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環(huan)子孢(bao)子蛋(dan)白(約氏(shi)瘧原蟲)抗體(ti)樣本(ben)的物(wu)種(zhong) 應選(xuan)擇物(wu)種(zhong)相(xiang)同(tong)或有(you)交(jiao)叉(cha)反(fan)應的抗體(ti),抗體(ti)可能與(yu)不(bu)同(tong)物(wu)種(zhong)的同(tong)種(zhong)靶蛋(dan)白(bai)有(you)交(jiao)叉(cha)反(fan)應,因其氨基(ji)酸序(xu)列同(tong)源(yuan)性(xing)較(jiao)高(gao),如(ru)果樣本的種(zhong)類未列入(ru)抗體(ti)說明書(shu)上的交(jiao)叉反(fan)應種(zhong)屬表(biao)中(zhong),並(bing)不(bu)意(yi)味著(zhe)該抗體(ti)不(bu)適用(yong)於(yu)檢測該(gai)物(wu)種(zhong)的蛋(dan)白,而(er)只是表(biao)示(shi)該(gai)物(wu)種(zhong)尚未用(yong)此(ci)抗體(ti)檢測驗(yan)證(zheng)過,應通過序列比(bi)對的方(fang)法來(lai)預測交(jiao)叉(cha)反應(ying),可應用(yong)Expasy 和 NCBI BLAST 來(lai)進(jin)行不(bu)同(tong)物(wu)種(zhong)蛋白(bai)同(tong)源(yuan)性(xing)比(bi)對。
環(huan)子孢(bao)子蛋(dan)白(約氏(shi)瘧原蟲)抗體(ti)壹抗宿主(zhu)物(wu)種(zhong)的選(xuan)擇壹般(ban)說來(lai),在(zai)使(shi)用(yong)偶(ou)聯二(er)抗結合(he)無(wu)偶(ou)聯物(wu)的壹抗時,壹抗宿主(zhu)動物(wu)的物(wu)種(zhong)選擇較(jiao)為(wei)重要,對於(yu)免疫組(zu)化而言(yan),盡(jin)可能選擇與(yu)樣本不(bu)同(tong)種(zhong)系(xi)物(wu)種(zhong)的壹抗,從而(er)避免二(er)抗與(yu)樣本內(nei)源(yuan)性(xing)免(mian)疫球蛋白(bai)產生交叉反應(ying),例如(ru):檢測小(xiao)鼠(shu)樣本蛋白,則(ze)不(bu)應選(xuan)擇小(xiao)鼠(shu)或大鼠(shu)源(yuan)的壹抗,選兔(tu)源(yuan)的壹抗,則(ze)二(er)抗則(ze)可選擇偶(ou)聯了(le)檢測分(fen)子(zi)(酶(mei)、熒(ying)光素(su)、等)的抗兔(tu)IgG。
如(ru)果選擇有(you)偶(ou)聯物(wu)的壹抗則(ze)不(bu)適用(yong)上(shang)述(shu)情況(kuang),除(chu)免(mian)疫組(zu)化外(wai)的其(qi)它對不(bu)含內(nei)源(yuan)性(xing)免(mian)疫球蛋白(bai)樣(yang)本的檢測方(fang)法,則(ze)抗體(ti)宿主(zhu)物(wu)種(zhong)的影響不(bu)大,如(ru)對不(bu)含IgG 的細(xi)胞裂(lie)解(jie)物(wu)樣本(ben)的western blotting檢測,盡(jin)管如此,含有(you)血清(qing)的組(zu)織(zhi)裂(lie)解(jie)物(wu)和組(zu)織(zhi)培(pei)養上(shang)清中含(han)有(you)免(mian)疫球蛋白(bai),還(hai)原變性(xing)樣(yang)本(ben)中(zhong)含IgG,在western blot 檢測中(zhong)則(ze)結(jie)合出(chu)現(xian)IgG 分子50 and 25 kDa 的重鏈(lian)和輕(qing)鏈條帶(dai)。
二(er)抗的選(xuan)擇 二(er)抗應選(xuan)用(yong)與(yu)使用(yong)的壹抗相(xiang)同(tong)的物(wu)種(zhong)來(lai)源(yuan),例如(ru):如(ru)果(guo)妳(ni)的壹抗是小(xiao)鼠(shu)的單(dan)克隆(long)抗體(ti),二抗則(ze)選(xuan)抗小鼠(shu)的二(er)抗anti-mouse secondary。建(jian)議檢查(zha)二(er)抗說明書(shu)確(que)保(bao)該抗體(ti)適用(yong)於(yu)妳(ni)的檢測應(ying)用(yong), 二(er)抗壹般(ban)連接熒光素FITC 或(huo)發(fa)光(guang)團。
上海谷(gu)研生物(wu)科(ke)技有(you)限(xian)公(gong)司(si)特(te)殊抗體(ti)的保(bao)存條件:
. 酶(mei)聯(lian)抗體(ti):永遠保(bao)存在(zai)4 度,避免(mian)凍起(qi)來(lai)。否(fou)則(ze)會(hui)導致酶(mei)活(huo)性(xing)的下(xia)降或(huo)者喪失
2. 偶(ou)聯抗體(ti):所有(you)偶(ou)聯抗體(ti)都是(shi)在棕(zong)色(se)管中或使用(yong)錫(xi)箔(bo)紙避(bi)光保(bao)存。尤(you)其是(shi)熒光抗體(ti),對
光極(ji)為(wei)敏(min)感(gan),因(yin)此(ci)在所有(you)的實(shi)驗階(jie)段(duan)也是(shi)要避光操作的!
