【概要(yao)描述】多(duo)因子(zi)elisa試(shi)劑盒標本采集(ji)後盡(jin)早(zao)進(jin)行(xing)提(ti)取(qu)，提(ti)取(qu)按相(xiang)關文(wen)獻進行(xing)，提(ti)取(qu)後應(ying)盡(jin)快進行(xing)實驗。若不(bu)能馬上進行(xing)試(shi)驗(yan)，可(ke)將(jiang)標(biao)本(ben)放(fang)於-20℃保(bao)存，但(dan)應(ying)避免反復凍融(rong)

                                                                                                          多(duo)因(yin)子elisa試(shi)劑盒
使用目的：

本試(shi)劑盒用於測定(ding)大鼠(shu)血清，血漿及相關液體樣(yang)本(ben)中含(han)量。

試(shi)劑盒組成：

標本(ben)要(yao)求(qiu)：

1．標本采集(ji)後盡(jin)早(zao)進(jin)行(xing)提(ti)取(qu)，提(ti)取(qu)按相(xiang)關文(wen)獻進行(xing)，提(ti)取(qu)後應(ying)盡(jin)快進行(xing)實驗。若不(bu)能馬上進行(xing)試(shi)驗(yan)，可(ke)將(jiang)標(biao)本(ben)放(fang)於-20℃保(bao)存，但(dan)應(ying)避免反復凍融(rong)

2．不(bu)能檢(jian)測含(han)NaN3的樣(yang)品(pin)，因NaN3抑制辣根(gen)過(guo)氧化物(wu)酶的（HRP）活性(xing)。

操(cao)作步(bu)驟

1.標準(zhun)品(pin)的稀(xi)釋(shi)：本(ben)試(shi)劑盒提(ti)供原(yuan)倍標(biao)準(zhun)品(pin)壹支，用戶可(ke)按(an)照下(xia)列圖(tu)表在(zai)小(xiao)試(shi)管(guan)中(zhong)進(jin)行(xing)稀(xi)釋(shi)。

2.加樣(yang)：分(fen)別設空白孔(kong)（空白對(dui)照孔(kong)不(bu)加樣(yang)品(pin)及酶標(biao)試(shi)劑，其(qi)余(yu)各(ge)步(bu)操(cao)作相(xiang)同(tong)）、標(biao)準(zhun)孔(kong)、待(dai)測樣(yang)品(pin)孔。在酶標(biao)包被板上(shang)標(biao)準(zhun)品(pin)準(zhun)確(que)加樣(yang)50μl，待(dai)測樣(yang)品(pin)孔中先加樣(yang)品(pin)稀(xi)釋(shi)液40μl，然(ran)後再(zai)加待(dai)測樣(yang)品(pin)10μl（樣(yang)品(pin)最終稀(xi)釋(shi)度(du)為5倍）。加樣(yang)將(jiang)樣(yang)品(pin)加於酶(mei)標(biao)板(ban)孔底(di)部，盡(jin)量(liang)不(bu)觸及孔壁，輕(qing)輕(qing)晃動(dong)混(hun)勻(yun)。

3.溫育(yu)：用封板膜封(feng)板後置37℃溫育(yu)30分鐘。   

4.配液：將(jiang)30倍濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌(di)液用蒸餾水30倍稀(xi)釋(shi)後備用

5.洗(xi)滌(di)：小(xiao)心(xin)揭掉(diao)封(feng)板(ban)膜(mo)，棄(qi)去液體，甩幹(gan)，每(mei)孔(kong)加滿洗(xi)滌(di)液，靜(jing)置30秒後棄(qi)去，如(ru)此重復5次(ci)，拍幹(gan)。

6.加酶：每(mei)孔(kong)加入酶(mei)標(biao)試(shi)劑50μl，空白孔(kong)除外(wai)。 

7.溫育(yu)：操(cao)作同(tong)3。

8.洗(xi)滌(di)：操(cao)作同(tong)5。

9.顯(xian)色：每(mei)孔(kong)先(xian)加入顯(xian)色劑A50μl，再(zai)加入顯(xian)色劑B50μl，輕輕震(zhen)蕩混(hun)勻(yun)，37℃避(bi)光顯(xian)色10分鐘.

