【概(gai)要(yao)描(miao)述(shu)】小鼠白介(jie)素(su)elisa試(shi)劑(ji)盒標本(ben)采(cai)集後(hou)盡早(zao)進行(xing)提(ti)取，提取按相(xiang)關文(wen)獻進行(xing)，提(ti)取後(hou)應盡快(kuai)進行(xing)實(shi)驗。若不(bu)能馬上進行(xing)試(shi)驗，可將標(biao)本(ben)放於-20℃保(bao)存(cun)，但應避免反復凍(dong)融(rong)

小鼠(shu)白(bai)介(jie)素(su)elisa試(shi)劑(ji)盒
使用(yong)目的(de)：

本(ben)試(shi)劑(ji)盒用(yong)於測定大(da)鼠(shu)血(xue)清，血(xue)漿及相(xiang)關液(ye)體(ti)樣(yang)本(ben)中含量。

試(shi)劑(ji)盒組(zu)成(cheng)：

標(biao)本(ben)要求(qiu)：

1．標本采集(ji)後(hou)盡早(zao)進行(xing)提(ti)取，提取按相(xiang)關文(wen)獻進行(xing)，提(ti)取後(hou)應盡快(kuai)進行(xing)實(shi)驗。若不(bu)能馬上進行(xing)試(shi)驗，可將標(biao)本(ben)放於-20℃保(bao)存(cun)，但應避免反復凍(dong)融(rong)

2．不(bu)能檢(jian)測(ce)含NaN3的樣(yang)品(pin)，因(yin)NaN3抑(yi)制(zhi)辣根(gen)過氧(yang)化物酶的(de)（HRP）活性。

操(cao)作(zuo)步驟

1.標準(zhun)品的(de)稀(xi)釋(shi)：本(ben)試(shi)劑(ji)盒提供原倍標準(zhun)品(pin)壹(yi)支，用(yong)戶可按(an)照(zhao)下列(lie)圖表在(zai)小試(shi)管中進行(xing)稀(xi)釋(shi)。

2.加樣：分(fen)別設空白孔(kong)（空(kong)白對(dui)照(zhao)孔(kong)不(bu)加樣(yang)品及酶標(biao)試(shi)劑(ji)，其(qi)余(yu)各(ge)步(bu)操(cao)作(zuo)相(xiang)同(tong)）、標(biao)準(zhun)孔(kong)、待測樣(yang)品孔(kong)。在(zai)酶標(biao)包被板(ban)上標(biao)準(zhun)品準(zhun)確(que)加(jia)樣(yang)50μl，待測樣(yang)品孔(kong)中(zhong)先(xian)加樣(yang)品(pin)稀(xi)釋液40μl，然後(hou)再加(jia)待測樣(yang)品10μl（樣(yang)品(pin)最終稀釋(shi)度為5倍）。加樣將樣(yang)品(pin)加於(yu)酶標板(ban)孔(kong)底部，盡量不觸(chu)及孔(kong)壁(bi)，輕(qing)輕(qing)晃動(dong)混(hun)勻(yun)。

3.溫(wen)育(yu)：用(yong)封(feng)板(ban)膜封(feng)板(ban)後(hou)置37℃溫(wen)育(yu)30分(fen)鐘(zhong)。

4.配液：將30倍(bei)濃(nong)縮洗(xi)滌液(ye)用(yong)蒸餾(liu)水(shui)30倍稀(xi)釋(shi)後(hou)備(bei)用(yong)

5.洗(xi)滌：小(xiao)心(xin)揭(jie)掉封(feng)板(ban)膜，棄去(qu)液體(ti)，甩(shuai)幹，每孔(kong)加(jia)滿洗(xi)滌液(ye)，靜(jing)置30秒後(hou)棄去(qu)，如此重(zhong)復5次，拍幹。

6.加酶：每孔(kong)加(jia)入(ru)酶標(biao)試(shi)劑(ji)50μl，空(kong)白(bai)孔(kong)除外(wai)。

7.溫(wen)育(yu)：操作(zuo)同(tong)3。

8.洗(xi)滌：操(cao)作(zuo)同(tong)5。

9.顯色：每(mei)孔(kong)先(xian)加入(ru)顯色劑(ji)A50μl，再(zai)加(jia)入(ru)顯色劑(ji)B50μl，輕(qing)輕(qing)震蕩混(hun)勻(yun)，37℃避光(guang)顯色10分(fen)鐘(zhong).

