【概要(yao)描述(shu)】羊elisa試(shi)劑(ji)盒(he)標(biao)本(ben)采(cai)集後(hou)盡早(zao)進行(xing)提(ti)取，提(ti)取按相(xiang)關文(wen)獻(xian)進行(xing)，提(ti)取後(hou)應盡快(kuai)進行(xing)實(shi)驗。若(ruo)不(bu)能馬(ma)上(shang)進行(xing)試(shi)驗(yan)，可(ke)將(jiang)標(biao)本放於(yu)-20℃保存(cun)，但應避(bi)免反復凍(dong)融

                                                                                                         羊elisa試(shi)劑(ji)盒(he)
使(shi)用(yong)目(mu)的(de)：

本(ben)試(shi)劑(ji)盒(he)用(yong)於(yu)測(ce)定(ding)大(da)鼠血(xue)清(qing)，血漿及(ji)相(xiang)關液(ye)體(ti)樣本(ben)中(zhong)含量。

試(shi)劑(ji)盒(he)組成(cheng)：

標(biao)本(ben)要(yao)求：

1．標本(ben)采(cai)集後(hou)盡早(zao)進行(xing)提(ti)取，提(ti)取按相(xiang)關文(wen)獻(xian)進行(xing)，提(ti)取後(hou)應盡快(kuai)進行(xing)實(shi)驗。若(ruo)不(bu)能馬(ma)上(shang)進行(xing)試(shi)驗(yan)，可(ke)將(jiang)標(biao)本放於(yu)-20℃保存(cun)，但應避(bi)免反復凍(dong)融

2．不(bu)能檢測(ce)含NaN3的樣品(pin)，因NaN3抑制辣根過(guo)氧化物(wu)酶(mei)的（HRP）活性。

操(cao)作(zuo)步驟

1.標(biao)準品(pin)的稀(xi)釋(shi)：本試(shi)劑(ji)盒(he)提(ti)供(gong)原倍(bei)標準品(pin)壹支，用(yong)戶(hu)可按照下(xia)列圖表在(zai)小試(shi)管中(zhong)進行(xing)稀(xi)釋(shi)。

2.加樣：分(fen)別(bie)設(she)空(kong)白(bai)孔（空(kong)白(bai)對(dui)照孔(kong)不(bu)加樣品(pin)及(ji)酶(mei)標試(shi)劑(ji)，其(qi)余(yu)各步操(cao)作(zuo)相(xiang)同(tong)）、標(biao)準(zhun)孔(kong)、待測(ce)樣品(pin)孔。在(zai)酶標(biao)包(bao)被板(ban)上(shang)標(biao)準品(pin)準確(que)加樣50μl，待測(ce)樣品(pin)孔中(zhong)先(xian)加樣品(pin)稀釋(shi)液(ye)40μl，然後(hou)再(zai)加待測(ce)樣品(pin)10μl（樣品(pin)最終(zhong)稀釋(shi)度為(wei)5倍）。加樣將(jiang)樣品(pin)加於(yu)酶標(biao)板(ban)孔(kong)底部，盡(jin)量不(bu)觸及(ji)孔(kong)壁(bi)，輕(qing)輕(qing)晃(huang)動混勻(yun)。

3.溫(wen)育(yu)：用(yong)封板(ban)膜封板(ban)後(hou)置(zhi)37℃溫(wen)育(yu)30分(fen)鐘。   

4.配液(ye)：將30倍(bei)濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌液(ye)用(yong)蒸(zheng)餾水(shui)30倍稀釋(shi)後(hou)備用(yong)

5.洗(xi)滌：小心揭掉(diao)封板(ban)膜，棄去液(ye)體(ti)，甩(shuai)幹(gan)，每孔加滿洗(xi)滌液(ye)，靜置(zhi)30秒後(hou)棄去，如(ru)此重(zhong)復5次(ci)，拍幹(gan)。

6.加酶：每孔加入酶標試(shi)劑(ji)50μl，空(kong)白(bai)孔除外(wai)。 

7.溫(wen)育(yu)：操(cao)作(zuo)同(tong)3。

8.洗(xi)滌：操(cao)作(zuo)同(tong)5。

9.顯(xian)色：每孔先加入顯(xian)色劑(ji)A50μl，再(zai)加入顯(xian)色劑(ji)B50μl，輕(qing)輕(qing)震蕩混(hun)勻(yun)，37℃避(bi)光顯(xian)色10分(fen)鐘.

