【概(gai)要描述】大(da)鼠(shu)棕色(se)脂肪(fang)幹(gan)細胞公(gong)司(si)正在(zai)出(chu)售的產(chan)品(pin)：M14黑(hei)瘤(liu)豬子(zi)宮(gong)內膜(mo)基質(zhi)細胞豬骨骼(ge)肌(ji)細胞豬皮膚(fu)成(cheng)纖維(wei)細胞豬骨髓(sui)間充(chong)質(zhi)幹細胞豬脂肪(fang)幹(gan)細胞豬B淋巴(ba)細胞豬視(shi)網(wang)膜色(se)上皮(pi)細胞 豬鼻腔粘(zhan)膜(mo)上皮(pi)細胞羊(yang)肺(fei)微(wei)血(xue)管(guan)內(nei)皮細胞

大鼠(shu)棕色(se)脂肪(fang)幹(gan)分離自(zi)棕色(se)脂肪(fang)組織；動物體內存在(zai)棕色(se)和白色(se)兩種脂肪(fang)，白色(se)脂肪(fang)堆(dui)積在(zai)皮(pi)下(xia)，負(fu)責(ze)儲(chu)存多余(yu)熱(re)量；棕色(se)脂肪(fang)負(fu)責分解(jie)引(yin)發(fa)肥胖的白色(se)脂肪(fang)，將(jiang)後者轉(zhuan)化成(cheng)二(er)氧化碳(tan)、水(shui)和熱(re)量，本(ben)身不儲(chu)存熱(re)量。棕色(se)脂肪(fang)組織呈(cheng)棕色(se)，其(qi)特(te)點(dian)是(shi)組織中(zhong)有(you)豐富的(de)毛細血(xue)管(guan)，脂肪(fang)細胞內(nei)散著許(xu)多小脂滴(di)，線(xian)粒(li)體大而豐富，核(he)圓(yuan)形，位(wei)於(yu)細胞中(zhong)央，這(zhe)種脂肪(fang)細胞也稱(cheng)為(wei)多泡脂肪(fang)細胞。棕色(se)脂肪(fang)組織在(zai)成(cheng)年動(dong)物極(ji)少(shao)，新生(sheng)兒及(ji)冬眠(mian)動(dong)物較(jiao)多(duo)，在(zai)新生(sheng)兒主(zhu)要分布在(zai)肩(jian)胛(jia)間區、腋(ye)窩及(ji)頸後部(bu)等處。棕色(se)脂肪(fang)組織僅在(zai)嬰(ying)兒時期發(fa)揮作(zuo)用，它(ta)們堆(dui)積(ji)在(zai)新生(sheng)兒肩(jian)胛(jia)處，幫助(zhu)維(wei)持體溫(wen)。隨著年齡(ling)增(zeng)長(chang)，棕色(se)脂肪(fang)會逐漸消失(shi)。最終(zhong)，動物體內只殘存少量棕色(se)脂肪(fang)細胞，分(fen)布於(yu)頸(jing)部(bu)和(he)鎖骨。脂肪(fang)幹(gan)細胞（ADSCs）是壹種具(ju)有(you)多(duo)向分化潛(qian)能(neng)的幹(gan)細胞，主(zhu)要恢復(fu)組織細胞的(de)修復(fu)功(gong)能，促進(jin)細胞的(de)再生(sheng)，恢復(fu)年輕(qing)面容的同(tong)時(shi)，身體機能也得(de)到充(chong)分(fen)改善(shan)，有(you)效(xiao)改善(shan)亞健康、早(zao)衰等疾病，由內(nei)而(er)外(wai)真正的(de)有(you)效(xiao)抵抗衰(shuai)老。脂肪(fang)幹(gan)細胞具(ju)有(you)很(hen)多優點(dian)：①具(ju)有(you)自(zi)我(wo)更(geng)新及(ji)多向分化的(de)潛(qian)能；②來(lai)源充(chong)足；③對供(gong)區(qu)的創(chuang)傷(shang)較(jiao)小；④獲得(de)率及(ji)體外擴(kuo)增(zeng)速率(lv)高(gao)。脂肪(fang)幹(gan)細胞是(shi)目(mu)前(qian)被(bei)廣泛(fan)應用(yong)於(yu)組織工(gong)程領(ling)域(yu)中(zhong)理(li)想的(de)種子(zi)細胞。
方(fang)法簡介(jie)：

