【概要(yao)描述】人(ren)子(zi)宮肌(ji)瘤(liu)組(zu)織(zhi)源細(xi)胞公司(si)正在出(chu)售的(de)產品(pin)：H-4-Ⅱ-E大鼠肝(gan)癌(ai)細(xi)胞大鼠膀胱平(ping)滑(hua)肌細(xi)胞人睪(gao)丸(wan)支持細胞小(xiao)鼠腎動脈(mai)內(nei)皮細(xi)胞大鼠腎動脈(mai)內(nei)皮細(xi)胞人腎小(xiao)球內(nei)皮細(xi)胞小(xiao)鼠腎動脈(mai)平(ping)滑(hua)肌細(xi)胞大鼠腎動脈(mai)平(ping)滑(hua)肌細(xi)胞小(xiao)鼠腎小(xiao)管(guan)上皮(pi)細胞大鼠腎小(xiao)管(guan)上皮(pi)細胞

人子(zi)宮肌(ji)瘤(liu)組(zu)織(zhi)源分(fen)離(li)自癌組(zu)織(zhi)；癌（cancer）是指(zhi)起(qi)源於上皮(pi)組(zu)織(zhi)的(de)惡性腫瘤(liu)，是(shi)惡性腫瘤(liu)中(zhong)最(zui)常(chang)見的(de)壹類。相對(dui)應(ying)的(de)，起源於間葉(ye)組(zu)織(zhi)的(de)惡性腫瘤(liu)統(tong)稱(cheng)為(wei)肉瘤(liu)。有(you)少數惡性腫瘤(liu)不按(an)上述(shu)原則(ze)命名(ming)，如(ru)腎母(mu)細(xi)胞瘤(liu)、惡性畸胎(tai)瘤(liu)等。壹般人(ren)們(men)所說(shuo)的(de)“癌癥"習(xi)慣(guan)上泛(fan)指(zhi)所(suo)有惡性腫瘤(liu)。癌(ai)癥(zheng)具(ju)有細胞分(fen)化和增(zeng)殖異(yi)常(chang)、生長(chang)失(shi)去(qu)控(kong)制(zhi)、浸(jin)潤性和轉(zhuan)移(yi)性等生物(wu)學特(te)征(zheng)，其發生是(shi)壹個(ge)多因子(zi)、多步(bu)驟的(de)復雜過(guo)程，分(fen)為(wei)致癌(ai)、促癌(ai)、演(yan)進(jin)三(san)個(ge)過(guo)程，與吸(xi)煙(yan)、感(gan)染(ran)、職(zhi)業(ye)暴(bao)露(lu)、環(huan)境(jing)汙染、不合(he)理膳(shan)食、遺(yi)傳(chuan)因素密(mi)切(qie)相關。癌(ai)細(xi)胞，是壹種(zhong)變異(yi)的(de)細胞，是產生癌(ai)癥的(de)病(bing)源。癌(ai)細胞與正常(chang)細(xi)胞不同(tong)，有(you)無(wu)限(xian)增(zeng)殖、可(ke)轉(zhuan)化和易轉(zhuan)移(yi)三大特(te)點，能夠無限(xian)增(zeng)殖並破壞正常(chang)的(de)細胞組(zu)織(zhi)。癌細(xi)胞除(chu)了(le)分(fen)裂失(shi)控(kong)外(wai)（能進(jin)行(xing)多極分(fen)裂），還(hai)會(hui)局(ju)部(bu)侵入周圍正常(chang)組(zu)織(zhi)甚(shen)至經(jing)由(you)體內(nei)循環系(xi)統(tong)或淋(lin)巴(ba)系(xi)統(tong)轉(zhuan)移(yi)到身體其他(ta)部(bu)分(fen)。分(fen)惡性和良(liang)性兩種(zhong)。
方(fang)法簡(jian)介(jie)：

公司(si)實驗(yan)室(shi)分(fen)離(li)的(de)癌組(zu)織(zhi)源采(cai)用膠(jiao)原(yuan)酶消化、經Percoll離心純化制備(bei)而(er)來，細(xi)胞總量(liang)約(yue)為(wei)5×10?cells/瓶(ping)。
質量(liang)檢測：

公司(si)實驗(yan)室(shi)分(fen)離(li)的(de)人子(zi)宮肌(ji)瘤(liu)組(zu)織(zhi)源經(jing)檢測，純度(du)可達90%以(yi)上，且不含(han)有(you)HIV-1、HBV、HCV、支(zhi)原體、細菌(jun)、酵母(mu)和真菌等。

