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化(hua)兔(tu)抗樣本的物(wu)種(zhong) 應(ying)選(xuan)擇物種相同或(huo)有交(jiao)叉反(fan)應(ying)的(de)抗體(ti),抗體(ti)可(ke)能與不同物種的同種靶蛋(dan)白(bai)有交(jiao)叉反(fan)應(ying),因(yin)其(qi)氨基酸(suan)序列(lie)同源性(xing)較(jiao)高,如果樣本的種(zhong)類未列入(ru)抗體(ti)說(shuo)明(ming)書上的(de)交(jiao)叉反(fan)應(ying)種(zhong)屬表(biao)中(zhong),並不意(yi)味(wei)著(zhe)該(gai)抗體(ti)不適(shi)用於(yu)檢測該(gai)物種(zhong)的(de)蛋(dan)白(bai),而只(zhi)是表(biao)示(shi)該物種尚未(wei)用此(ci)抗體(ti)檢測驗(yan)證(zheng)過(guo),應(ying)通(tong)過(guo)序列(lie)比(bi)對(dui)的方(fang)法來(lai)預(yu)測(ce)交(jiao)叉反(fan)應(ying),可(ke)應(ying)用Expasy 和(he) NCBI BLAST 來(lai)進(jin)行不(bu)同物種蛋白(bai)同源性(xing)比(bi)對。
化(hua)兔(tu)抗壹抗宿主(zhu)物(wu)種的選(xuan)擇壹般說(shuo)來,在使(shi)用偶(ou)聯二(er)抗結合無(wu)偶(ou)聯物(wu)的(de)壹抗時(shi),壹抗宿主(zhu)動物(wu)的(de)物(wu)種(zhong)選擇較(jiao)為重(zhong)要(yao),對於(yu)免(mian)疫組(zu)化(hua)而言(yan),盡(jin)可(ke)能選擇與樣本不同種系物種(zhong)的壹抗,從(cong)而避免(mian)二(er)抗與樣本內源性(xing)免(mian)疫球蛋白(bai)產(chan)生(sheng)交(jiao)叉反(fan)應(ying),例(li)如:檢測小(xiao)鼠(shu)樣本蛋白(bai),則(ze)不應(ying)選(xuan)擇小(xiao)鼠(shu)或(huo)大鼠(shu)源的壹抗,選兔(tu)源的壹抗,則(ze)二(er)抗則(ze)可(ke)選擇偶(ou)聯了檢測分子(酶(mei)、熒光素、等)的(de)抗兔IgG。如果選(xuan)擇有偶(ou)聯物(wu)的(de)壹抗則(ze)不適(shi)用上(shang)述(shu)情況,除(chu)免(mian)疫組(zu)化(hua)外的(de)其它對(dui)不含(han)內源性(xing)免(mian)疫球蛋白(bai)樣本的檢測方(fang)法,則(ze)抗體(ti)宿主(zhu)物(wu)種的影(ying)響不(bu)大(da),如對不(bu)含(han)IgG 的細胞(bao)裂解(jie)物樣本的western blotting檢測,盡(jin)管(guan)如此,含(han)有血清(qing)的(de)組織裂解(jie)物和(he)組織培(pei)養(yang)上清(qing)中含有免(mian)疫球蛋白(bai),還(hai)原(yuan)變(bian)性(xing)樣本中含(han)IgG,在western blot 檢測中(zhong)則(ze)結合出(chu)現IgG 分子50 and 25 kDa 的(de)重(zhong)鏈和輕鏈條(tiao)帶。二(er)抗的選(xuan)擇 二(er)抗應(ying)選(xuan)用與(yu)使(shi)用的(de)壹抗相同的物種來(lai)源,例如:如果妳(ni)的壹抗是小(xiao)鼠(shu)的單(dan)克(ke)隆抗體(ti),二(er)抗則(ze)選抗小(xiao)鼠(shu)的二(er)抗anti-mouse secondary。建(jian)議(yi)檢查二(er)抗說(shuo)明(ming)書確保該抗體(ti)適用於(yu)妳(ni)的檢測應(ying)用, 二(er)抗壹般連接熒光素FITC 或(huo)發光團。
上海谷研生(sheng)物科(ke)技(ji)有限(xian)公(gong)司(si)特殊(shu)抗體(ti)的保存(cun)條(tiao)件:. 酶(mei)聯抗體(ti):永遠保存(cun)在4 度(du),避免(mian)凍起(qi)來。否(fou)則(ze)會導致(zhi)酶(mei)活性(xing)的(de)下(xia)降或(huo)者(zhe)喪(sang)失2. 偶(ou)聯抗體(ti):所有偶(ou)聯抗體(ti)都是在棕(zong)色管(guan)中或(huo)使(shi)用錫(xi)箔紙(zhi)避光保存(cun)。尤(you)其(qi)是熒光抗體(ti),對光極(ji)為(wei)敏感(gan),因(yin)此在所有的實(shi)驗(yan)階段也(ye)是要(yao)避光操作的!3. IgG3 的(de)同型對照:永遠保存(cun)在4 度(du),避免(mian)凍起(qi)來。因(yin)為如果出(chu)現凍融(rong)過(guo)程(cheng),該(gai)抗體(ti)非常容易(yi)形成(cheng)多(duo)聚(ju)體(ti)無(wu)論是保存(cun)還(hai)是運輸(shu),避免(mian)反(fan)復凍融(rong)!反(fan)復凍融(rong)會導致(zhi)抗體(ti)變性(xing),導致(zhi)多(duo)聚(ju)體(ti)形成(cheng),從(cong)而降低(di)抗體(ti)的結(jie)合能(neng)力!