公司(si)實(shi)驗(yan)室(shi)分離的大(da)鼠(shu)棕色(se)脂肪(fang)幹(gan)采(cai)用(yong)膠(jiao)原(yuan)酶(mei)消化法制(zhi)備而(er)來(lai)，細胞總(zong)量約為(wei)5×10?cells/瓶。
質量檢(jian)測：

公司(si)實(shi)驗(yan)室(shi)分離的大(da)鼠(shu)棕色(se)脂肪(fang)幹(gan)經(jing)CD90免疫熒(ying)光(guang)鑒(jian)定，純度可達90%以上，且(qie)不含(han)有(you)HIV-1、HBV、HCV、支(zhi)原(yuan)體、細菌(jun)、酵(jiao)母(mu)和(he)真菌(jun)等。

本(ben)公司(si)所有(you)產(chan)品僅供(gong)科(ke)學實(shi)驗(yan)，不做(zuo)其(qi)他科學(xue)實(shi)驗(yan)外的使用(yong)！

培養基 含(han)FBS、生(sheng)長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻(pin)率(lv) 每2-3天換液壹次

生(sheng)長特(te)性(xing) 貼壁

細胞形態(tai) 成(cheng)纖維(wei)細胞樣(yang)

傳(chuan)代特性(xing) 可傳(chuan)5代左右(you)；3代以內(nei)狀(zhuang)態

消化液 0.25%yi蛋(dan)白酶(mei)

培養條件 氣(qi)相(xiang)：空(kong)氣(qi)，95%；CO2，5%

準備工(gong)作(zuo)

1. 實(shi)驗(yan)器材準備：準備無菌(jun)的(de)培(pei)養(yang)皿(min)、培(pei)養瓶、移(yi)液管、離心管、手(shou)術器械等，並進(jin)行(xing)高(gao)壓(ya)滅(mie)菌(jun)或其(qi)他合(he)適(shi)的(de)消毒(du)處(chu)理(li)。

2. 試(shi)劑(ji)準備：配制(zhi)或購(gou)買(mai)合(he)適(shi)的(de)培養基、消化酶(mei)（如、膠(jiao)原(yuan)酶(mei)等）、胎(tai)牛血(xue)清(qing)、雙抗等試(shi)劑(ji)，確保其(qi)無菌(jun)且(qie)在(zai)有(you)效(xiao)期內(nei)。

3. 實(shi)驗(yan)動物或組織來(lai)源準備：根(gen)據實(shi)驗(yan)需求，選(xuan)擇合(he)適(shi)的(de)動物並進(jin)行(xing)相(xiang)應(ying)的(de)麻醉或處死(si)，獲(huo)取所(suo)需(xu)組織；或從已有(you)的(de)組織樣本(ben)庫中(zhong)獲取組織。

取材與(yu)處(chu)理(li)

1. 取材：在(zai)無菌(jun)條件下(xia)，迅(xun)速取出(chu)目(mu)標(biao)組織，盡量減少(shao)對組織的損(sun)傷(shang)，並去除多(duo)余(yu)的(de)脂肪(fang)、結(jie)締(di)組織等非目(mu)的(de)組織。

2. 清洗(xi)：將(jiang)取出(chu)的組織用預(yu)冷(leng)的無菌(jun)PBS沖(chong)洗(xi)數(shu)次，以去除血(xue)液和雜(za)質。

3. 剪切(qie)：將組織剪成(cheng)約1 - 2mm³的(de)小塊(kuai)，以便(bian)後續(xu)消化。

細胞分(fen)離

1. 消化：將(jiang)剪(jian)碎的(de)組織塊(kuai)放(fang)入(ru)含(han)有(you)適(shi)量消化酶(mei)的離心管中(zhong)，在(zai)37℃恒(heng)溫(wen)搖(yao)床(chuang)或培養(yang)箱(xiang)中(zhong)消化壹(yi)段(duan)時間。期間可輕(qing)輕搖(yao)晃(huang)離心管，使(shi)消化更(geng)均(jun)勻(yun)。

2. 終止消化：當(dang)組織塊(kuai)大(da)部(bu)分(fen)被(bei)消化成(cheng)單細胞懸液或小細胞團(tuan)時，加(jia)入(ru)含(han)血(xue)清(qing)的(de)培養(yang)基(ji)終(zhong)止(zhi)消化。

3. 過濾(lv)與(yu)離心：用細胞篩過濾(lv)細胞懸液，去除未消化的(de)組織碎片(pian)，然(ran)後將濾(lv)液以適(shi)當(dang)的轉速離心，收集(ji)細胞沈澱(dian)。

