)養基(ji)（通常每(mei) 2-3 天換液(ye)壹(yi)次）。

- 異常(chang)形態(tai)（如細(xi)胞變圓、碎片(pian)增多(duo)）可能(neng)提示汙染或營(ying)養不(bu)足。

2. 傳代(dai)與(yu)凍存(cun)

- 原(yuan)代(dai)細(xi)胞分(fen)裂(lie)次數(shu)有限(xian)（壹(yi)般(ban) 5-10 代(dai)），需及時(shi)凍存(cun)早(zao)期(qi)代(dai)次細(xi)胞。

- 凍存(cun)液(ye)建議使(shi)用(yong) DMSO+血(xue)清（或(huo)專(zhuan)用凍存(cun)培(pei)養基(ji)），梯(ti)度降(jiang)溫後液(ye)氮(dan)保(bao)存。