本(ben)公司(si)所有(you)產品(pin)僅(jin)供(gong)科(ke)學實(shi)驗(yan)，不做其他(ta)科(ke)學實(shi)驗(yan)外(wai)的(de)使用！

培養基(ji) 含(han)FBS、生長(chang)添加(jia)劑、Penicillin、Streptomycin等

換液(ye)頻率 每2-3天換(huan)液(ye)壹次(ci)

生長(chang)特性 貼(tie)壁(bi)

細胞形態(tai) 梭形(xing)、多角形(xing)

傳(chuan)代特性 可傳(chuan)5代左右；3代(dai)以(yi)內(nei)狀態(tai)好(hao)

消化液 0.25%yi蛋白(bai)酶

培養條(tiao)件(jian) 氣相(xiang)：空(kong)氣，95%；CO2，5%

準(zhun)備(bei)工作

1. 實驗(yan)器(qi)材(cai)準(zhun)備(bei)：準(zhun)備(bei)無菌(jun)的(de)培養皿、培養瓶(ping)、移液(ye)管(guan)、離心管(guan)、手(shou)術(shu)器(qi)械(xie)等，並進(jin)行(xing)高壓(ya)滅菌或(huo)其他(ta)合(he)適的(de)消毒處(chu)理(li)。

2. 試(shi)劑準(zhun)備(bei)：配(pei)制或(huo)購買(mai)合(he)適的(de)培養基(ji)、消化酶（如(ru)、膠(jiao)原(yuan)酶等）、胎(tai)牛血清(qing)、雙(shuang)抗等試(shi)劑，確保(bao)其無菌(jun)且在(zai)有效期(qi)內(nei)。

3. 實驗(yan)動物或組(zu)織(zhi)來源(yuan)準(zhun)備(bei)：根據實驗需(xu)求(qiu)，選擇(ze)合(he)適的(de)動物並進(jin)行(xing)相(xiang)應(ying)的(de)麻醉或處(chu)死(si)，獲(huo)取(qu)所需(xu)組(zu)織(zhi)；或從(cong)已(yi)有(you)的(de)組(zu)織(zhi)樣本(ben)庫(ku)中(zhong)獲(huo)取(qu)組(zu)織(zhi)。

取(qu)材與處(chu)理(li)

1. 取(qu)材：在(zai)無菌(jun)條(tiao)件(jian)下，迅速(su)取(qu)出(chu)目標組(zu)織(zhi)，盡量(liang)減(jian)少對(dui)組(zu)織(zhi)的(de)損(sun)傷(shang)，並去除(chu)多余(yu)的(de)脂肪、結締組(zu)織(zhi)等非目的(de)組(zu)織(zhi)。

2. 清(qing)洗(xi)：將(jiang)取(qu)出(chu)的(de)組(zu)織(zhi)用預冷(leng)的(de)無菌PBS沖洗數次(ci)，以(yi)去除(chu)血液和雜質(zhi)。

3. 剪切(qie)：將組(zu)織(zhi)剪成(cheng)約(yue)1 - 2mm³的(de)小(xiao)塊(kuai)，以(yi)便後(hou)續(xu)消化。

細胞分(fen)離(li)

1. 消化：將剪(jian)碎的(de)組(zu)織(zhi)塊(kuai)放(fang)入含(han)有(you)適量消(xiao)化酶的(de)離心管(guan)中(zhong)，在(zai)37℃恒溫(wen)搖(yao)床(chuang)或培養箱中(zhong)消(xiao)化壹段時間(jian)。期(qi)間(jian)可(ke)輕輕搖(yao)晃(huang)離心管(guan)，使消(xiao)化更(geng)均勻。

2. 終止(zhi)消化：當組(zu)織(zhi)塊(kuai)大(da)部(bu)分(fen)被消化成單細胞懸液或(huo)小(xiao)細胞團(tuan)時，加(jia)入含(han)血清(qing)的(de)培養基(ji)終止(zhi)消化。

3. 過濾(lv)與離心：用細胞篩過(guo)濾(lv)細胞懸液，去(qu)除(chu)未(wei)消(xiao)化的(de)組(zu)織(zhi)碎片，然後(hou)將濾(lv)液以(yi)適當的(de)轉(zhuan)速(su)離心，收集(ji)細(xi)胞沈(chen)澱。