3. IgG3 的同(tong)型對照:永(yong)遠保(bao)存在(zai)4 度,避免(mian)凍起(qi)來(lai)。因(yin)為(wei)如(ru)果(guo)出(chu)現(xian)凍融(rong)過程(cheng),該(gai)抗體(ti)非(fei)常
容易(yi)形(xing)成(cheng)多聚(ju)體(ti)無(wu)論(lun)是保(bao)存還(hai)是運(yun)輸(shu),避(bi)免反復凍融(rong)!
反復(fu)凍融(rong)會(hui)導致抗體(ti)變性(xing),導致多(duo)聚(ju)體(ti)形(xing)成(cheng),從而(er)降低抗體(ti)的結(jie)合能力(li)!
其(qi)它相(xiang)關(guan)信息:
FastRuler™Hige Range DNA Ladder 標(biao)準(zhun)分(fen)子(zi)量馬克
O'RangeRuler™ 00bp DNA Ladder, ready-to-use 標(biao)準(zhun)分(fen)子(zi)量馬克
ZipRulerTM Express DNA Ladder Set , Ready-to-use 標(biao)準(zhun)分(fen)子(zi)量馬克
25bp DNA Fragment 標(biao)準(zhun)分(fen)子(zi)量馬克
200bp DNA Fragment 標(biao)準(zhun)分(fen)子(zi)量馬克
600bp DNA Fragment 標(biao)準(zhun)分(fen)子(zi)量馬克
900bp DNA Fragment 標(biao)準(zhun)分(fen)子(zi)量馬克
3000bp DNA Fragment 標(biao)準(zhun)分(fen)子(zi)量馬克
5000bp DNA Fragment 標(biao)準(zhun)分(fen)子(zi)量馬克
7000bp DNA Fragment 標(biao)準(zhun)分(fen)子(zi)量馬克
50bp DNA Ladder, Ready-to-use 標(biao)準(zhun)分(fen)子(zi)量馬克
DNA Ladder-H, Ready-to-use 標(biao)準(zhun)分(fen)子(zi)量馬克
00bp Plus DNA Ladder, Ready-to-use 標(biao)準(zhun)分(fen)子(zi)量馬克
DNA Marker S, Ready-to-use 標(biao)準(zhun)分(fen)子(zi)量馬克
00 +50bp DNA Ladder, DNA Marker -J, Ready-to-use 標(biao)準(zhun)分(fen)子(zi)量馬克
00 +2 +3kb DNA Ladder-M, Ready-to-use 標(biao)準(zhun)分(fen)子(zi)量馬克
關(guan)於(yu)加入(ru)甘(gan)油(you)保(bao)存:有(you)些人會(hui)加50%的甘(gan)油到(dao)抗體(ti)中來(lai)避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍融(rong),甘油(you)在(zai)-20 度 會(hui)降(jiang)低冰(bing)點。這(zhe)對很多(duo)抗體(ti)可能是可行的。但(dan)是abcam 僅對非(fei)常小的壹部(bu)分抗體(ti)檢測過其在這種(zhong)條件下(xia)的穩定(ding)性(xing);而(er)abcam 只對按照(zhao)條件保(bao)存的抗體(ti)提供(gong)質(zhi)量保(bao)證!加入(ru)甘(gan)油(you)的溶(rong)液不(bu)建(jian)議在-80 度保(bao)存,因(yin)為(wei)這(zhe)已(yi)經超過了甘油的冰(bing)點。如(ru)果您要加入(ru)甘(gan)油(you)來(lai)保(bao)存抗體(ti)的話,請謹(jin)慎註意(yi)無(wu)菌(jun)操作,避免(mian)汙(wu)染(ran)!
關(guan)於(yu)蛋白保(bao)護劑(ji):
蛋白(bai)在高(gao)濃度時更不(bu)容易(yi)降(jiang)解(jie)( mg/ml 或(huo)者更(geng)高(gao)),這(zhe)就是為(wei)什(shen)麽(me)在抗體(ti)中加入(ru)BSA 之(zhi)類作為(wei)穩定(ding)劑(ji)的原因了;另(ling)壹方面,加入(ru)的蛋(dan)白也可以減(jian)少抗體(ti)由於(yu)管壁吸附(fu)所造(zao)成(cheng)的損失。但(dan)是如果(guo)抗體(ti)要用(yong)來(lai)標(biao)記(ji)的話,則(ze)不(bu)能加入(ru)蛋(dan)白(bai)穩定(ding)劑(ji),因為(wei)這(zhe)些穩定(ding)劑(ji)會(hui)和抗體(ti)壹起競爭(zheng)結(jie)合標(biao)記(ji)物(wu)。
企(qi)業(ye)信息
ENTERPRISE INFORMATION上(shang)海谷(gu)研實(shi)業有(you)限(xian)公(gong)司(si)
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