【概要(yao)描(miao)述】cusabio elisa試劑盒標本(ben)采集後(hou)盡(jin)早(zao)進(jin)行提(ti)取，提(ti)取按(an)相(xiang)關文(wen)獻(xian)進(jin)行，提(ti)取後(hou)應盡(jin)快(kuai)進(jin)行實(shi)驗。若不(bu)能馬上(shang)進(jin)行試驗，可將標(biao)本(ben)放於-20℃保存，但應避(bi)免反(fan)復(fu)凍融(rong)

                                                                                                          cusabio elisa試劑盒
使用(yong)目的(de)：

本(ben)試劑盒用於測定(ding)大鼠(shu)血清(qing)，血漿(jiang)及(ji)相(xiang)關液體(ti)樣本(ben)中含(han)量(liang)。

試(shi)劑盒組成(cheng)：

標本(ben)要(yao)求(qiu)：

1．標(biao)本(ben)采(cai)集後(hou)盡(jin)早(zao)進(jin)行提(ti)取，提(ti)取按(an)相(xiang)關文(wen)獻(xian)進(jin)行，提(ti)取後(hou)應盡(jin)快(kuai)進(jin)行實(shi)驗。若不(bu)能馬上(shang)進(jin)行試驗，可將標(biao)本(ben)放於-20℃保存，但應避(bi)免反(fan)復(fu)凍融(rong)

2．不(bu)能檢測(ce)含NaN3的(de)樣品(pin)，因NaN3抑(yi)制(zhi)辣(la)根過(guo)氧(yang)化物(wu)酶的(de)（HRP）活(huo)性。

操作(zuo)步驟

1.標準品(pin)的(de)稀(xi)釋(shi)：本試劑盒提(ti)供原(yuan)倍(bei)標(biao)準品壹(yi)支，用(yong)戶(hu)可按(an)照(zhao)下列圖表(biao)在(zai)小試管(guan)中(zhong)進(jin)行稀(xi)釋(shi)。

2.加樣：分(fen)別設空白(bai)孔(kong)（空白(bai)對照孔(kong)不(bu)加樣品(pin)及酶(mei)標(biao)試(shi)劑，其(qi)余(yu)各步操作(zuo)相(xiang)同）、標(biao)準(zhun)孔(kong)、待測(ce)樣品(pin)孔(kong)。在(zai)酶標包被板(ban)上(shang)標準(zhun)品準(zhun)確(que)加(jia)樣50μl，待(dai)測樣品(pin)孔(kong)中先(xian)加樣品(pin)稀(xi)釋(shi)液40μl，然後再(zai)加(jia)待測樣品(pin)10μl（樣品(pin)最終稀(xi)釋(shi)度為5倍）。加(jia)樣將樣品(pin)加於酶標板孔(kong)底(di)部，盡(jin)量(liang)不(bu)觸及(ji)孔(kong)壁，輕(qing)輕(qing)晃(huang)動(dong)混勻(yun)。

3.溫(wen)育(yu)：用(yong)封板膜(mo)封板後置37℃溫(wen)育(yu)30分(fen)鐘(zhong)。   

4.配(pei)液(ye)：將30倍(bei)濃(nong)縮(suo)洗滌液用(yong)蒸餾(liu)水(shui)30倍(bei)稀(xi)釋(shi)後備用

5.洗滌：小心揭掉封板膜(mo)，棄去(qu)液體(ti)，甩幹，每(mei)孔(kong)加滿(man)洗滌液，靜(jing)置30秒後棄去，如(ru)此(ci)重復(fu)5次(ci)，拍幹。

6.加(jia)酶(mei)：每(mei)孔(kong)加入(ru)酶標(biao)試劑50μl，空(kong)白(bai)孔(kong)除外(wai)。 

7.溫(wen)育(yu)：操作(zuo)同(tong)3。

8.洗滌：操作(zuo)同(tong)5。

9.顯色(se)：每孔(kong)先加(jia)入顯色(se)劑A50μl，再(zai)加(jia)入顯色(se)劑B50μl，輕(qing)輕(qing)震(zhen)蕩(dang)混勻(yun)，37℃避光(guang)顯色(se)10分鐘.