細胞觀(guan)察(cha)與檢測

1. 日常(chang)觀(guan)察(cha)：每天用倒(dao)置顯(xian)微鏡觀(guan)察(cha)細胞的(de)形態(tai)、生長(chang)狀態(tai)、密(mi)度(du)等，記錄細(xi)胞的(de)變化情況(kuang)，如(ru)發現細(xi)胞汙染或異(yi)常(chang)，及(ji)時采(cai)取(qu)相應(ying)措施。
2. 細(xi)胞計數與活(huo)力(li)檢測：在(zai)需(xu)要(yao)時，可(ke)采(cai)用臺盼藍染(ran)色(se)等方(fang)法對(dui)細胞進(jin)行(xing)計(ji)數和活(huo)力(li)檢測，以(yi)了(le)解(jie)細(xi)胞的(de)生長(chang)情況(kuang)和健(jian)康(kang)狀(zhuang)態(tai)。

壹、取(qu)材與分(fen)離(li)

1. 快(kuai)速(su)操作

- 組(zu)織(zhi)取(qu)材後(hou)需(xu)立即(ji)處(chu)理(li)，避(bi)免長(chang)時間(jian)暴(bao)露(lu)於室(shi)溫或非(fei)營養(yang)環(huan)境(jing)。

- 使用無菌 PBS 或生理(li)鹽水(shui)沖(chong)洗組(zu)織(zhi)，去除(chu)血液、雜質(zhi)。

2. 消化酶選擇(ze)

- 根據組(zu)織(zhi)類型選(xuan)擇(ze)消化酶，避(bi)免過(guo)度(du)消化導(dao)致細(xi)胞損(sun)傷(shang)。

- 消化時間(jian)需(xu)嚴格控(kong)制(zhi)（通常(chang) 10-30 分(fen)鐘(zhong)），可通過顯(xian)微鏡觀(guan)察(cha)細胞解離狀(zhuang)態(tai)。

二(er)、培養條(tiao)件(jian)優化

1. 培養基(ji)選擇(ze)

- 使用含(han)血清(qing)或(huo)特(te)定(ding)生長(chang)因子(zi)的(de)培養基(ji)（如(ru) DMEM、RPMI 1640 等），部(bu)分(fen)細(xi)胞需(xu)添加(jia)胰(yi)島(dao)素(su)、EGF 等。

- 避(bi)免頻繁(fan)更(geng)換培養基(ji)品(pin)牌或(huo)批次(ci)，減少細胞適應(ying)壓(ya)力。

2. 貼(tie)壁(bi)與傳(chuan)代

- 原代(dai)細(xi)胞貼(tie)壁(bi)能力(li)較弱，可能需(xu)要(yao)包被培養皿（如(ru)膠(jiao)原(yuan)蛋白(bai)、多聚賴(lai)氨(an)酸(suan)）。

- 傳(chuan)代時密(mi)度(du)建(jian)議(yi)控(kong)制(zhi)在 70%-80%，過度(du)匯(hui)合(he)會(hui)導(dao)致接觸抑制(zhi)和分(fen)化。

三、汙染控制(zhi)

1. 無菌(jun)操(cao)作

- 全(quan)程在超凈臺(tai)操(cao)作，使(shi)用壹次(ci)性耗材(cai)，避(bi)免交叉汙染。

- 培養基(ji)中(zhong)可(ke)添(tian)加(jia)雙(shuang)抗，但長期(qi)使用可能影響(xiang)細(xi)胞活(huo)性。

2. 支原(yuan)體檢測

- 定期(qi)檢測支(zhi)原體汙染（如(ru) PCR 法），汙染後(hou)需(xu)及(ji)時丟(diu)棄(qi)細(xi)胞。

四、狀(zhuang)態(tai)監(jian)控(kong)

1. 日常(chang)觀(guan)察(cha)

- 每天檢查(zha)細胞形態(tai)、密(mi)度(du)及(ji)培養基(ji)顏色(se)，及(ji)時更(geng)換培養基(ji)（通常(chang)每 2-3 天換液(ye)壹(yi)次(ci)）。

- 異常(chang)形(xing)態(tai)（如(ru)細胞變圓(yuan)、碎片增(zeng)多）可能(neng)提示(shi)汙染或營(ying)養不足。

2. 傳(chuan)代與凍(dong)存

- 原代(dai)細(xi)胞分(fen)裂次(ci)數有(you)限(xian)（壹般 5-10 代(dai)），需(xu)及(ji)時凍(dong)存早(zao)期(qi)代(dai)次(ci)細胞。

- 凍(dong)存液(ye)建(jian)議(yi)使(shi)用 DMSO+血清(qing)（或(huo)專(zhuan)用凍(dong)存培養基(ji)），梯度(du)降溫(wen)後(hou)液氮(dan)保(bao)存。