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C-反應(ying)蛋(dan)白(bai)(抗原)樣(yang)本的(de)物種(zhong) 應(ying)選擇(ze)物種(zhong)相(xiang)同(tong)或(huo)有交叉反(fan)應(ying)的(de)抗體(ti),抗體(ti)可能(neng)與(yu)不同(tong)物種(zhong)的同(tong)種(zhong)靶(ba)蛋(dan)白(bai)有交叉反(fan)應(ying),因(yin)其氨(an)基酸(suan)序列(lie)同源(yuan)性較(jiao)高,如(ru)果(guo)樣(yang)本的(de)種(zhong)類未列(lie)入抗體(ti)說明(ming)書上(shang)的(de)交叉反(fan)應(ying)種(zhong)屬(shu)表中(zhong),並(bing)不(bu)意味(wei)著(zhe)該抗體(ti)不適(shi)用(yong)於檢(jian)測該物(wu)種(zhong)的蛋(dan)白(bai),而(er)只是表示該(gai)物種(zhong)尚未用(yong)此抗體(ti)檢測(ce)驗(yan)證(zheng)過,應(ying)通過序列(lie)比(bi)對(dui)的(de)方(fang)法來(lai)預(yu)測(ce)交叉反(fan)應(ying),可(ke)應(ying)用(yong)Expasy 和 NCBI BLAST 來(lai)進(jin)行(xing)不(bu)同(tong)物(wu)種(zhong)蛋(dan)白(bai)同源(yuan)性比(bi)對(dui)。
C-反(fan)應(ying)蛋(dan)白(bai)(抗原)壹(yi)抗宿主(zhu)物種(zhong)的選擇(ze)壹般說(shuo)來(lai),在使用偶(ou)聯(lian)二(er)抗結合(he)無(wu)偶(ou)聯(lian)物(wu)的壹(yi)抗時,壹(yi)抗宿主(zhu)動(dong)物的(de)物種(zhong)選擇(ze)較(jiao)為(wei)重要,對(dui)於免(mian)疫組化(hua)而(er)言(yan),盡(jin)可(ke)能(neng)選擇(ze)與(yu)樣本不(bu)同種(zhong)系物(wu)種(zhong)的壹(yi)抗,從而(er)避免二抗與(yu)樣本內(nei)源(yuan)性免(mian)疫(yi)球(qiu)蛋(dan)白(bai)產生交叉反(fan)應(ying),例(li)如:檢測小(xiao)鼠(shu)樣(yang)本蛋(dan)白(bai),則不(bu)應(ying)選擇(ze)小(xiao)鼠(shu)或(huo)大鼠(shu)源(yuan)的壹(yi)抗,選兔(tu)源(yuan)的壹(yi)抗,則二(er)抗則可(ke)選擇(ze)偶(ou)聯(lian)了(le)檢測(ce)分子(zi)(酶(mei)、熒光素(su)、等(deng))的抗兔(tu)IgG。
如(ru)果(guo)選擇(ze)有偶(ou)聯(lian)物(wu)的壹(yi)抗則不(bu)適(shi)用(yong)上(shang)述(shu)情況,除(chu)免疫(yi)組化(hua)外(wai)的其它(ta)對不含(han)內(nei)源(yuan)性免(mian)疫(yi)球(qiu)蛋(dan)白(bai)樣本的(de)檢測方(fang)法,則抗體(ti)宿主(zhu)物種(zhong)的影響(xiang)不大,如對(dui)不(bu)含IgG 的(de)細胞裂(lie)解物(wu)樣本的(de)western blotting檢測,盡(jin)管(guan)如(ru)此,含有(you)血清(qing)的(de)組織裂(lie)解物(wu)和組織培(pei)養上(shang)清(qing)中(zhong)含有(you)免(mian)疫(yi)球(qiu)蛋(dan)白(bai),還原變(bian)性樣(yang)本中(zhong)含IgG,在western blot 檢測中(zhong)則結(jie)合(he)出(chu)現(xian)IgG 分子50 and 25 kDa 的重鏈(lian)和輕(qing)鏈(lian)條帶(dai)。
二(er)抗的選擇(ze) 二抗應(ying)選用與(yu)使用(yong)的壹(yi)抗相(xiang)同(tong)的(de)物(wu)種(zhong)來(lai)源(yuan),例如(ru):如(ru)果(guo)妳的(de)壹(yi)抗是小(xiao)鼠(shu)的(de)單(dan)克隆抗體(ti),二抗則選抗小(xiao)鼠(shu)的(de)二(er)抗anti-mouse secondary。建(jian)議(yi)檢查(zha)二(er)抗說明(ming)書確保該抗體(ti)適(shi)用(yong)於妳的(de)檢(jian)測應(ying)用(yong), 二抗壹般(ban)連(lian)接熒(ying)光素(su)FITC 或(huo)發(fa)光團。
上(shang)海(hai)谷(gu)研(yan)生物科(ke)技有限(xian)公(gong)司(si)特(te)殊抗體(ti)的保存條件(jian):
. 酶(mei)聯抗體(ti):永遠(yuan)保存在4 度,避免凍起(qi)來(lai)。否則會導(dao)致酶(mei)活性的(de)下降(jiang)或(huo)者喪失(shi)
2. 偶(ou)聯(lian)抗體(ti):所有(you)偶(ou)聯(lian)抗體(ti)都是(shi)在棕色管中(zhong)或(huo)使用(yong)錫箔紙避光保存。尤其是(shi)熒(ying)光抗體(ti),對
光極為敏感(gan),因此在所有的實(shi)驗(yan)階段也是要(yao)避(bi)光操作(zuo)的!