10.終止：每(mei)孔(kong)加終止液(ye)50μl，終止反(fan)應（此(ci)時藍色(se)立轉(zhuan)黃色）。

11.測定(ding)：以空白(bai)孔(kong)調零(ling)，450nm波長(chang)依(yi)序(xu)測量(liang)各孔(kong)的(de)吸(xi)光(guang)度(du)（OD值）。 測(ce)定(ding)應在(zai)加終止液(ye)後15分(fen)鐘以內進(jin)行。

操作(zuo)程(cheng)序(xu)總結(jie)：

cusabio elisa試劑盒計(ji)算(suan)

  以標準(zhun)物的(de)濃(nong)度為橫坐(zuo)標(biao)，OD值為縱(zong)坐標，在(zai)坐標紙(zhi)上(shang)繪出(chu)標準(zhun)曲線，根據(ju)樣品(pin)的(de)OD值由(you)標(biao)準曲線查出(chu)相(xiang)應的(de)濃(nong)度；再乘(cheng)以稀(xi)釋(shi)倍數；或(huo)用(yong)標(biao)準(zhun)物(wu)的(de)濃(nong)度與OD值計(ji)算(suan)出標準曲線的(de)直線回歸(gui)方程(cheng)式(shi)，將樣品(pin)的(de)OD值代(dai)入(ru)方程式(shi)，計(ji)算(suan)出樣品(pin)濃度(du)，再(zai)乘(cheng)以稀(xi)釋(shi)倍數，即(ji)為樣品(pin)的(de)實(shi)際濃(nong)度。 

註意(yi)事項(xiang)

1．試劑盒從冷(leng)藏環(huan)境(jing)中取出(chu)應在(zai)室(shi)溫(wen)平(ping)衡(heng)15-30分(fen)鐘(zhong)後方可使(shi)用(yong)，酶標(biao)包被板(ban)開(kai)封後如(ru)未用(yong)完，板條(tiao)應裝入密(mi)封袋(dai)中(zhong)保存。

2．濃(nong)洗滌液可能(neng)會(hui)有(you)結(jie)晶析(xi)出(chu)，稀(xi)釋(shi)時可在(zai)水(shui)浴(yu)中(zhong)加(jia)溫(wen)助(zhu)溶(rong)，洗滌時不(bu)影響結(jie)果(guo)。

3．各步加(jia)樣均(jun)應使(shi)用加樣器(qi)，並經(jing)常校(xiao)對其(qi)準(zhun)確(que)性，以避免(mian)試驗(yan)誤(wu)差(cha)。壹(yi)次(ci)加樣時(shi)間最(zui)好控(kong)制(zhi)在(zai)5分鐘內(nei)，如(ru)標(biao)本數量(liang)多，推薦(jian)使(shi)用排槍(qiang)加(jia)樣。

4．請(qing)每(mei)次測定(ding)的(de)同(tong)時做(zuo)標準曲線，最好做(zuo)復孔(kong)。如(ru)標(biao)本中(zhong)待(dai)測物(wu)質含(han)量(liang)過高（樣本(ben)OD值大(da)於標準品孔(kong)第壹(yi)孔(kong)的(de)OD值），請(qing)先(xian)用樣品(pin)稀(xi)釋(shi)液稀(xi)釋(shi)壹定(ding)倍數（n倍(bei)）後(hou)再測(ce)定(ding)，計(ji)算(suan)時請(qing)最(zui)後乘以總稀(xi)釋(shi)倍數（×n×5）。

5．封板膜(mo)只(zhi)限(xian)壹次性使(shi)用，以避免(mian)交(jiao)叉汙染。

6．底(di)物(wu)請(qing)避(bi)光保存。

7．嚴格(ge)按(an)照(zhao)說(shuo)明書的(de)操作(zuo)進(jin)行，試驗結(jie)果(guo)判定(ding)必須(xu)以酶標(biao)儀(yi)讀(du)數為準.

8．所有(you)樣品(pin)，洗滌液和(he)各種(zhong)廢(fei)棄(qi)物都應按(an)傳染物處(chu)理(li)。

9．本試劑不(bu)同批(pi)號組分(fen)不(bu)得(de)混用(yong)。

保存條(tiao)件(jian)及(ji)有(you)效(xiao)期

1．試劑盒保存：；2-8℃。

2．有(you)效(xiao)期：6個(ge)月(yue)