細胞觀(guan)察與(yu)檢(jian)測

1. 日常(chang)觀(guan)察：每(mei)天用倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡觀(guan)察細胞的(de)形態(tai)、生(sheng)長狀(zhuang)態、密度等，記(ji)錄細胞的(de)變化情(qing)況，如(ru)發(fa)現(xian)細胞汙(wu)染或異常(chang)，及(ji)時采(cai)取相(xiang)應(ying)措(cuo)施。
2. 細胞計(ji)數與(yu)活(huo)力(li)檢(jian)測：在(zai)需(xu)要時，可采(cai)用(yong)臺盼(pan)藍染色(se)等方(fang)法對細胞進(jin)行(xing)計(ji)數(shu)和(he)活(huo)力(li)檢(jian)測，以了(le)解(jie)細胞的(de)生(sheng)長情(qing)況和(he)健(jian)康(kang)狀(zhuang)態。

壹、取材與(yu)分(fen)離

1. 快速操(cao)作(zuo)

- 組織取材後(hou)需(xu)立(li)即(ji)處理(li)，避(bi)免長時間暴(bao)露(lu)於(yu)室(shi)溫(wen)或非營(ying)養環境(jing)。

- 使用無菌(jun) PBS 或生(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui)沖(chong)洗(xi)組織，去除血(xue)液、雜(za)質。

2. 消化酶(mei)選(xuan)擇

- 根據組織類(lei)型(xing)選(xuan)擇消化酶(mei)，避(bi)免過度(du)消化導(dao)致(zhi)細胞損(sun)傷(shang)。

- 消化時(shi)間需嚴(yan)格(ge)控制(zhi)（通常(chang) 10-30 分鐘(zhong)），可(ke)通過顯微(wei)鏡觀(guan)察細胞解(jie)離狀(zhuang)態。

二(er)、培養(yang)條件優化

1. 培養基選(xuan)擇

- 使用含(han)血(xue)清(qing)或特定(ding)生(sheng)長因子(zi)的(de)培養(yang)基（如(ru) DMEM、RPMI 1640 等），部(bu)分(fen)細胞需(xu)添加胰(yi)島(dao)素、EGF 等。

- 避(bi)免頻(pin)繁(fan)更(geng)換(huan)培(pei)養基(ji)品(pin)牌或批(pi)次，減(jian)少細胞適(shi)應(ying)壓(ya)力(li)。

2. 貼壁與(yu)傳(chuan)代

- 原(yuan)代細胞貼(tie)壁能(neng)力(li)較(jiao)弱，可能需要包(bao)被(bei)培養(yang)皿(min)（如(ru)膠(jiao)原(yuan)蛋(dan)白、多(duo)聚(ju)賴(lai)氨酸）。

- 傳(chuan)代時密度建(jian)議控制(zhi)在(zai) 70%-80%，過度(du)匯合(he)會導致(zhi)接(jie)觸(chu)抑制(zhi)和分(fen)化。

三、汙(wu)染控制(zhi)

1. 無菌(jun)操(cao)作(zuo)

- 全程在(zai)超(chao)凈(jing)臺操(cao)作(zuo)，使用(yong)壹次性(xing)耗材，避(bi)免交叉汙(wu)染。

- 培養基中(zhong)可添加雙抗，但(dan)長期使(shi)用(yong)可能(neng)影(ying)響(xiang)細胞活(huo)性(xing)。

2. 支原(yuan)體檢(jian)測

- 定期檢(jian)測支原(yuan)體汙染（如(ru) PCR 法），汙染後(hou)需(xu)及(ji)時丟棄(qi)細胞。

四、狀(zhuang)態監控

1. 日常(chang)觀(guan)察

- 每天檢(jian)查細胞形態(tai)、密度及(ji)培養基顏色(se)，及(ji)時更(geng)換(huan)培(pei)養基(ji)（通(tong)常每(mei) 2-3 天換液壹次）。

- 異常形態(tai)（如細胞變(bian)圓(yuan)、碎片增(zeng)多）可(ke)能(neng)提(ti)示(shi)汙染或營(ying)養不足。

2. 傳(chuan)代與(yu)凍存

- 原(yuan)代細胞分(fen)裂(lie)次數(shu)有(you)限（壹(yi)般(ban) 5-10 代），需及(ji)時凍存早(zao)期代次細胞。

- 凍存液建議使(shi)用 DMSO+血(xue)清(qing)（或專用(yong)凍存培養(yang)基(ji)），梯度降(jiang)溫(wen)後(hou)液氮(dan)保存。