10.終止：每(mei)孔(kong)加終止液50μl，終止反應(ying)（此時(shi)藍(lan)色立(li)轉黃(huang)色(se)）。

11.測定(ding)：以空(kong)白孔(kong)調零，450nm波長依序測量各(ge)孔的吸光度(du)（OD值）。 測定(ding)應(ying)在加終止液後15分鐘以內進(jin)行(xing)。

操(cao)作程(cheng)序總(zong)結(jie)：

多因子elisa試(shi)劑盒計(ji)算(suan)

  以標(biao)準(zhun)物(wu)的濃度(du)為橫(heng)坐標，OD值(zhi)為縱坐標，在(zai)坐標紙(zhi)上繪(hui)出(chu)標準(zhun)曲(qu)線(xian)，根據樣(yang)品(pin)的OD值由(you)標準(zhun)曲(qu)線(xian)查出(chu)相應(ying)的濃度(du)；再(zai)乘(cheng)以稀(xi)釋(shi)倍數；或用標準(zhun)物(wu)的濃度(du)與OD值計(ji)算(suan)出(chu)標準(zhun)曲(qu)線(xian)的直線(xian)回(hui)歸(gui)方程(cheng)式，將(jiang)樣(yang)品(pin)的OD值代(dai)入方程(cheng)式，計(ji)算(suan)出(chu)樣(yang)品(pin)濃度(du)，再(zai)乘(cheng)以稀(xi)釋(shi)倍數，即(ji)為(wei)樣(yang)品(pin)的實際濃度(du)。 

註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang)

1．試(shi)劑盒從冷藏環(huan)境(jing)中取(qu)出(chu)應(ying)在室溫平(ping)衡(heng)15-30分(fen)鐘(zhong)後方可(ke)使(shi)用，酶標包被板開(kai)封(feng)後如未(wei)用完，板條應(ying)裝入密封袋中(zhong)保存。

2．濃(nong)洗(xi)滌(di)液可(ke)能會(hui)有結晶(jing)析(xi)出(chu)，稀(xi)釋(shi)時(shi)可(ke)在(zai)水(shui)浴中加溫助溶，洗(xi)滌(di)時(shi)不影(ying)響結果(guo)。

3．各(ge)步(bu)加樣(yang)均(jun)應(ying)使用加樣(yang)器，並(bing)經(jing)常校對(dui)其(qi)準(zhun)確(que)性(xing)，以避(bi)免(mian)試(shi)驗(yan)誤(wu)差(cha)。壹(yi)次(ci)加樣(yang)時(shi)間最(zui)好控制在5分(fen)鐘(zhong)內，如(ru)標(biao)本數量(liang)多(duo)，推(tui)薦使用排(pai)槍(qiang)加樣(yang)。

4．請(qing)每(mei)次(ci)測定(ding)的同(tong)時(shi)做標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)，最好做復(fu)孔(kong)。如標本(ben)中待(dai)測物(wu)質含(han)量過(guo)高（樣(yang)本(ben)OD值大於標(biao)準(zhun)品(pin)孔第壹孔(kong)的OD值），請(qing)先(xian)用樣(yang)品(pin)稀(xi)釋(shi)液稀(xi)釋(shi)壹(yi)定(ding)倍數（n倍）後再(zai)測定(ding)，計(ji)算(suan)時(shi)請(qing)最(zui)後乘以總(zong)稀(xi)釋(shi)倍數（×n×5）。

5．封(feng)板(ban)膜只(zhi)限(xian)壹次(ci)性(xing)使(shi)用，以避(bi)免(mian)交(jiao)叉汙(wu)染。

6．底(di)物(wu)請(qing)避(bi)光保(bao)存。

7．嚴(yan)格按(an)照說(shuo)明(ming)書(shu)的操(cao)作進(jin)行(xing)，試(shi)驗(yan)結(jie)果(guo)判定(ding)必(bi)須以酶(mei)標(biao)儀(yi)讀數為(wei)準(zhun).

8．所(suo)有樣(yang)品(pin)，洗(xi)滌(di)液和(he)各(ge)種(zhong)廢(fei)棄(qi)物(wu)都應(ying)按傳染物(wu)處理(li)。

9．本(ben)試(shi)劑不同(tong)批(pi)號組分不(bu)得(de)混(hun)用。

保存條件(jian)及有效(xiao)期

1．試(shi)劑盒保存：；2-8℃。

2．有(you)效期(qi)：6個(ge)月