關(guan)於(yu)加(jia)入(ru)甘(gan)油保存(cun):有些人(ren)會加(jia)50%的(de)甘(gan)油到抗體(ti)中來(lai)避免(mian)反(fan)復凍融(rong),甘(gan)油在-20 度(du) 會降低(di)冰點。這對很(hen)多(duo)抗體(ti)可(ke)能是可(ke)行的(de)。但是abcam 僅對非常小(xiao)的(de)壹部(bu)分抗體(ti)檢測過(guo)其(qi)在這種條(tiao)件下(xia)的(de)穩(wen)定(ding)性(xing);而abcam 只(zhi)對(dui)按(an)照(zhao)條(tiao)件保存(cun)的(de)抗體(ti)提供(gong)質(zhi)量(liang)保證(zheng)!加(jia)入(ru)甘(gan)油的溶液不建(jian)議(yi)在-80 度(du)保存(cun),因(yin)為(wei)這已經超過(guo)了甘(gan)油的冰點。如果您(nin)要(yao)加入(ru)甘(gan)油來保存(cun)抗體(ti)的話,請(qing)謹(jin)慎(shen)註(zhu)意(yi)無(wu)菌(jun)操作(zuo),避免(mian)汙染!關(guan)於(yu)蛋(dan)白(bai)保護(hu)劑:蛋(dan)白(bai)在高(gao)濃(nong)度(du)時(shi)更不容易(yi)降解(jie)( mg/ml 或(huo)者(zhe)更高),這就(jiu)是為什(shen)麽(me)在抗體(ti)中加(jia)入BSA 之類作為穩(wen)定(ding)劑的原(yuan)因(yin)了;另(ling)壹方(fang)面,加(jia)入(ru)的(de)蛋白(bai)也(ye)可(ke)以減少抗體(ti)由於(yu)管(guan)壁吸(xi)附(fu)所造成(cheng)的(de)損失(shi)。但是如果抗體(ti)要(yao)用來(lai)標(biao)記的(de)話,則(ze)不能(neng)加(jia)入(ru)蛋白(bai)穩(wen)定(ding)劑,因(yin)為這些穩定(ding)劑(ji)會和(he)抗體(ti)壹起競(jing)爭結(jie)合標(biao)記物(wu)。
其它相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi):
"β-TGELISA試(shi)劑盒(he) 兔(tu)子β血(xue)小(xiao)板(ban)球蛋白(bai)/β血(xue)栓(shuan)環蛋(dan)白(bai) ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)" Rabbit β-Thromboglobulin,β-TG ELISA試(shi)劑盒(he)
"NEELISA試(shi)劑盒(he) 兔(tu)子中(zhong)性(xing)粒細胞(bao)彈(dan)性(xing)蛋(dan)白(bai)酶(mei) ELISA試劑(ji)盒(he)" Rabbit neutrophil elastase,NE ELISA試(shi)劑盒(he)
"C3aELISA試(shi)劑盒(he) 兔(tu)子補(bu)體(ti)片斷(duan)3a ELISA試劑(ji)盒(he)" Rabbit Complement fragment 3a,C3a ELISA試(shi)劑盒(he)
"MMP-3ELISA試(shi)劑盒(he) 兔(tu)子基質(zhi)金(jin)屬蛋(dan)白(bai)酶(mei)3 ELISA試劑(ji)盒(he)" Rabbit matrix metalloproteinase 3,MMP-3 ELISA試(shi)劑盒(he)
"sCD40LELISA試(shi)劑盒(he) 兔(tu)子可(ke)溶性(xing)CD40配(pei)體(ti) ELISA試劑(ji)盒(he)" differentiation 40 ligand,sCD40L ELISA試(shi)劑盒(he)
"MHCⅠ/RLAⅠELISA試(shi)劑盒(he) 兔(tu)主(zhu)要(yao)組織相(xiang)容性(xing)復(fu)合體(ti)Ⅰ類 ELISA試劑盒(he) " Rabbit major histocompatibility complexⅠ,MHCⅠ/RLAⅠ ELISA試(shi)劑盒(he)
"HMGB-ELISA試(shi)劑盒(he) 兔(tu)子高(gao)遷(qian)移(yi)率(lv)族(zu)蛋白(bai)B ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) " Rabbit High mobility group protein B,HMGB- ELISA試(shi)劑盒(he)
"Bcl-2ELISA試(shi)劑盒(he) 兔(tu)子B細胞(bao)淋(lin)巴(ba)瘤(liu)因(yin)子2 ELISA試(shi)劑盒(he)" Rabbit B-cell leukemia/lymphoma 2,Bcl-2 ELISA試(shi)劑盒(he)
"PEDFELISA試(shi)劑盒(he) 兔(tu)色素上皮衍生(sheng)因子 ELISA試(shi)劑盒(he)" Rabbit pigment epithelium-derived factor,PEDF ELISA試(shi)劑盒(he)
"GPELISA試(shi)劑盒(he) 兔(tu)抗糖蛋(dan)白(bai)抗體(ti) ELISA試劑(ji)盒(he)" Rabbit anti-glycoprotein antibody,GP ELISA試(shi)劑盒(he)
"AMAELISA試(shi)劑盒(he) 兔(tu)抗單(dan)核細胞(bao)抗體(ti) ELISA試劑(ji)盒(he)" Rabbit anti-Monocyte antibody,AMA ELISA試(shi)劑盒(he)
企業(ye)信(xin)息(xi)
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