10.終(zhong)止：每孔加終(zhong)止液(ye)50μl，終(zhong)止反(fan)應（此時藍色立(li)轉(zhuan)黃色）。

11.測(ce)定(ding)：以(yi)空(kong)白(bai)孔調零，450nm波長依(yi)序(xu)測(ce)量各孔(kong)的(de)吸(xi)光度(du)（OD值）。 測(ce)定(ding)應在(zai)加終(zhong)止液(ye)後(hou)15分鐘以(yi)內(nei)進行(xing)。

操(cao)作(zuo)程(cheng)序(xu)總(zong)結：

羊(yang)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)計算

  以(yi)標(biao)準(zhun)物(wu)的(de)濃(nong)度(du)為(wei)橫(heng)坐(zuo)標(biao)，OD值(zhi)為縱坐(zuo)標(biao)，在(zai)坐標(biao)紙上(shang)繪(hui)出標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)，根(gen)據(ju)樣品(pin)的OD值(zhi)由(you)標(biao)準曲線(xian)查(zha)出相(xiang)應的濃(nong)度(du)；再(zai)乘(cheng)以(yi)稀(xi)釋(shi)倍數；或(huo)用(yong)標(biao)準(zhun)物(wu)的濃(nong)度(du)與(yu)OD值(zhi)計算出標準曲(qu)線(xian)的(de)直線(xian)回歸(gui)方程(cheng)式(shi)，將樣品(pin)的OD值(zhi)代(dai)入方(fang)程(cheng)式(shi)，計算出樣品(pin)濃(nong)度(du)，再(zai)乘(cheng)以(yi)稀(xi)釋(shi)倍數，即為(wei)樣品(pin)的實(shi)際(ji)濃(nong)度(du)。 

註(zhu)意(yi)事(shi)項

1．試(shi)劑(ji)盒(he)從冷(leng)藏環(huan)境中(zhong)取出應在(zai)室溫(wen)平衡(heng)15-30分鐘後(hou)方可使(shi)用(yong)，酶(mei)標(biao)包(bao)被板(ban)開(kai)封後(hou)如(ru)未用(yong)完，板(ban)條(tiao)應裝入(ru)密(mi)封袋中(zhong)保(bao)存。

2．濃(nong)洗(xi)滌液(ye)可能會有結晶析出，稀(xi)釋(shi)時可在(zai)水浴中(zhong)加溫(wen)助溶(rong)，洗(xi)滌時不(bu)影響(xiang)結果。

3．各步加樣均(jun)應使用(yong)加樣器，並經(jing)常(chang)校對(dui)其(qi)準確(que)性(xing)，以(yi)避(bi)免試(shi)驗(yan)誤差(cha)。壹次(ci)加樣時間(jian)最好控(kong)制在(zai)5分鐘內，如(ru)標本(ben)數量多(duo)，推(tui)薦使用(yong)排(pai)槍加樣。

4．請(qing)每次測(ce)定(ding)的同時做標(biao)準曲線(xian)，最好做復孔(kong)。如(ru)標本(ben)中(zhong)待測(ce)物(wu)質(zhi)含量過(guo)高（樣本(ben)OD值(zhi)大(da)於(yu)標準(zhun)品(pin)孔第(di)壹(yi)孔(kong)的OD值），請(qing)先(xian)用(yong)樣品(pin)稀釋(shi)液(ye)稀釋(shi)壹定(ding)倍數（n倍）後(hou)再(zai)測(ce)定(ding)，計算時請(qing)最後(hou)乘(cheng)以(yi)總(zong)稀(xi)釋(shi)倍數（×n×5）。

5．封板(ban)膜只限壹(yi)次性使(shi)用(yong)，以(yi)避(bi)免交叉汙染(ran)。

6．底物請(qing)避(bi)光保存。

7．嚴(yan)格按照說(shuo)明書的操(cao)作(zuo)進行(xing)，試(shi)驗(yan)結果判定(ding)必須以(yi)酶(mei)標(biao)儀(yi)讀(du)數為準(zhun).

8．所(suo)有(you)樣品(pin)，洗(xi)滌液(ye)和(he)各種廢棄物(wu)都(dou)應按傳(chuan)染(ran)物(wu)處(chu)理。

9．本(ben)試(shi)劑(ji)不(bu)同批號組分(fen)不(bu)得(de)混用(yong)。

保(bao)存(cun)條(tiao)件及(ji)有(you)效期

1．試(shi)劑(ji)盒(he)保(bao)存(cun)：；2-8℃。

2．有效期：6個(ge)月