10.終止：每(mei)孔(kong)加(jia)終止液(ye)50μl，終止反應（此時(shi)藍(lan)色立(li)轉黃色(se)）。

11.測定：以(yi)空白(bai)孔(kong)調(tiao)零，450nm波(bo)長(chang)依(yi)序(xu)測量各(ge)孔(kong)的(de)吸(xi)光度（OD值）。 測定應在(zai)加終止液(ye)後(hou)15分(fen)鐘(zhong)以(yi)內進行(xing)。

操(cao)作(zuo)程序(xu)總結：

小鼠(shu)白(bai)介(jie)素(su)elisa試(shi)劑(ji)盒計(ji)算(suan)

以(yi)標準(zhun)物(wu)的(de)濃度為橫(heng)坐(zuo)標，OD值為縱(zong)坐(zuo)標，在(zai)坐(zuo)標紙(zhi)上繪(hui)出(chu)標準(zhun)曲線，根(gen)據(ju)樣品(pin)的(de)OD值由標準曲(qu)線查(zha)出(chu)相(xiang)應的濃度；再(zai)乘(cheng)以(yi)稀釋(shi)倍(bei)數(shu)；或用(yong)標準物(wu)的(de)濃度與OD值計(ji)算(suan)出(chu)標準(zhun)曲線的(de)直線回(hui)歸(gui)方(fang)程(cheng)式(shi)，將樣(yang)品(pin)的OD值代(dai)入(ru)方程(cheng)式(shi)，計(ji)算(suan)出(chu)樣品(pin)濃度，再(zai)乘(cheng)以(yi)稀釋(shi)倍(bei)數(shu)，即(ji)為樣品的實(shi)際濃(nong)度。

註(zhu)意(yi)事項

1．試(shi)劑(ji)盒從冷(leng)藏環境中取出(chu)應在(zai)室溫(wen)平(ping)衡(heng)15-30分(fen)鐘(zhong)後(hou)方可使用(yong)，酶標包被板(ban)開封(feng)後(hou)如未(wei)用(yong)完，板(ban)條(tiao)應裝(zhuang)入(ru)密(mi)封(feng)袋(dai)中(zhong)保(bao)存。

2．濃(nong)洗(xi)滌液(ye)可能會有(you)結晶析(xi)出(chu)，稀釋(shi)時(shi)可在(zai)水(shui)浴中(zhong)加溫(wen)助(zhu)溶，洗(xi)滌時(shi)不影(ying)響結果。

3．各(ge)步(bu)加(jia)樣(yang)均應使用(yong)加樣器(qi)，並(bing)經常(chang)校對其(qi)準(zhun)確(que)性，以(yi)避免(mian)試(shi)驗誤(wu)差。壹(yi)次加樣時(shi)間最好(hao)控制(zhi)在(zai)5分(fen)鐘(zhong)內，如標(biao)本數(shu)量多，推(tui)薦(jian)使用(yong)排槍(qiang)加樣(yang)。

4．請每次測定的(de)同(tong)時(shi)做標(biao)準曲(qu)線，最好(hao)做(zuo)復孔(kong)。如(ru)標本(ben)中待測物(wu)質含量過高（樣本(ben)OD值大於標準(zhun)品(pin)孔(kong)第壹(yi)孔(kong)的(de)OD值），請先(xian)用(yong)樣品稀(xi)釋(shi)液稀(xi)釋(shi)壹(yi)定倍(bei)數(shu)（n倍）後(hou)再測(ce)定，計(ji)算(suan)時(shi)請最後(hou)乘以(yi)總稀釋(shi)倍數(shu)（×n×5）。

5．封(feng)板(ban)膜只限壹(yi)次性使用(yong)，以(yi)避免(mian)交叉(cha)汙(wu)染。

6．底物請(qing)避(bi)光保存(cun)。

7．嚴(yan)格按照(zhao)說(shuo)明書的操作(zuo)進行(xing)，試(shi)驗結果判定必(bi)須以(yi)酶標(biao)儀讀數為準.

8．所有(you)樣(yang)品(pin)，洗(xi)滌液(ye)和(he)各(ge)種廢(fei)棄物(wu)都應按傳染物(wu)處理(li)。

9．本(ben)試(shi)劑(ji)不(bu)同(tong)批(pi)號(hao)組(zu)分(fen)不(bu)得混(hun)用(yong)。

保存條(tiao)件(jian)及有(you)效(xiao)期(qi)

1．試(shi)劑(ji)盒保存(cun)：；2-8℃。

2．有(you)效(xiao)期(qi)：6個月(yue)