3. IgG3 的同型對照:永(yong)遠(yuan)保存在4 度,避免凍起(qi)來(lai)。因為(wei)如(ru)果(guo)出(chu)現(xian)凍(dong)融過程(cheng),該(gai)抗體(ti)非常(chang)
容(rong)易形(xing)成(cheng)多(duo)聚(ju)體(ti)無論(lun)是(shi)保存還是(shi)運輸(shu),避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍融(rong)!
反(fan)復(fu)凍融(rong)會導(dao)致抗體(ti)變(bian)性,導(dao)致(zhi)多(duo)聚體(ti)形(xing)成(cheng),從而(er)降(jiang)低抗體(ti)的結(jie)合(he)能力!
其它(ta)相(xiang)關信息(xi):
木(mu)瓜(gua)蛋(dan)白(bai)酶(mei)/番(fan)木瓜(gua)酶(mei)/木瓜(gua)朊(ruan)酶(mei)/番(fan)瓜(gua)酵(jiao)素(su)/木(mu)瓜(gua)酶(mei)/Papain
酸(suan)性蛋(dan)白(bai)酶(mei)/Acidic Protease
/分散(san)酶(mei)/Neutral protease/Dispase
/鏈(lian)絲菌蛋(dan)白(bai)酶(mei)/鏈(lian)黴菌蛋(dan)白(bai)酶(mei)/Pronase E
抗蛋(dan)白(bai)酶(mei)/Antipain dihydrochloride
酯酶(mei)(豬胰)/膽甾醇(chun)酯酶(mei)(豬胰)/Cholesterol esterase
糖(tang)化(hua)酶(mei)/糖(tang)化(hua)/澱(dian)粉葡(pu)萄糖(tang)苷(gan)酶(mei)/葡萄(tao)糖(tang)/γ-/α-,4-葡(pu)萄糖(tang)水(shui)解酶(mei)/澱(dian)粉脫脂酶(mei)/Amyloglucosidase from aspergillus niger
乙酰(xian)/乙酰(xian)鈉鹽/Acetyl CoA
葡萄(tao)糖(tang)氧(yang)化(hua)酶(mei)/GOX/GOD/Glucose oxidase
D-α-氨(an)基氧(yang)化(hua)酶(mei)/D-氨(an)基酸(suan)氧化(hua)酶(mei)/D-AAO
L-氨(an)基酸(suan)氧化(hua)酶(mei)/L-AAO/TM-LAO/L-amino acid oxidase
己(ji)糖(tang)激(ji)酶(mei)/己(ji)糖(tang)磷(lin)酸(suan)激酶(mei)/Hexokinase from Saccharomyces cerevisiae
(豬胃粘(zhan)膜)/胃液(ye)素(su)/胃朊(ruan)酶(mei)/蛋(dan)白(bai)酵(jiao)素(su)/酸(suan)腈酶(mei)/百布(bu)聖/Pepsin(porcine stomach mucose)
粉/胰酵(jiao)素(su)/胰醇(chun)素(su)/胰液(ye)素(su)/Pancreatin
(牛(niu)胰)/Trypsin(bovine pancreas)
(豬胰)/Trypsin(porcine pancreas)
關於加入甘油(you)保存:有些(xie)人會加50%的甘(gan)油到抗體(ti)中(zhong)來(lai)避免(mian)反(fan)復(fu)凍融(rong),甘(gan)油(you)在-20 度 會降(jiang)低冰(bing)點(dian)。這對很(hen)多(duo)抗體(ti)可能(neng)是(shi)可行(xing)的(de)。但(dan)是(shi)abcam 僅(jin)對非常(chang)小(xiao)的壹部分(fen)抗體(ti)檢測(ce)過其在這種(zhong)條件(jian)下(xia)的穩(wen)定(ding)性(xing);而(er)abcam 只對按(an)照(zhao)條件(jian)保存的抗體(ti)提供質(zhi)量(liang)保證(zheng)!加入甘油(you)的溶液(ye)不建(jian)議(yi)在-80 度保存,因為(wei)這已(yi)經(jing)超(chao)過了甘(gan)油的冰(bing)點(dian)。如(ru)果(guo)您要加入甘油(you)來(lai)保存抗體(ti)的話(hua),請(qing)謹(jin)慎註意無菌操作(zuo),避免汙染(ran)!
關於蛋(dan)白(bai)保護(hu)劑(ji):
蛋(dan)白(bai)在高濃(nong)度時更(geng)不容(rong)易降(jiang)解( mg/ml 或(huo)者更(geng)高),這(zhe)就(jiu)是為什麽(me)在抗體(ti)中(zhong)加入BSA 之類(lei)作為穩(wen)定(ding)劑(ji)的原因(yin)了(le);另壹(yi)方(fang)面(mian),加入的蛋(dan)白(bai)也可以減(jian)少(shao)抗體(ti)由於管(guan)壁吸附所(suo)造成(cheng)的(de)損(sun)失(shi)。但是(shi)如果(guo)抗體(ti)要用(yong)來(lai)標記(ji)的話(hua),則不(bu)能(neng)加入蛋(dan)白(bai)穩定劑(ji),因(yin)為(wei)這些(xie)穩定(ding)劑會和(he)抗體(ti)壹起(qi)競(jing)爭結合標(biao)記(ji)物。
企業信息(xi)
ENTERPRISE INFORMATION上(shang)海(hai)谷(gu)研(yan)實業有限公(gong)司(si)
3004918891發(fa)送信件(jian)產(chan)品(pin)分類
CLASSIFICATION相(xiang)關文章(zhang)
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